甾酮C1,2位脱氢酶突变体及其在合成醋酸四烯物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种甾酮C1,2位脱氢酶突变体及其在合成醋酸四烯物中的应用，本发明专利技术通过分子生物学技术和蛋白质工程技术，挖掘并改造甾酮C1,2位脱氢酶，获得性质优良的突变体，甾酮C1,2位脱氢酶突变体的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:5～SEQ ID NO:12所示，在递氢体和氧气的参与下，能够催化60g/L的醋酸三烯物的氧化合成醋酸四烯物，在10h内转化率达到99.1％，时空产率达5.94g/L/h，具有绿色安全、反应周期短、纯化简单、成本低廉等优势，具有极好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于酶催化与制药工程，具体涉及一种甾酮c1,2位脱氢酶突变体及其在合成醋酸四烯物中的应用。

技术介绍

1、醋酸四烯物(tetraene acetate，3tr)，中文别名：21-羟基孕甾-1,4,9(11),16-四烯-3,20-二酮-21-醋酸酯，分子式为c23h26o4，结构式如下所示：

2、

3、3tr是一种合成类固醇，在体外研究中有着广泛的应用，可能具有抗炎、免疫抑制和抗肿瘤等药理作用。同时，3tr也是合成地塞米松、倍他米松、曲安奈德、布地奈德等肾上腺糖皮质激素类药物的重要中间体，市场需求大。

4、起初，3tr主要通过化学法合成。专利cn102603843a采用1,4,9(11)-三烯-雄甾-3,17-二酮作为起始原料，依次经过炔化、酯化、氧化和重排等步骤，最终合成98％纯度的3tr，收率介于50-70％之间。专利cn105622699a以4,9(11)-二烯-3,17-二酮为起始物料，通过醚化、加成、水解、消去、取代、重排和脱氢等一系列反应，最终制得98.3％纯度的3tr，收率仅为47％。专利cn10本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种甾酮C1,2位脱氢酶突变体，其特征在于，所述甾酮C1,2位脱氢酶突变体为在如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列上进行如下任意一种氨基酸残基替换突变获得；

2.根据权利要求1所述的甾酮C1,2位脱氢酶突变体，其特征在于，所述甾酮C1,2位脱氢酶突变体的氨基酸序列分别如SEQ ID NO:5～SEQ ID NO:12所示。

3.根据权利要求1所述的甾酮C1,2位脱氢酶突变体，其特征在于，编码SEQ ID No.4所示氨基酸序列的核苷酸序列如SEQ ID No.16所示；

4.如权利要求1～3任意一项所述的甾酮C1,2位脱氢酶突变体在合成醋酸四烯...

【技术特征摘要】

1.一种甾酮c1,2位脱氢酶突变体，其特征在于，所述甾酮c1,2位脱氢酶突变体为在如seq id no.4所示的氨基酸序列上进行如下任意一种氨基酸残基替换突变获得；

2.根据权利要求1所述的甾酮c1,2位脱氢酶突变体，其特征在于，所述甾酮c1,2位脱氢酶突变体的氨基酸序列分别如seq id no:5～seq id no:12所示。

3.根据权利要求1所述的甾酮c1,2位脱氢酶突变体，其特征在于，编码seq id no.4所示氨基酸序列的核苷酸序列如seq id no.16所示；

4.如权利要求1～3任意一项所述的甾酮c1,2位脱氢酶突变体在合成醋酸四烯物中的应用。

5.一种甾酮c1,2位脱氢酶的表达质粒，其特征在于，包含启动子、rbs序列、seq idno.17～24中任意一项核苷酸序...

【专利技术属性】
技术研发人员：林娟，苏冰梅，陈兵，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：