【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医药，具体涉及一类特异性多肽分子，其能够结合并抑制人源atp依赖性结合盒(abc)多药耐药相关蛋白(abcc5/mrp5)的转运活性，可用于减少抗肿瘤药物分子的外排效应，提高抗肿瘤药物在肿瘤细胞中的浓度，增强抗肿瘤药物的治疗效果。
技术介绍
1、化学治疗作为晚期癌症患者治疗的关键手段之一，面临着多药耐药性(multidrugresistance,mdr)的挑战，这一现象普遍存在于化疗过程中，显著影响着肿瘤治疗的成效。mdr的机制不仅局限于癌症晚期患者，也涉及到遗传性疾病、炎症性疾病等多种病理状态，从而增加了治疗的复杂性和难度。为了克服mdr带来的障碍，提高化疗药物的疗效和患者的生活质量，研究人员和临床医生不断探索新的治疗方法和策略。这些努力包括但不限于开发新型抗肿瘤药物、改进药物递送系统、探索联合用药方案以及研究mdr的分子机制等。
2、atp结合盒(atp-binding cassette,abc)转运蛋白家族是一类重要的跨膜蛋白，其核心功能是利用atp水解产生的能量来促进与其结合的底物分子的跨膜转运。在人类基因组中，已识别出49个具有转录活性的abc转运体基因，这些基因根据保守区序列的同源性被分为7个亚家族，即abc-a至abc-g。在此之中，已鉴定出9种多药耐药相关蛋白(multidrugresistance associated protein，mrp)，分别由abcc1、abcc2、abcc3、abcc4、abcc5、abcc6、abcc10、abcc11和abcc12基因编码。mrp作为
3、人源多药耐药相关蛋白mrp5(hmrp5)在结构和功能上具有独特性。首先，与含有一个额外n端跨膜结构域(tmd0)的mrp1不同，mrp5含有一个从met1到thr94的柔性的n端长环(图1)，该n端长环位于套索结构域(lasso domain)之前。此外，mrp5在其第一个核苷酸结合域(nbd)中具有独特的调控基序，即r基序(r motif)(图1)。另外，谷胱甘肽作为mrp1的底物能与mrp1结合，但目前还没有研究表明谷胱甘肽能影响mrp5转运，这说明尽管mrp5与mrp1属于同一个亚家族，但两者在生物学功能上存在差异性。wijnholds最早发现mrp5转运蛋白的底物为核苷酸类似物；后续研究还发现mrp5作为环核苷酸有机阴离子转运蛋白，介导多种有机阴离子的转运，包括核苷酸一磷酸盐(cgmp和camp)以及嘌呤类似物。鉴于hmrp5在正常组织运输环核苷酸及其类似物，它被称为“环核苷酸外排泵”。在临床肿瘤学领域，已有数据证实hmrp5能够通过细胞外排作用排出多种抗癌药物，如甲氨蝶呤、顺铂、嘌呤类似物、嘧啶类似物、阿霉素、抗叶酸剂等，从而直接促进肿瘤细胞的耐药性。此外，hmrp5通过转运单磷酸核苷酸类似物，例如9-(2-磷酸甲氧基)腺嘌呤，也可能导致抗病毒治疗中的多药耐药性问题。
4、hmrp5在多种癌症类型中呈现高表达水平(图2)，并在诱导癌症的发生发展过程中起到关键作用，主要通过促进肿瘤细胞对化疗药物产生耐药性来实现。特别是在胰腺癌中，该肿瘤被认为是对化疗治疗具有极强抵抗力的疾病之一。研究中使用人胰腺癌细胞、人转运蛋白cdna稳定转染的细胞，或者特定转运蛋白被rna干扰敲除的细胞来表明hmrp5影响这些肿瘤细胞的化疗耐药性。hmrp5过表达或hmrp5沉默细胞的细胞毒性研究表明，hmrp5介导细胞产生吉西他滨(gemcitabine)耐药性。通过核苷类药物吉西他滨或化疗药物联合治疗可以不同程度地影响胰腺癌细胞中转运蛋白的表达水平。
5、治疗急性白血病的一个主要障碍是耐药性的产生，其中，abcc家族成员的表达，特别是hmrp5，对急性白血病细胞的耐药性形成中扮演了关键角色。研究揭示，细胞内环状核苷酸的水平是调节白血病细胞对特定抗肿瘤药物及促凋亡信号敏感性的重要因素。hmrp5通过其对核苷类似物的外排作用，能够导致细胞对这些核苷酸类药物产生耐药性，而这些核苷类似物药物是治疗急性白血病的关键细胞毒性治疗剂。
6、多形性胶质母细胞瘤(glioblastoma multiforme,gbm)是最为常见的原发性恶性脑肿瘤，以其高度侵袭性、显著的分级模型异质性以及对治疗药物的广泛耐药性而著称。gbm细胞的分化过程被认为是其化疗耐药性的一个重要因素。耐药性的形成与mrp的表达密切相关。研究表明，已有研究观察到在gbm患者及其分化的gbm细胞中，hmrp5的表达水平出现显著升高；相反，通过阻断hmrp5等abc转运蛋白的表达或功能，可以显著增强抗肿瘤药物的疗效，有效抑制肿瘤细胞的生长，并降低肿瘤复发的风险。
7、除此以外，hmrp5在肺癌、乳腺癌、胃癌和结直肠癌等多种肿瘤组织中普遍有表达，其表达水平与患者的临床病理特征和预后呈现密切相关性。有研究表明，在长期进行顺铂治疗的肺癌患者中，hmrp5的表达水平出现显著上升，且高表达的hmrp5与较低的生存率相关联。此外，在癌症患者中，hmrp5的过表达与不良预后密切相关。相反，通过降低内源性hmrp5的表达，可以显著增加培美曲塞、5-氟尿嘧啶等多种药物及其代谢产物在细胞内浓度。这些研究成果都提示抑制hmrp5转运活性或减少其表达水平在克服癌细胞多药耐药性中的具有潜在疗效。
8、hmrp5抑制剂与抗癌药物联合使用已被证明可以提高肝癌、结直肠癌、淋巴细胞白血病和乳腺癌等癌症的治疗效果。目前，研究报道证实trequinsin、probenecid、sulfinpyrazone、mk-571、zaprinast、及sildenafil等小分子可抑制mrp5的转运活性。然而，这些小分子表现出低效率、低特异性和较差的安全性等缺点，而且这些小分子阻断hmrp5转运活性的工作机理尚不清楚。与此同时，有研究表明多肽抑制剂具有较大的结合界面和稳定的构象，具有高亲和力和特异性等优势。最近，研究人员筛选出一种名为cpi1的大环肽，该多肽通过其高亲和力特异性抑制mrp1的转运活性，显示出在治疗癌症多药耐药发生中的巨大潜力；同样，单纯疱疹病毒抑制蛋白icp47多肽分子也被证实可本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种多肽，其特征在于，所述多肽能够与hMRP5的C46-S64肽段竞争，结合在hMRP5的底物结合口袋中，C46-S64肽段的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；
2.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列为式(I)：(Xaa)m-CQD-X1-LE-X2-AARAEGL-X3-LDAS-(Xaa)n；其中，
3.如权利要求2所述的多肽，其特征在于，X2为苏氨酸；X3为丝氨酸；X1为丙氨酸、色氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸或脯氨酸，优选X1为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或脯氨酸，更优选X1为丙氨酸或苯丙氨酸；或者，
4.如权利要求2或3所述的多肽，其特征在于，(Xaa)m选自：(Xaa)0、E、LE、PLE、RPLE、TRPLE、RTRPLE、RRTRPLE、FRRTRPLE、KFRRTRPLE、SKFRRTRPLE、DSKFRRTRPLE或CSKFRRTRPLE；(Xaa)n选自：(Xaa)0、M、MH、MHS、MHSQ、MHSQL、MHSQLR、MHSQLRI、MHSQLRIL、MH
5.如权利要求2所述的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.1-SEQID No.16任一所示。
6.如权利要求2所述的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列如SEQ ID No.17所示。
7.一种核酸，其特征在于，所述核酸编码权利要求1-6任一项所述的多肽；
8.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体包含权利要求7所述的核酸。
9.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求8所述的表达载体或其基因组中整合了权利要求7所述的核酸。
10.一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1-6任一项所述的多肽或权利要求7所述的核酸；
11.权利要求1-6任一项所述的多肽或权利要求7所述的核酸或权利要求10所述的药物组合物在制备治疗肿瘤的药物中的应用；
...【技术特征摘要】
1.一种多肽，其特征在于，所述多肽能够与hmrp5的c46-s64肽段竞争，结合在hmrp5的底物结合口袋中，c46-s64肽段的氨基酸序列如seq id no.1所示；
2.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，所述多肽的氨基酸序列为式(i)：(xaa)m-cqd-x1-le-x2-aaraegl-x3-ldas-(xaa)n；其中，
3.如权利要求2所述的多肽，其特征在于，x2为苏氨酸；x3为丝氨酸；x1为丙氨酸、色氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸或脯氨酸，优选x1为丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸或脯氨酸，更优选x1为丙氨酸或苯丙氨酸；或者，
4.如权利要求2或3所述的多肽，其特征在于，(xaa)m选自：(xaa)0、e、le、ple、rple、trple、rtrple、rrtrple、frrtrple、kfrrtrple、skfrrtrple、dskfrrtrple或cskfrrtrple；(xaa)n选自：(xaa)0、m、mh、mhs、mh...
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