一种表达柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原的口服重组酵母、多组分疫苗及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种新的表达柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原同源分子的口服重组酵母疫苗，上述酵母疫苗中表达柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原同源分子(EtAMA1、EtAMA2、EtAMA3、EtAMA4)，可明显抑制子孢子的入侵。上述口服重组酵母疫苗实现了EtAMA1‑4在酿酒酵母表达系统中的高效表达，具有较好的免疫保护效果，可用于柔嫩艾美耳球虫感染的免疫预防，可以用于制备治疗鸡球虫病的药物和疫苗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，尤其涉及一种表达柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原的口服重组酵母、针对上述柔嫩艾美耳球虫顶膜抗原的单克隆抗体、含有上述两种有效成分的多组分疫苗及其应用。

技术介绍

1、鸡球虫病是由一种或多种艾美耳属(eimeria spp.)球虫寄生于鸡的肠道上皮细胞所引起的寄生原虫病，是集约化养殖业危害最大的流行病之一，给全世界养禽业造成了庞大的经济损失，严重制约产业的健康发展。在全球范围内，鸡球虫病防治的费用从2002年的8亿美元上升到2006年的30亿美元。到2020年，全球损失被重新估算为每年约104亿英镑。实践证明，疫苗接种能有效控制球虫病，是禁抗限抗背景下球虫病防控的发展趋势。但目前广泛使用的商品化球虫疫苗均是活疫苗，由3-8种球虫活卵囊组成，免疫后影响生产性能，且存在散毒、生产过程繁琐、价格昂贵等不足，因此，迫切需要研制新型口服球虫病疫苗。

2、顶膜抗原(apical membrane antigens，amas)是顶复门原虫中一类高度保守的微线蛋白，能与棒状体分泌的棒状体颈部蛋白2(rhoptry neck proteins 2，r本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种口服重组酵母，其特征在于，所述酵母表达柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella,Et)4个AMA同源分子(AMA1-4)，EtAMA1、EtAMA2、EtAMA3、EtAMA4的核苷酸序列分别为SEQ IDNO.11、SEQ ID NO.12、SEQ ID NO.13和SEQ ID NO.14。

2.一种制备权利要求1所述的口服重组酵母的方法，其特征在于，所述制备方法为：(1)EtAMA1-4基因的扩增：根据EtAMA1-4的cDNA序列设计引物，在设计EtAMA1-4目的片段时，在引物的两端引入pYD1载体的同源臂序列；扩增目的片段的同时，将载体PYD1进行双...

【技术特征摘要】

1.一种口服重组酵母，其特征在于，所述酵母表达柔嫩艾美耳球虫(eimeria tenella,et)4个ama同源分子(ama1-4)，etama1、etama2、etama3、etama4的核苷酸序列分别为seq idno.11、seq id no.12、seq id no.13和seq id no.14。

2.一种制备权利要求1所述的口服重组酵母的方法，其特征在于，所述制备方法为：(1)etama1-4基因的扩增：根据etama1-4的cdna序列设计引物，在设计etama1-4目的片段时，在引物的两端引入pyd1载体的同源臂序列；扩增目的片段的同时，将载体pyd1进行双酶切后回收连接，筛选连接正确的质粒；(2)eby100感受态细胞制备；(3)酵母转化与鉴定,经酵母基因组dna提取、pcr鉴定、1％琼脂糖凝胶电泳检测，以确定为阳...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱顺海，董辉，王丽慧，赵其平，韩红玉，贾刘数，于钰，王晋文，郭慧琳，乔禹，赵芳河，
申请(专利权)人：中国农业科学院上海兽医研究所中国动物卫生与流行病学中心上海分中心，
类型：发明
国别省市：