一种特异性区分附子品种的引物对、试剂盒及其应用制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体涉及一种特异性区分附子品种的引物对、试剂盒及其应用。本发明专利技术对附子品种（云附Ⅰ号和云附Ⅱ号）的叶绿体全基因组进行测序，发现5个高度可变的位点，包括基因区trnK(UUU)，以及基因间区trnS(UGA)‑psbZ、trnE(UUC)‑trnT(GGU)、trnC(GCA)‑petN和rps18‑rpl20，在两个品种中存在显著差异。本发明专利技术基于上述差异序列，设计了8个专用特异性引物对，并利用上述引物对检验了云附Ⅰ号和云附Ⅱ号PCR扩增效果。结果表明所有引物对均能获得PCR产物，扩增成功率为100%。进一步对PCR产物进行测序的结果显示，trnS(UGA)‑psbZ序列的引物组Primer 3具有显著特异性，在两个品种间差异最明显，测序成功率为100%，Primer 3可用于附子主流品种的准确鉴定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物，具体涉及一种特异性区分不同附子品种（云附ⅰ号和云附ⅱ号）的引物对、试剂盒及其应用。

技术介绍

1、乌头属 aconituml.是毛茛科最大的属之一，全球约400种，主要分布在亚洲，其次是欧洲和北美。中国作为其主要分布区之一，约有170个物种。其中，附子为毛茛科植物乌头（ aconitum carmichaeliidebeaux）的子根加工品，是我国40种大宗中药材之一。数千年来一直被用于治疗感冒、关节痛、腹泻、水肿、脚气和心力衰竭等多种疾病。此外，附子花朵颜色鲜艳，也可栽培作为观赏植物。现代药理学研究表明，附子及其粗提物具有免疫调节、肾脏保护、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理活性。《中华人民共和国药典》中含有附子类药材的中成药制剂有近300种，附子显著的心脏保护和抗炎作用维持了其在国内外市场的高需求。据报道，附子年使用量高达3000吨。

2、附子作为我国重要药用植物，已有1300多年的栽培历史。不同的气候、土壤、生态条件孕育了丰富的附子种质资源。目前本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.本专利技术提供了一种特异性区分附子品种（云附Ⅰ号和云附Ⅱ号）的引物对，其特征在于，所述引物对包括上游引物F和下游引物R；所述上游引物F的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示：GGAACATGGTCGTATGAGTT；所述下游引物R的核苷酸序列如SED ID No.2所示：ACCATGAACCCATTGATCCT。

2.一种特异性区分云附Ⅰ号和云附Ⅱ号的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有权利要求1所述的引物对，试剂盒可以特异性区分云附Ⅰ号和云附Ⅱ号。

3.一种如权利要求1所述引物对或权利要求2所述试剂盒在区分云附Ⅰ号和云附Ⅱ号中的应用。p>

4.一种特...

【技术特征摘要】

1.本发明提供了一种特异性区分附子品种（云附ⅰ号和云附ⅱ号）的引物对，其特征在于，所述引物对包括上游引物f和下游引物r；所述上游引物f的核苷酸序列如seq id no.1所示：ggaacatggtcgtatgagtt；所述下游引物r的核苷酸序列如sed id no.2所示：accatgaacccattgatcct。

2.一种特异性区分云附ⅰ号和云附ⅱ号的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒含有权利要求1所述的引物对，试剂盒可以特异性区分云附ⅰ号和云附ⅱ号。

3.一种如权利要求1所述引物对或权利要求2所述试剂盒在区分云附ⅰ号和云附ⅱ号中的应用。

4.一种特异性区分云附ⅰ号和云附ⅱ号的方法，包括以下步骤：

5.根据权利要求4所述的一种特异性区分云附ⅰ号和云附ⅱ号的方法，其特征在于，所述pcr扩增反应程序包括：94°c预变性3 min；94°c变性30 ...

【专利技术属性】
技术研发人员：段宝忠，刘颖琳，蒲婷婷，王雅平，尚明越，朱泽梅，廖彬彬，
申请(专利权)人：大理大学，
类型：发明
国别省市：