一种用于提高虫草素产量的重组蛹虫草及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种用于提高虫草素产量的重组蛹虫草及应用，所述重组蛹虫草是将外源基因重组质粒转化农杆菌，再用农杆菌侵染蛹虫草，筛选含外源基因的重组蛹虫草；所述外源基因为5'‑核苷酸酶NT5E基因、腺苷琥珀酸合成酶ADSS基因或腺苷琥珀酸裂解酶ADSL基因中的一种。本发明专利技术重组蛹虫草与野生蛹虫草相比，发酵液中胞外虫草素产量最高为6.28倍，菌丝体胞内虫草素产量最高为3.78倍，为进一步筛选蛹虫草优良菌株打下了基础。

【技术实现步骤摘要】

(一)本专利技术涉及一种用于提高虫草素产量的重组蛹虫草及应用。

技术介绍

0、(二)
技术介绍

1、蛹虫草(cordyceps militaris)，又称北冬虫夏草、北虫草，是一种常用的食药用真菌，与冬虫夏草属于同属真菌。与冬虫夏草苛刻的种植条件不同的是，蛹虫草不需要通过寄生就可以在实验室等环境下培养得到子实体，并且蛹虫草的化学能力和药用特性与冬虫夏草相近，被视为冬虫夏草的完美替代品。蛹虫草含多种药用成分，如虫草素、虫草多糖、虫草酸、超氧化物歧化酶(sod)等，拥有抗疲劳、提高免疫力、抗菌消炎、抗癌等多种功效。虫草素作为蛹虫草最重要的活性成分之一，是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗生素。研究表明虫草素含有多种生物功效，具有肺肾的保护性、抗三高、抗肿瘤、神经保护性、抗炎、抗氧化和免疫调节等生物活性，在抗衰老、保健、新药研制等领域备受学者关注。因此，虫草素在开发为药品或保健食品方面将有广阔的应用前景。

2、目前，虫草素的来源途径主要有三种：化学全合成法、从天然或人工培育的虫草属真菌子实体中提取或从虫草属真菌液体发酵培养的发酵液中提取。然而本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于提高虫草素产量的重组蛹虫草，其特征在于，所述重组蛹虫草是将外源基因重组质粒转化农杆菌，再用农杆菌侵染蛹虫草，筛选含外源基因的重组蛹虫草；所述外源基因为5'-核苷酸酶NT5E基因、腺苷琥珀酸合成酶ADSS基因或腺苷琥珀酸裂解酶ADSL基因中的一种。

2.如权利要求1所述的重组蛹虫草，其特征在于，所述5'-核苷酸酶NT5E基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述腺苷琥珀酸合成酶ADSS基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示，所述腺苷琥珀酸裂解酶ADSL基因的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。

3.如权利要求1所述的重组蛹虫草，其特征在...

【技术特征摘要】

1.一种用于提高虫草素产量的重组蛹虫草，其特征在于，所述重组蛹虫草是将外源基因重组质粒转化农杆菌，再用农杆菌侵染蛹虫草，筛选含外源基因的重组蛹虫草；所述外源基因为5'-核苷酸酶nt5e基因、腺苷琥珀酸合成酶adss基因或腺苷琥珀酸裂解酶adsl基因中的一种。

2.如权利要求1所述的重组蛹虫草，其特征在于，所述5'-核苷酸酶nt5e基因的核苷酸序列如seq id no：1所示，所述腺苷琥珀酸合成酶adss基因的核苷酸序列如seq id no：2所示，所述腺苷琥珀酸裂解酶adsl基因的核苷酸序列如seq id no：3所示。

3.如权利要求1所述的重组蛹虫草，其特征在于，所述外源基因采用组成型启动子表达，所述组成型启动子由酿酒酵母诱导aro9基因的启动子、酿酒酵母α-信息素多肽mfα1基因与酿酒酵母诱导型启动子fus1依次连接构成。

4.如权利要求3所述的重组蛹虫草，其特征在于，所述组成型启动子的核苷酸序列如seq id no：7所示。

5.如权利要求1所述的重组蛹虫草，其特征在于，所述外源基因重组质粒采用双元表达载体为基础载体，所述双元表达载体为pcambia-tcbh1-hph-ptrpc，其核苷酸序列如seq idno：8+seq idno：9连接所示。

6.如...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈龙，杨胜利，张慧，
申请(专利权)人：浙江工业大学，
类型：发明
国别省市：