一种通用型高活性小鼠胰腺离体组织单细胞悬液的制备及应用制造技术

本发明专利技术公开了一种通用型制备高活性的小鼠胰腺离体组织单细胞悬液的方法及多种应用。涉及生物检测技术领域，特别是一种用于制备胰腺导管腺癌小鼠胰腺组织单细胞悬液的方法。由于胰腺导管腺癌的组织结构复杂、细胞紧密相连，传统的细胞分离方法存在困难，影响了单细胞测序技术的准确性和可靠性。为解决这一问题，本发明专利技术提供了一种混合酶液，包括IV型胶原酶、Dispase II、胰蛋白酶抑制剂、胎牛血清、DNAse I和细胞培养基，用于制备小鼠胰腺组织单细胞悬液。该方法简单、方便，能够获得高活性、高分散的单细胞悬液，有助于深入研究胰腺导管腺癌的微环境。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物检测，尤其涉及一种小鼠胰腺导管腺癌组织的单细胞悬液制备方法及应用。

技术介绍

1、胰腺导管腺癌是一种恶性肿瘤，通常具有侵袭性生长和高度恶性转移的特点。对于深入了解该癌症的发病机制、生物学特性以及潜在的治疗靶点，单细胞测序技术成为研究的有力工具。然而，目前存在一些挑战，阻碍了在该领域广泛应用单细胞测序技术的发展。

2、由于胰腺组织富含各种消化酶，组织一旦离体很容易发生坏死。此外，胰腺导管腺癌样本的组织结构复杂，细胞间紧密相连，因此有效的细胞分离变得十分困难。传统的细胞分离方法往往难以获得高活性、高分散的单细胞悬液。目前已有的单细胞悬液分离技术虽然存在，但所得到的单细胞悬液有限，且可能存在技术上的偏倚。这一问题严重影响了后续单细胞测序的准确性和可靠性。

3、因此，本领域的技术人员迫切需要一种简单、方便的制备小鼠胰腺样本单细胞悬液的方法，以克服传统方法在细胞分离和样本处理上的局限性。这种方法应该能够提供高活性、高分散的单细胞悬液，确保单细胞测序技术能够在研究胰腺导管腺癌微环境中的细胞类型和亚型时取得更可靠的结果。通过这样本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种制备小鼠胰腺组织单细胞悬液的混合酶液，包括IV型胶原酶、Dispase II、胰蛋白酶抑制剂、胎牛血清、DNAse I和细胞培养基。

2.如权利要求1所述的酶溶液，其特征在于，所述IV型胶原酶的酶单位不低于125CDU/mg，Dispase II为Roche Dispase II，酶单位不低于0.8units/mg，胰蛋白酶抑制剂酶活力约为10,000个BAEE U/mg，DNAse I的酶单位不低于400Kunitz U/mg。

3.如权利要求1所述的酶溶液，其特征在于，所述IV型胶原酶浓度为1mg/mL，所述Dispase II的浓度为2mg/mL，所...

【技术特征摘要】

1.一种制备小鼠胰腺组织单细胞悬液的混合酶液，包括iv型胶原酶、dispase ii、胰蛋白酶抑制剂、胎牛血清、dnase i和细胞培养基。

2.如权利要求1所述的酶溶液，其特征在于，所述iv型胶原酶的酶单位不低于125cdu/mg，dispase ii为roche dispase ii，酶单位不低于0.8units/mg，胰蛋白酶抑制剂酶活力约为10,000个baee u/mg，dnase i的酶单位不低于400kunitz u/mg。

3.如权利要求1所述的酶溶液，其特征在于，所述iv型胶原酶浓度为1mg/ml，所述dispase ii的浓度为2mg/ml，所述胰蛋白酶抑制剂的浓度为1mg/ml，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：王慧，何牮，周献超，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院，
类型：发明
国别省市：