一株产L-赖氨酸的大肠杆菌构建及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株产L‑赖氨酸的大肠杆菌构建及其应用，属于生物工程技术领域。本发明专利技术中的菌株FMME‑XC5能够利用工业葡萄糖中的麦芽糖、潘糖和异麦芽糖，有效提高葡萄糖得率，也可以利用硝酸盐或亚硝酸盐，使得以甜菜糖蜜为底物成为可能。最终，在5L发酵罐上L‑赖氨酸产量可以达到220g/L，葡萄糖得率提高至75％，产量较优化前提高了40.68％。转化率较优化前提高了20.03％。本发明专利技术提供的菌株FMME‑XC5具有工业实用性价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一株产l-赖氨酸的大肠杆菌构建及其应用，属于生物工程。

技术介绍

1、赖氨酸(l-lysine)，分子量146.19da，是一种α-氨基酸，化学式表示为：ho2cch(nh2)(ch2)4nh2，遗传密码是aaa和aag。赖氨酸与精氨酸，组氨酸一样，属于碱性氨基酸。由于赖氨酸是动物和人体的必需氨基酸之一，因此广泛用于动物饲料添加剂、食品、医药健康、化工新材料等领域，其中90％赖氨酸被应用在饲料行业。

2、发酵法生产赖氨酸具有污染小、成本低等优势，已经逐步取代传统的抽提法、化学合成法和酶法等生产方式。目前，大部分研究中赖氨酸生产菌的无机氮源为(nh4)2so4，最高产量(以盐酸盐计)可达到200g/l。

3、目前对于赖氨酸生产菌株的构建优化均集中通过加强糖酵解、三羧酸循环等碳代谢路径提高菌株的赖氨酸生产能力，而赖氨酸作为一种含有两个氨基的碱性氨基酸，其合成过程中亦需要充足的氮源供应，但对于加强和改造大肠杆菌氮代谢路径进行赖氨酸生产的研究相对缺乏。同时对于工业葡萄糖、甜菜糖蜜等原料中含有的麦芽糖、潘糖、硝酸盐和亚硝酸盐等形本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一株产L-赖氨酸的大肠杆菌菌株FMME-XC5，其特征在于，以保藏编号为CCTCCNO:M2019435的大肠杆菌为出发菌株，整合表达asd、lysC、aspC、ddh、malA、gdhA、nasBC和nirBD中的一个或多个基因，并且敲除基因组上的mlc。

2.根据权利要求1所述的大肠杆菌菌株FMME-XC5，其特征在于，敲除基因组上的lacZ、cadA、gntT和gntU中的一个或多个基因。

3.根据权利要求2所述的大肠杆菌菌株FMME-XC5，其特征在于，敲除lacZ后，在该位点整合表达asd、lysC、aspC和ddh；敲除cadA后，在该位点整合表达...

【技术特征摘要】

1.一株产l-赖氨酸的大肠杆菌菌株fmme-xc5，其特征在于，以保藏编号为cctccno:m2019435的大肠杆菌为出发菌株，整合表达asd、lysc、aspc、ddh、mala、gdha、nasbc和nirbd中的一个或多个基因，并且敲除基因组上的mlc。

2.根据权利要求1所述的大肠杆菌菌株fmme-xc5，其特征在于，敲除基因组上的lacz、cada、gntt和gntu中的一个或多个基因。

3.根据权利要求2所述的大肠杆菌菌株fmme-xc5，其特征在于，敲除lacz后，在该位点整合表达asd、lysc、aspc和ddh；敲除cada后，在该位点整合表达mala；敲除gntt后，在该位点整合表达gdha；敲除gntu后，在该位点整合表达nasbc和nirbd。

4.一种组合物，其特征在于，含有权利要求1～3任一所述大肠杆菌菌株fmme-xc5。

5.一种生产l赖氨酸的方法，其特征在于，所述方法是在含有以葡萄糖、麦芽糖、异麦芽糖和/或潘糖为碳源的发酵培养基中，利用权利要求1～3任一所述大肠杆菌菌株fmme-xc...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘立明，许雪晨，柳亚迪，王浩淼，刘佳，高聪，陈修来，宋伟，吴静，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：