一种检测四环素类抗生素的核酸适配体试纸条制造技术

本发明专利技术公开了一种检测四环素类抗生素的核酸适配体试纸条，涉及分子生物学领域。本发明专利技术旨在结合适配体和侧流层析试纸条（Lateral flow chromatography strip,LFS）的优势，以TCs核酸适配体（APT‑T1‑2）为分子识别元件，设计并构建了一种简便、快捷、灵敏的Apt‑LFS用于牛奶中四环素残留的现场检测。将AuNPs与APT‑T1‑2偶联制备TCs识别探针，在测试线（T‑线）处喷洒聚阳离子聚二烯丙基二甲基氯化铵（PDDA）使其通过强静电相互作用捕获AuNPs。通过观察T线的颜色变化，可在2 min内通过肉眼实现TCs的定性检测，目视限为10 nM。同时，通过T‑线灰度值分析，可以实现1~300 nM的线性检测范围和0.33 nM的定量分析的低检测限，加标样品的回收率为96.24%~105.33%。因此，该生物传感器不仅不存在复杂的样品前处理过程，检测方便快速，还具备极高的检测灵敏度和分析特异性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种检测四环素类抗生素的核酸适配体试纸条，属于分子生物学领域。

技术介绍

1、抗生素滥用和混用引发的食品安全和环境污染问题不容忽视。四环素类抗生素（tcs）作为一种广谱抑菌剂因其低成本和高效率而被广泛用于治疗细菌感染和促进动物生长。然而，大量的使用可能导致其在乳制品中残留，对人体健康造成潜在危害，包括产生耐药性、影响人体肠道菌落、引发过敏反应等。因此，除了在生产源头上限制抗生素的使用之外，快速精准的地检测出牛奶中多种抗生素残留是确保乳制品安全的关键步骤。

2、目前，四环素类抗生素的标准分析检测方法主要包括高效液相色谱、气相色谱-质谱法等。但这些方法大多需要依托于大型仪器设备从而限制了其在快速检测和现场检测的应用。近年来，侧流免疫层析试纸条因其直观观察、操作简单被广泛用于食品中有害物质的现场检测。侧流层析试纸条（lfs）是一种基于色谱的生物传感器，具有操作简单、携带方便、检测快速等优点。基于颜色变化的lfs可以用肉眼迅速分析样品，无需借助任何专业设备。但其中关键的识别元件——抗原抗体本身制备过程复杂、价格昂贵且储存稳定性差，这些缺点本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种检测四环素类抗生素的核酸适配体试纸条，其特征在于，包括样品垫、吸水纸、硝化纤维素（NC）膜和聚氯乙烯（PVC）基板，所述NC膜、吸水纸、样品垫依次固定在PVC基板上，各部分之间的重叠不超过2 mm。

2.根据权利要求1所述的一种检测四环素类抗生素的核酸适配体试纸条，其特征在于，所述核酸适配体是经过特异性筛选和裁剪得到的，能够高效地与四环素类抗生素结合并产生特定的反应，所用适配体APT-T1-2的序列为：TCGTCGACGGATCCATGGCACATGGATTACTAGCGAACGCATGAGCCGGCTGCGGCGCATGCGT。

3. 根据权利要求1所述...

【技术特征摘要】

1.一种检测四环素类抗生素的核酸适配体试纸条，其特征在于，包括样品垫、吸水纸、硝化纤维素（nc）膜和聚氯乙烯（pvc）基板，所述nc膜、吸水纸、样品垫依次固定在pvc基板上，各部分之间的重叠不超过2 mm。

2.根据权利要求1所述的一种检测四环素类抗生素的核酸适配体试纸条，其特征在于，所述核酸适配体是经过特异性筛选和裁剪得到的，能够高效地与四环素类抗生素结合并产生特定的反应，所用适配体apt-t1-2的序列为：tcgtcgacggatccatggcacatggattactagcgaacgcatgagccggctgcggcgcatgcgt。

3. 根据权利要求1所述的一种检测四环素类抗生素的核酸适配体试纸条，其特征在于，将核酸适配体apt-t1-2和浓缩后的aunps溶液混合均匀后在室温下孵育30 min制备aunps@apt-t1-2分子识别探针。

4.根据权利要求1所述的一种检测四环素类抗生素的核酸适配体试纸条，其特征在于，所述硝化纤维素膜上设有检测线，所述检测线上喷洒...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙霞，郭业民，白梦圆，翟晟西，
申请(专利权)人：山东理工大学，
类型：发明
国别省市：