一种用于检测dsRNA在动物体内降解规律的技术方法技术

技术编号:4214368 阅读:298 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
一种用于检测dsRNA在动物体内降解规律的技术方法,它涉及一种检测一类新生物技术药物代谢的技术方法。动物应用dsRNA后一定时间内,取动物血清样本,提取RNA,点样于1%琼脂糖凝胶进行电泳分析,根据电泳条带的迁移率,判断dsRNA分子大小的降解程度;用BandLeader?Ver?3.00软件对电泳条带的亮度进行分析,计算得到样本中dsRNA的含量,用以判断dsRNA从体内代谢的快慢。解决了dsRNA类药物在动物体内降解情况的定量测定问题,对于dsRNA类药物的药物代谢动力学的研究方法具有重要实际应用意义。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种用于检测dsRNA在动物体内降解规律的技术方法,其特征在于实验方法的工作过程为:a:动物应用dsRNA后一定时间内,取动物血清样本1ml于离心管中;b:加2ml用Tris-HCl平衡的苯酚(pH8.0),于室温振荡2min;c:用吸管将上清液转移至另一个装有1ml氯仿∶异戊醇(24∶1)的离心管中,振荡5min后以7,000rpm离心15min分相;d:将上层水相转移至另一装有110μl预冷的1mol/LTris-HCl(pH8.0)和45μl5molNaCl的离心管中,加2倍体积预冷的无水乙醇,混匀,置-20℃至少30min;e:10,000rpm离心15min沉淀dsRNA,弃去乙醇,倒置晾干,备用;f:制备1%琼脂糖凝胶,将处理好的dsRNA沉淀加50μlTE溶解,点样,电泳;g:用RNA染色剂对电泳条带进行染色、拍照;h:将电泳图片输入电脑,用BandLeaderVer3.00软件对电泳条带的亮度进行分析,计算得到样本中dsRNA的含量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘宗柱
申请(专利权)人:青岛农业大学
类型:发明
国别省市:95[中国|青岛]

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