【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及样品分析方法,并且特别涉及用于测量、分析和量化多核苷酸和/或寡核苷酸(诸如滚环扩增(rca)产物(rcp))的此类样品分析方法。现有技术和
技术介绍
生物分子(特别是核酸)的精确量化对于生物医学研究、基因工程和药物开发至关重要。已证明单分子解决方案优于批量测量,因为它们允许检测数量的细微差异,例如,数字聚合酶链式反应(pcr)与传统pcr相比具有许多优势。rca是一种可以用于检测分子的单个拷贝的单分子扩增技术。rca本质上是数字化的,这意味着它不需要像数字pcr那样区室化为小滴或孔,以便能够区分复杂溶液中的单分子拷贝。rcp最常在用荧光团标记时被光学传感器检测到。然而,其他光学和非光学读出模式也已被探索。从含有rcp的液体样品中量化rcp的一个主要挑战是将最终反应体积与光学装置的焦点体积相匹配。这会产生不匹配,虽然样品中rcp的绝对数量可能足够高以进行检测,但样品中rcp的浓度可能低,这可能需要不得不分析整个样品体积来检测液体样品中所有rpc的所有部分或相当一部分才能达到统计显著性。液体样品中的rcp可以被应用并铺展到2维(2d)表面,诸如载玻片,并 ...
【技术保护点】
1.一种分析包含多个目标多核苷酸和/或寡核苷酸的样品的方法,其中所述方法包括:
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述磁珠具有约10nm至约5μm,例如约10nm至约2μm,诸如约500nm至约2μm的平均尺寸。
3.根据权利要求2所述的方法,其中所述磁珠具有约30nm至约200nm的平均尺寸。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其中所述磁珠为超顺磁珠,任选地包含铁、镍、钴或其混合物。
5.根据任一前述权利要求所述的方法,其中所述多个多核苷酸/寡核苷酸经由吸附或缀合或其组合附接至所述磁珠。
6.根据任
...【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】
1.一种分析包含多个目标多核苷酸和/或寡核苷酸的样品的方法,其中所述方法包括:
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述磁珠具有约10nm至约5μm,例如约10nm至约2μm,诸如约500nm至约2μm的平均尺寸。
3.根据权利要求2所述的方法,其中所述磁珠具有约30nm至约200nm的平均尺寸。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法,其中所述磁珠为超顺磁珠,任选地包含铁、镍、钴或其混合物。
5.根据任一前述权利要求所述的方法,其中所述多个多核苷酸/寡核苷酸经由吸附或缀合或其组合附接至所述磁珠。
6.根据任一前述权利要求所述的方法,其中所述磁珠包含表面涂层,所述表面涂层被配置用于直接或间接(例如,经由互补捕获寡核苷酸)缀合至所述多核苷酸/寡核苷酸。
7.根据权利要求6所述的方法,其中所述表面涂层包含用于缀合至所述多核苷酸/寡核苷酸的反应基团,任选地其中所述反应基团选自由以下项组成的组:碳二亚胺(例如,1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(edc))、胺(例如,烷基胺)、琥珀酰亚胺(诸如n-羟基琥珀酰亚胺酯)、亚氨酸酯(例如,酰亚胺酯)、酰亚胺(例如,马来酰亚胺)、卤代乙酰基、二硫化物(例如,吡啶基二硫化物)、肼、双吖丙啶或叠氮化物(诸如芳基叠氮化物)、亲和素(例如,链霉亲和素和中性亲和素)、生物素、羧基、硫醇、炔烃及其混合物。
8.根据权利要求6或权利要求7所述的方法,其中所述多个多核苷酸/寡核苷酸包含用于缀合至所述磁珠的所述表面涂层的化合物。
9.根据权利要求8所述的方法,其中用于缀合至所述磁珠的所述表面涂层的所述化合物包含反应基团,所...
【专利技术属性】
技术研发人员:费利克斯·尼曼,莱奥雷·阿尤里亚·阿斯托比扎,约斯特·贝格曼,
申请(专利权)人:科恩塔根公司,
类型:发明
国别省市:
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