【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于细胞培养，具体涉及一种人原代肝细胞扩增的方法。
技术介绍
1、肝细胞在药物筛选、疾病建模和临床细胞移植等方面展现出重要应用前景。虽然存在各种体外策略用于生成肝细胞，包括从多能干细胞分化或从成纤维细胞转分化，但获得具有分子和功能特性与原代肝细胞相媲美的肝细胞仍然是一个具有挑战性的任务。原代肝细胞是来源于人体肝组织分离的肝细胞，直接扩增原代肝细胞是体外获得肝细胞的一种直接有效方式，然而原代肝细胞的体外扩一直是领域内的难题。最近，使用小分子和生长因子扩增原代人类肝细胞(primary human hepatocytes,phhs)已展性出一定的可行性，例如多个课题组报道wnt信号通路激活剂、tgfβ信号通路抑制剂以及生长因子egf、hgf等能帮助肝细胞在体外进行扩增，扩增后的肝细胞具有肝前体细胞的属性，可以进一步分化为成熟的肝细胞。然而，当前的扩增系统仍然难以实现phhs在体外的高效稳定扩增，存在的问题包括对于成体肝脏来源的phhs扩增效率低下、对于不同供体来源的phhs扩增效果差异较大、扩增后的肝前体样细胞的功能分化能力降低等...
【技术保护点】
1.一种人原代肝细胞扩增的方法，，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种人原代肝细胞扩增的方法，其特征在于，S1中，具体培养扩增包括以下步骤：
3.根据权利要求1所述的一种人原代肝细胞扩增的方法，其特征在于，所述的肝细胞包括成体来源的人原代肝细胞、幼儿及儿童来源的人原代肝细胞中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的一种人原代肝细胞扩增的方法，其特征在于，所述NHEM培养基的成分为：50％Dulbecco改良Eagle培养基/营养混合物F-12和50％William E培养基加入1％青霉素-链霉素，1％谷氨酰胺，2...
【技术特征摘要】
1.一种人原代肝细胞扩增的方法，，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种人原代肝细胞扩增的方法，其特征在于，s1中，具体培养扩增包括以下步骤：
3.根据权利要求1所述的一种人原代肝细胞扩增的方法，其特征在于，所述的肝细胞包括成体来源的人原代肝细胞、幼儿及儿童来源的人原代肝细胞中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述的一种人原代肝细胞扩增的方法，其特征在于，所述nhem培养基的成分为：50％dulbecco改良eagle培养基/营养混合物f-12和50％william e培养基加入1％青霉素-链霉素，1％谷氨酰胺，2％b27添加剂不含维生素a，0.2μm 2-磷酸-...
【专利技术属性】
技术研发人员：谢冰清，谢皇帆，江涌，彭建华，尹世刚，付云茜，
申请(专利权)人：西南医科大学附属医院，
类型：发明
国别省市：
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