一种生产L-茶氨酸基因工程菌的方法技术

技术编号:42065111 阅读:26 留言:0更新日期:2024-07-19 16:48
本发明专利技术涉及基因工程技术领域,且公开了一种生产L‑茶氨酸基因工程菌的方法步骤一、将基因工程菌株接种至发酵培养基中,进行发酵培养,制备得到茶氨酸;步骤二、摇瓶发酵时,基因工程菌株的接种量为10‑15%,发酵条件为35℃,200r/min振荡培养,发酵过程中维持pH在6.7‑7.3,通过补加氨水调节pH,补加葡萄糖溶液维持发酵进行,发酵32‑36h;步骤三、发酵罐发酵时,基因工程菌株的接种量为10‑15%,发酵温度为35℃,溶氧在30‑45%之间,发酵过程中控制pH稳定在6.9‑7.1,通过补加氨水调节pH;当培养基中的葡萄糖消耗完之后,流加质量体积浓度为60‑80%(m/v)的葡萄糖溶液,维持发酵培养基中的葡萄糖浓度在3g/L以下,发酵32‑36h。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程,具体为一种生产l-茶氨酸基因工程菌的方法。


技术介绍

1、l-茶氨酸是茶叶中特有的呈味物质。作为茶叶中具有代表性的非蛋白质氨基酸,它是茶叶的鲜味成分之一。l-茶氨酸的化学分子式于1949年首次从绿茶中分离出来。茶叶中天然存在的茶氨酸主要是于l-茶氨酸,而化学合成茶氨酸是d-茶氨酸和l-茶氨酸的混合物。茶氨酸广泛用于食品、医药、保健、日用化妆品等行业。l-茶氨酸被广泛用作食品添加剂,以增强产品的味道和风味。作为一种保健品,它具有多种功能,包括促进放松、预防和治疗阿尔茨海默病[1和改善睡眠质量。茶氨酸具有鲜味、甜味等特点,适用于增强各种食物的适口性。茶氨酸具有类似于味精的清新甜味和焦糖味,可以缓解苦味,增强茶叶的新鲜度。茶氨酸最常用于茶饮料、烘焙零食和甜点。

2、2020年,l-茶氨酸的市场产值超过50万美元。预计到2025年,茶氨酸市场的价值将超过60万美元。目前,由于茶氨酸来源有限,提取步骤多,提取率低,成本高,茶氨酸的应用范围受到很大限制。早期的研究主要集中在使用化学方法进行合成或纯化,导致含有有效l-茶氨酸的产品分解本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种生产L-茶氨酸基因工程菌的方法,包括基因工程菌株,其特征在于,所述基因工程菌株包含用于L-茶氨酸合成的γ谷氨酰甲胺合成酶、编码乙胺合成途径酶的基因、编码谷氨酸合成的基因、L-茶氨酸特异性转运基因,敲除了不利于乙醛和谷氨酸积累的酶基因,所述茶氨酸从头合成途径酶包括谷氨酸脱氢酶、转氨酶、乙醛脱氢酶、丙氨酸脱氢酶、丙酮酸脱羧酶,所述失活的酶包括双功能醛醇脱氢酶、醛还原酶和琥珀酰辅酶A合成酶。

2.根据权利要求1所述的一种生产L-茶氨酸基因工程菌的方法,其特征在于:所述基因工程菌株以大肠杆菌为出发菌株;

3.根据权利要求2所述的一种生产L-茶氨酸基因工程菌的方法,...

【技术特征摘要】

1.一种生产l-茶氨酸基因工程菌的方法,包括基因工程菌株,其特征在于,所述基因工程菌株包含用于l-茶氨酸合成的γ谷氨酰甲胺合成酶、编码乙胺合成途径酶的基因、编码谷氨酸合成的基因、l-茶氨酸特异性转运基因,敲除了不利于乙醛和谷氨酸积累的酶基因,所述茶氨酸从头合成途径酶包括谷氨酸脱氢酶、转氨酶、乙醛脱氢酶、丙氨酸脱氢酶、丙酮酸脱羧酶,所述失活的酶包括双功能醛醇脱氢酶、醛还原酶和琥珀酰辅酶a合成酶。

2.根据权利要求1所述的一种生产l-茶氨酸基因工程菌的方法,其特征在于:所述基因工程菌株以大肠杆菌为出发菌株;

3.根据权利要求2所述的一种生产l-茶氨酸基因工程菌的方法,其特征在于:所述基因工程菌株以e.colimg1655;

4.根据权利要求3所述的一种生产l-茶氨酸基因工程菌的方法,其特征在于:所述基因工程菌株含有glta、gmas、gdha、spuc、ald、pdc、eute和gnp1基因,所述基因glta、gdha、ald、eute为野生型,所述基因gmas、spuc、pdc和gnp1经过密码子优化,使其能够在大肠杆菌中更好的表达,其基因序列依次为seqidno.1、seqidno.2、seqidno.3、seqidno.4、seqidno.5、seqidno.6、seqidno.7、seqidno.8;所述基因工程菌敲除了基因adhe、yahk...

【专利技术属性】
技术研发人员:吴亚东张晓盟张伟锋滕佳佳
申请(专利权)人:汝州市坤和生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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