一种携带跨膜蛋白PSMA外泌体检测试剂盒及应用制造技术

本申请文件中的公开内容涉及一种携带跨膜蛋白PSMA外泌体检测试剂盒及应用，更具体而言，涉及该试剂盒的制备方法，以及检测方法的应用。前列腺特异性膜抗原（Prostate‑specific membrane antigen，PSMA）又称叶酸水解酶1（FOLH1），是一种跨膜糖蛋白；研究表明，PSMA在90%的转移性前列腺癌中过表达，而在正常组织中生理表达水平较低，并且在晚期和去势抵抗性患者的癌细胞中表达水平更高，而在正常组织如小肠、前列腺或其他肿瘤中表达水平较低，并且随着前列腺癌恶性程度的增高，前列腺癌细胞上PSMA的表达量也相应增加。PSMA是前列腺癌细胞的一个特征性分子，前列腺癌细胞分泌的含有PSMA外泌体，有助于筛选体内隐藏的前列腺癌细胞。目前尚没有，监测携带跨膜蛋白PSMA特征外泌体的监测试剂的开发。本发明专利技术通过以下技术方案的实施实现了携带跨膜蛋白PSMA外泌体检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体的为一种携带跨膜蛋白psma外泌体检测试剂盒制备及应用。

技术介绍

1、据全球癌症数据统计，前列腺癌的发病率占比第四，仅次于乳腺癌、肺癌和结直肠癌。全人群男性前列腺癌的发病率在持续上升。前列腺癌已是男性第二大常见的癌症，是男性癌症死亡的第三大常见原因。

2、前列腺特异性膜抗原(prostate-specific membrane antigen，psma)又称叶酸水解酶1(folh1)，是一种跨膜糖蛋白，由胞外c末端、跨膜结构和胞质n端构成，胞外区占整个糖蛋白的95％，是多肽、适配体、小分子和抗体识别的主要位点。

3、前列腺特异性膜抗原(psma)是一种非分泌性膜酶，具有羧肽酶和叶酸水解酶的活性，具有较大的细胞外结构域。psma受体在前列腺癌细胞中具有致癌信号作用，作用于谷氨酸受体并激活pi3 k和akt生长途径。目前的研究表明它在90％的转移性前列腺癌中过表达，而在正常组织中生理表达水平较低，并且在晚期和去势抵抗性患者的癌细胞中表达水平更高，而在正常组织如小肠、前列腺或其他肿瘤中表达水平较低，并且随着前列腺本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种携带跨膜蛋白PSMA外泌体检测试剂盒，其特征在于可也检测携带PSMA的外泌体及方法，进一步的携带PSMA外泌体检测试剂盒包含独立的组分为：工作液1、工作液2、阴性质控品和阳性质控品。

2.如权利1中所述的工作液1，其特征在于通过包被磁性微球的捕获抗体制备；进一步的所述的磁性微球其特征在于超顺磁性，粒径可从50nm-5μm；进一步的所述的捕获抗体其特征在于可以结合外泌体膜表面蛋白、跨膜蛋白和吸附蛋白等的哺乳动物源抗体。如权利1中所述的工作液2，其特征在于通过发光物质标记PSMA抗体制备；进一步的所述的发光物质其特征在于可为化学物质激发发光、电致发光、荧光以及其聚合物；进...

【技术特征摘要】

1.一种携带跨膜蛋白psma外泌体检测试剂盒，其特征在于可也检测携带psma的外泌体及方法，进一步的携带psma外泌体检测试剂盒包含独立的组分为：工作液1、工作液2、阴性质控品和阳性质控品。

2.如权利1中所述的工作液1，其特征在于通过包被磁性微球的捕获抗体制备；进一步的所述的磁性微球其特征在于超顺磁性，粒径可从50nm-5μm；进一步的所述的捕获抗体其特征在于可以结合外泌体膜表面蛋白、跨膜蛋白和吸附蛋白等的哺乳动物源抗体。如权利1中所述的工作液2，其特征在于通过发光物质标记psma抗体制备；进一步的所述的发光物质其特征在于可为化学物质激发发光、电致发光、荧光以及其聚合物；进一步的所述的psma抗体其特征在于可以结合psma蛋白的哺乳动物源抗体。如权利1中所述的阴性质控品，其特征在于其人源细胞产生的外泌体和工程化的人源的外泌体。如权利1中所述的阳性质控品，其特征在于人源细胞产生的外泌体和工程化的人源的外泌体。如权利1中所述的其特征在于可也检测携带psma的外泌体及方法，其特征在于通过免疫双夹心的原理检测方法，进一步的所述的免疫双夹心方法其特征在于可为酶联免疫吸附法、免疫荧光法、化学发光免疫分析法、电化学发光免疫分析法、微流控芯片免疫分析法、蛋白液相芯片法、数字酶联免疫吸附法和单分子免疫分析法等。

3.如权利2中所述的进一步的所述的磁性微球其特征在于超顺磁性，粒径可从50nm-5μm，其特征在于粒径可从50nm-5μm其中优选的为3μm。如权利要求2中所述的如权利1中所述的工作液2，其特征在于通过发光物质标记psma抗体制备；进一步的所述的发光物质其特征在于可为化学物质激发发光、电致发光、荧光以及其聚合物，其特征在于其中所述的化学发光物质为吖啶酯以及其衍生物，进一步优选的为吖啶酯聚合物。如权利要求2中所述的如权利1中所述的进一步的所述的psma抗体其特征在于可以结合psma蛋白的哺乳动物源抗体，其特征在于所述的可以结合psma蛋白的哺乳动物源抗体中的psma蛋白可为psma提取纯化蛋白和基因重组蛋白，进一步的所述的psma重组蛋白可为全长、可溶性胞外段，其他具有免疫原性的部分肽段，进一步的其中优选的为psma可溶性胞外段。如权利要求2中所述的进一步的所述的ps...

【专利技术属性】
技术研发人员：庞晓丛，刘芳朋，崔一民，周颖，虞巍，施学东，陈宇珂，翟小田，谷延伦，
申请(专利权)人：北京大学第一医院，
类型：发明
国别省市：