【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医学生物，具体涉及一株柯萨奇病毒a10型毒株及传代扩繁方法和应用。
技术介绍
1、手足口病（hfmd）是一种在全球范围内广泛流行的疾病，其病原谱包含了多种肠道病毒，以ev-a71和柯萨奇病毒最为常见。自2013年ev-a71疫苗在我国上市以后，重症和死亡率明显下降，但hfmd发病数并未明显减少。2018年之后，柯萨奇病毒a10（cv-a10，coxsackievirus a10）相关病例的比例逐渐增加，由于ev-a71疫苗对cv-a10没有交叉保护作用，因此cv-a10成为主要流行病原体之一。
2、近年来 cv-a10引起的hfmd比例逐步上升，已成为全球公认的威胁健康的流行病。且cv-a10与其他多种血清型之间存在重组现象，这可能导致更为严重的hfmd流行，研发cv-a10单价疫苗或包含cv-a10在内的多价疫苗对于hfmd的预防和控制有着至关重要的作用。
3、cv-a10分为7个基因型a、b、c、d、e、f、g型，2016~2022年大部分cv-a10以f基因型为主，并进一步分为f1、f2和f3基因亚型，f3基因型逐渐成为主要基因型。cv-a10是一种无包膜rna病毒，属于小核糖核酸病毒科肠道病毒属。编码区域分为三部分：p1、p2、p3。p1编码四种结构蛋白形成衣壳，其中vp1、vp2和vp3暴露于衣壳表面，而vp4为内部蛋白。p2和p3编码复制相关的非结构蛋白，包括2a、2b、2c、3a、3b、3c和3d。目前关于hfmd的发病机制尚不清楚，特别是cv-a10的致病机理尚未报道。>
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一株柯萨奇病毒a10型毒株及传代扩繁方法和应用，所述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d病毒株遗传稳定、毒力强，免疫原性好，可为柯萨奇病毒a10型单价或者手足口病多价灭活疫苗研发提供支持。
2、本专利技术提供了一株柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d，在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为cctcc no：v202417。
3、优选的，所述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d的vp1蛋白的氨基酸序列如seq idno.1所示。
4、本专利技术还提供了上述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d的传代扩繁方法，以人二倍体细胞为基质细胞。
5、优选的，所述人二倍体细胞包括kmb17细胞系。
6、本专利技术还提供了利用上述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d或利用上述传代扩繁方法得到的柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d的克隆株的基因组核酸制备得到的生物制剂。
7、优选的，所述基因组核酸的核苷酸序列如seq id no.2所示。
8、本专利技术还提供了上述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d或利用上述传代扩繁方法得到的柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d的克隆株在制备防治cv-a10和/或手足口病的疫苗中的应用。
9、优选的，所述疫苗的类型包括灭活疫苗。
10、优选的，所述疫苗包括单价疫苗和/或多价疫苗。
11、本专利技术还提供了上述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d或利用上述传代扩繁方法得到的柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d的克隆株在制备动物感染模型中的应用。
12、本专利技术还提供了上述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d或利用上述传代扩繁方法得到的柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d的克隆株在制备检测柯萨奇病毒a10型中和试验的标准病毒株中的应用。
13、有益效果：本专利技术提供了一株柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d，在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为cctcc no：v202417。本专利技术所述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d病毒株遗传稳定、毒力强，免疫原性好、是一株效果良好的cv-a10病毒株，可为柯萨奇病毒a10型单价或者手足口病多价灭活疫苗研发提供支持，制备得到的疫苗能够保护机体免受柯萨奇病毒的伤害，有效的预防由柯萨奇病毒a10感染所致的病毒，具有广阔的应用前景。本专利技术所述cv-a10-km-11-d病毒株可建立稳定的感染动物模型，对于构建动物模型至关重要。
14、生物保藏信息
15、柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d（coxsackievirus cv-a10-km-11-d），于2024年3月6日保藏于中国典型培养物保藏中心（简称cctcc），保藏地址为中国 武汉 武汉大学，保藏编号为cctcc no：v202417。
本文档来自技高网...【技术保护点】
1.一株柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D，在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC NO：V202417。
2.根据权利要求1所述柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D，其特征在于，所述柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D的VP1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
3.权利要求1或2所述柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D的传代扩繁方法，其特征在于，以人二倍体细胞为基质细胞。
4.利用权利要求1或2所述柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D或利用权利要求3所述传代扩繁方法得到的柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D的克隆株的基因组核酸制备得到的生物制剂。
5.根据权利要求4所述生物制剂，其特征在于，所述基因组核酸的核苷酸序列如SEQ IDNo.2所示。
6.权利要求1或2所述柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D或利用权利要求3所述传代扩繁方法得到的柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D的克隆株在制备防治CV-A10和/或手足口病
7.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述疫苗的类型包括灭活疫苗,包括单价疫苗和/或多价疫苗。
8.权利要求1或2所述柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D或利用权利要求3所述传代扩繁方法得到的柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D的克隆株在制备动物感染模型中的应用。
9.权利要求1或2所述柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D或利用权利要求3或4所述传代扩繁方法得到的柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D的克隆株在制备动物感染模型中的应用。
10.权利要求1或2所述柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D或利用权利要求3所述传代扩繁方法得到的柯萨奇病毒A10型CV-A10-KM-11-D的克隆株在制备检测柯萨奇病毒A10型中和试验的标准病毒株中的应用。
...【技术特征摘要】
1.一株柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d，在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为cctcc no：v202417。
2.根据权利要求1所述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d，其特征在于，所述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d的vp1蛋白的氨基酸序列如seq id no.1所示。
3.权利要求1或2所述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d的传代扩繁方法，其特征在于，以人二倍体细胞为基质细胞。
4.利用权利要求1或2所述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d或利用权利要求3所述传代扩繁方法得到的柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d的克隆株的基因组核酸制备得到的生物制剂。
5.根据权利要求4所述生物制剂，其特征在于，所述基因组核酸的核苷酸序列如seq idno.2所示。
6.权利要求1或2所述柯萨奇病毒a10型cv-a10-km-11-d或利用权利要求3...
【专利技术属性】
技术研发人员：刘龙丁，于丽，张莹，郑惠文，李恒，赵恒，蒋国润，赵鑫，李丹丹，廖芸，施海晶，王晶晶，
申请(专利权)人：中国医学科学院医学生物学研究所，
类型：发明
国别省市：
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