基于Argonaute蛋白的核酸检测探针及其应用制造技术

本发明专利技术涉及核酸检测探针技术领域，尤其涉及一种基于Argonaute蛋白的核酸检测探针及其应用。制备方法包括：在金纳米颗粒分散液中加入浓度为1～3mg/mL的牛血清白蛋白溶液和浓度为1μM的TtAgo蛋白溶液，混匀，形成混合液；将所述混合液置于‑70℃以下冷冻5～15min；解冻后，再以6000～10000rpm/min的转速离心10～20min；去上清、保留沉淀，将所述沉淀用缓冲溶液进行重悬，得到金纳米‑TtAgo蛋白核酸检测探针。优点在于：本发明专利技术探针通过结合不同的gDNA靶向不同目的基因，无需针对不同基因构建不同的金基核酸探针，更加简便；提高试纸条检测的灵敏度，并实现突变基因的检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及核酸检测探针，尤其涉及一种基于argonaute蛋白的核酸检测探针及其应用。

技术介绍

1、分子诊断是应用分子生物学的方法检测患者体内遗传物质的结构或表达水平的变化而做出诊断的技术，是预测诊断的主要方法。核酸分子诊断是分子诊断的主要组成部分，指对受检个体片段基因序列的检测，根据检测结果对疾病作出诊断。目前，传统的核酸检测方式主要为pcr，即聚合酶链式反应。但这种传统的检测方法需要专业的实验室和设备，以及专业人员操作，并不适合应用于现场检测。

2、试纸条是一种将侧流层析和分子杂交等相结合、结果可视化的检测技术，通常由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸水垫和底板组成，具有操作便捷、快速高效、成本低等优势，目前主要应用于抗原抗体的检测。纸基分析技术是目前最简便的即时检测技术之一，已被广泛应用于抗原检测。抗原在流经试纸条时，首先与金垫上包埋的抗体修饰的金基探针特异性结合，所获得的杂交体在流经检测线时被其上固定的捕获抗体进一步识别，在检测线上呈现出纳米金固有的红色，因此肉眼可以直接读取抗原的有无。将金基探针上修饰的抗体和检测线上的捕获抗体替换本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.金纳米-TtAgo蛋白核酸检测探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的金纳米-TtAgo蛋白核酸检测探针的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中金纳米颗粒分散液、牛血清白蛋白溶液和TtAgo蛋白溶液的体积比为100：4～6：1.5～2.5。

3.根据权利要求2所述的金纳米-TtAgo蛋白核酸检测探针的制备方法，其特征在于：所述步骤S1中金纳米颗粒分散液、牛血清白蛋白溶液和TtAgo蛋白溶液的体积比为100：5：2。

4.根据权利要求3所述的金纳米-TtAgo蛋白核酸检测探针的制备方法，其特征在于：所述步骤S2中的冷冻温度为...

【技术特征摘要】

1.金纳米-ttago蛋白核酸检测探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的金纳米-ttago蛋白核酸检测探针的制备方法，其特征在于：所述步骤s1中金纳米颗粒分散液、牛血清白蛋白溶液和ttago蛋白溶液的体积比为100：4～6：1.5～2.5。

3.根据权利要求2所述的金纳米-ttago蛋白核酸检测探针的制备方法，其特征在于：所述步骤s1中金纳米颗粒分散液、牛血清白蛋白溶液和ttago蛋白溶液的体积比为100：5：2。

4.根据权利要求3所述的金纳米-ttago蛋白核酸检测探针的制备方法，其特征在于：所述步骤s2中的冷冻温度为-80℃。

5.根据权利要求4所述的金纳米-ttago蛋白核酸检测探针的制备方法，其特征在于：所述步骤s3中的离心转速为8000rpm/min。

6.金纳米-ttago蛋白核...

【专利技术属性】
技术研发人员：周非凡，黄茹，陈斌，张凡，魏嘉诚，
申请(专利权)人：海南大学，
类型：发明
国别省市：