细胞扩增方法和其中使用的组合物技术

技术编号:42113101 阅读:31 留言:0更新日期:2024-07-25 00:34
本技术整体涉及用于在培养物中在改性表面上扩增间充质干细胞的方法和组合物,在该改性表面上不存在饲养细胞层并且不存在细胞粘附涂层。在一些情况下,这些间充质干细胞在无血清培养基中在该改性表面上扩增。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】


技术介绍

1、间充质干细胞(msc)是能够分化成不同类型的各种细胞,诸如骨细胞、软骨细胞、成纤维细胞、肌细胞、上皮细胞、肝细胞或神经元的细胞。这些多能细胞正被临床研究作为用于治疗多种人类疾病的治疗剂。由于msc允许自体移植,所以它们是一种非常适合于细胞和/或基因疗法以及用于再生医学应用的细胞类型。msc的免疫学特性,诸如抗炎、免疫调节和免疫抑制能力,有助于它们作为免疫耐受剂的潜在作用。

2、msc存在于包括骨髓、脂肪、滑膜和脐带血在内的几乎所有组织中,并且容易从这些组织中提取。用于从各种人和动物组织和器官中提取、分离和鉴定msc的方法在文献中有很好的记载。还描述了用于多能msc的生长和维持以及用于培养物中msc的多谱系分化的培养基和条件。

3、用于在培养物中生长msc的当前方法需要在培养基中存在血清和/或存在涂覆细胞培养表面的细胞外基质蛋白。一些方法还需要在覆盖培养生长表面的饲养细胞层上培养msc。饲养细胞、血清和细胞外基质蛋白通常是不明确的细胞培养试剂,因此不能用于生产细胞治疗产品或药剂。血清和/或细胞外基质涂层的使用也增加了成本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种扩增间充质干细胞群体的方法,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述表面含有至少约0.9%的N,具有大于或等于19.0%的O和N的总和并且具有至少约14度的静态固着接触角。

3.根据权利要求2所述的方法,其中,所述表面含有约0.9%至约3.2%的N,具有约19%至约35%的O和N的总和并且具有约14度至约65度的固着接触角。

4.根据权利要求2所述的方法,其中,所述表面含有约1.3%至约2.8%的N,具有约22%至约29%的O和N的总和并且具有约17度至约55度的固着接触角。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

1.一种扩增间充质干细胞群体的方法,所述方法包括:

2.根据权利要求1所述的方法,其中,所述表面含有至少约0.9%的n,具有大于或等于19.0%的o和n的总和并且具有至少约14度的静态固着接触角。

3.根据权利要求2所述的方法,其中,所述表面含有约0.9%至约3.2%的n,具有约19%至约35%的o和n的总和并且具有约14度至约65度的固着接触角。

4.根据权利要求2所述的方法,其中,所述表面含有约1.3%至约2.8%的n,具有约22%至约29%的o和n的总和并且具有约17度至约55度的固着接触角。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法,其中,所述生长培养基是无血清的。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法,其中,所述生长培养基是无动物来源成分培养基和/或无异种成分培养基。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法,其中,所述生长培养基选自stemprotmmsc无血清培养基、stemprotmmsc xenofree无血清培养基、mesenpro rstm培养基、杜尔贝科氏改良伊格尔培养基(dmem)、dmem/f12、低葡萄糖dmem、高葡萄糖dmem、advanced dmem/f12;mscxf培养基、rpmi 1640培养基、最低必需培养基α(memα)、伊思柯夫氏改良杜尔贝科氏培养基(imdm)和伊格尔基础培养基(bme)。

8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法,其中,所述msc分离自骨髓、脂肪组织、真皮、胎盘、脐带、羊水、滑液、滑膜、乳牙或骨骼肌。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法,其中,所述msc是人msc、非人灵长类动物msc、鼠msc、大鼠msc、猪msc、山羊msc或绵羊msc。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法,其中,在(ii)的所述培养之前,在包含粘附涂层的培养容器中在培养容器表面上培育所述多个msc。

11.根据权利要求10所述的方法,其中,所述粘附涂层包含细胞外基质。

12.根据权利要求1至11中任一项所述的方法,其中,所述培养包括使所述msc在生长培养基中在所述表面上生长至少3代。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法,其中,所述培养包括使所述msc在生长培养基中在所述表面上生长至少6代。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法,其中,使用等离子体处理对所述表面进行改性。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法,其中,所述表面包括聚苯乙烯、环烯烃聚合物、环烯烃共聚物、聚烯烃、聚碳酸酯、聚甲基丙烯酸甲酯、苯乙烯丙烯腈共聚物以及它们的混合物和共聚物。

16.根据权利要求1至14中任一项所述的方法,其中,所述表面包括等离子体处理的聚苯乙烯。

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【专利技术属性】
技术研发人员:D·约翰逊S·斯伯凌
申请(专利权)人:生命技术公司
类型:发明
国别省市:

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