【技术实现步骤摘要】
本公开涉及经工程改造的tgfβrii变体及其使用方法。
技术介绍
1、tgf-β受体2型(tgfβr2、tgfβrii或tβrii)是tgf-β家族所有成员的配体结合受体，并且在包含成纤维细胞的几乎所有细胞类型中表达。
2、转化生长因子(tgf)β信号传导途径参与许多细胞过程，包含增殖、分化、粘附、运动和凋亡。这些功能在恶性细胞中往往被破坏，并且tgfβii型受体(tgfβrii)随后被证明是肿瘤抑制基因(tsg)。tgfβ信号传导途径在正常细胞中介导有效的生长抑制，并且根据其作为tsg的作用，癌细胞使用遗传机制和表观遗传机制两者来灭活tgfβrii。
3、考虑到其在正常细胞和癌细胞中的作用，需要开发针对tgfβrii途径的毒性有限的癌症疗法。
技术实现思路
1、本公开涉及经工程改造的tgfβrii变体及其使用方法。
2、一方面，本公开涉及一种经工程改造的tgfβrii多肽，其包括与seq id no:7至少80％相同的氨基酸序列，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽在与seq id no:7的s49和d118相对应的位置处包括一个或多个氨基酸突变。
3、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽包括以下中的一种或多种：
4、(a)与seq id no:7的s49相对应的氨基酸为g、a、l、m、f、w、k、q、e、p、v、i、c、y、h、r、n、d或t；以及
5、(b)与seq id no:7的d11
6、在一些实施例中，与seq id no:7的s49相对应的氨基酸为e或q。
7、在一些实施例中，与seq id no:7的d118相对应的氨基酸为e。
8、在一些实施例中，与seq id no:7的s49相对应的氨基酸为e。
9、在一些实施例中，与seq id no:7的位置32相对应的氨基酸为d。
10、在一些实施例中，与seq id no:7的位置119相对应的氨基酸为e。
11、在一些实施例中，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:7-12中的任一个至少85％、90％、95％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。
12、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:8至少90％相同的氨基酸序列。
13、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:9至少90％相同的氨基酸序列。
14、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:10至少90％相同的氨基酸序列。
15、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:11至少90％相同的氨基酸序列。
16、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:12至少90％相同的氨基酸序列。
17、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽与tgfβ1之间的解离速率低于野生型tgfβrii与tgfβ1之间的解离速率。
18、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽与tgfβ3之间的解离速率低于野生型tgfβrii与tgfβ3之间的解离速率。
19、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽不与tgfβ2结合。
20、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽与tgfβ1上的r94、r25、k37和/或k31相互作用。
21、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽与tgfβ3上的r94、r25、k37和/或k31相互作用。
22、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽通过氢键相互作用与tgfβ1上的r94、r25、k37和/或k31相互作用。
23、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽通过氢键相互作用与tgfβ3上的r94、r25、k37和/或k31相互作用。
24、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽可以捕获tgfβ(例如，tgfβ1)，并且由此改善肿瘤微环境。
25、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽可以阻断或干扰tgfβ(例如，tgfβ1)与tgfβrii之间的结合。
26、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽可以阻断或干扰在肿瘤细胞、成纤维细胞或免疫细胞的表面上表达的tgfβ(例如，tgfβ1)与tgfβrii之间的结合。
27、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽进一步包括ch2结构域和ch3结构域。
28、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽进一步包括铰链区。
29、在一些实施例中，ch2结构域为igg ch2结构域，并且ch3结构域为igg ch3结构域。
30、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽任选地通过接头序列连接到(a)所述铰链区或ch2结构域的n端，或(b)所述ch3结构域的c端。
31、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:1-6中的任一个相同的氨基酸序列。
32、一方面，本公开涉及一种蛋白质构建体，其包括本文所述的经工程改造的tgfβrii多肽。
33、在一些实施例中，所述蛋白质构建体包括两个或更多个经工程改造的tgfβrii多肽。
34、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽中的至少两个是相同的。
35、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽中的至少两个是不同的。
36、在一些实施例中，所述蛋白质构建体进一步包括fc区。
37、在一些实施例中，所述fc区为igg4 fc区。
38、在一些实施例中，所述fc区为igg1 fc区(例如，具有lala突变或lala-pg突变)。
39、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽连接到fc区的c端。
40、在一些实施例中，所述经工程改造的tgfβrii多肽通过肽接头连接到fc区的c端。
41、一方面，本公开涉及一种蛋白质构建体，其包括：第一融合多肽，所述第一融合多肽包括本文所述的经工程改造的tgfβrii多肽、第一ch2结构域和第一ch3结构域；以及第二融合多肽，所述第二融合多肽包括第二ch2结构域和第二ch3结构域，其中所述第一融合多肽和所述第二融合多肽彼此缔合，从而形成二聚体。
42、在一些实施例中，第二融合多肽进一步包括第二经工程改造的tgfβrii多肽。本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种经工程改造的TGFβRII多肽，其包括与SEQ ID NO:7至少80％相同的氨基酸序列，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽在与SEQ ID NO:7的S49和D118相对应的位置处包括一个或多个氨基酸突变。
2.根据权利要求1所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽包括以下中的一种或多种：
3.根据权利要求1或2所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中与SEQ ID NO:7的S49相对应的氨基酸为E或Q。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中与SEQ ID NO:7的D118相对应的氨基酸为E。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中与SEQ ID NO:7的S49相对应的氨基酸为E。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中与SEQ ID NO:7的位置32相对应的氨基酸为D。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中与S
8.根据权利要求1至7中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽包括与SEQ ID NO:7-12中的任一个至少85％、90％、95％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。
9.根据权利要求8所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽包括与SEQ ID NO:8至少90％相同的氨基酸序列。
10.根据权利要求8所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽包括与SEQ ID NO:9至少90％相同的氨基酸序列。
11.根据权利要求8所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽包括与SEQ ID NO:10至少90％相同的氨基酸序列。
12.根据权利要求8所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽包括与SEQ ID NO:11至少90％相同的氨基酸序列。
13.根据权利要求8所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽包括与SEQ ID NO:12至少90％相同的氨基酸序列。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽与TGFβ1之间的解离速率低于野生型TGFβRII与TGFβ1之间的解离速率。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽与TGFβ3之间的解离速率低于野生型TGFβRII与TGFβ3之间的解离速率。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽不与TGFβ2结合。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽与TGFβ1上的R94、R25、K37和/或K31相互作用。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽与TGFβ3上的R94、R25、K37和/或K31相互作用。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽通过氢键相互作用与TGFβ1上的R94、R25、K37和/或K31相互作用。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽通过氢键相互作用与TGFβ3上的R94、R25、K37和/或K31相互作用。
21.根据权利要求1至20中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽能够捕获TGFβ(例如，TGFβ1)，并且由此改善肿瘤微环境。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽能够阻断或干扰TGFβ(例如，TGFβ1)与TGFβRII之间的结合。
23.根据权利要求1至22中任一项所述的经工程改造的TGFβRII多肽，其中所述经工程改造的TGFβRII多肽能够阻断或干扰在肿瘤细胞、成纤维细胞...
【技术特征摘要】
1.一种经工程改造的tgfβrii多肽，其包括与seq id no:7至少80％相同的氨基酸序列，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽在与seq id no:7的s49和d118相对应的位置处包括一个或多个氨基酸突变。
2.根据权利要求1所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽包括以下中的一种或多种：
3.根据权利要求1或2所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中与seq id no:7的s49相对应的氨基酸为e或q。
4.根据权利要求1至3中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中与seq id no:7的d118相对应的氨基酸为e。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中与seq id no:7的s49相对应的氨基酸为e。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中与seq id no:7的位置32相对应的氨基酸为d。
7.根据权利要求1至6中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中与seq id no:7的位置119相对应的氨基酸为e。
8.根据权利要求1至7中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:7-12中的任一个至少85％、90％、95％、95％、96％、97％、98％、99％或100％相同的氨基酸序列。
9.根据权利要求8所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:8至少90％相同的氨基酸序列。
10.根据权利要求8所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:9至少90％相同的氨基酸序列。
11.根据权利要求8所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:10至少90％相同的氨基酸序列。
12.根据权利要求8所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:11至少90％相同的氨基酸序列。
13.根据权利要求8所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽包括与seq id no:12至少90％相同的氨基酸序列。
14.根据权利要求1至13中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽与tgfβ1之间的解离速率低于野生型tgfβrii与tgfβ1之间的解离速率。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽与tgfβ3之间的解离速率低于野生型tgfβrii与tgfβ3之间的解离速率。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽不与tgfβ2结合。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽与tgfβ1上的r94、r25、k37和/或k31相互作用。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽与tgfβ3上的r94、r25、k37和/或k31相互作用。
19.根据权利要求1至18中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽通过氢键相互作用与tgfβ1上的r94、r25、k37和/或k31相互作用。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽通过氢键相互作用与tgfβ3上的r94、r25、k37和/或k31相互作用。
21.根据权利要求1至20中任一项所述的经工程改造的tgfβrii多肽，其中所述经工程改造的tgfβrii多肽能够捕获tgfβ(例如，tgfβ1)，并且由此改善肿瘤微环境。
22.根据权利要求1至21中任一项所述的经工程改造的tgf...
【专利技术属性】
技术研发人员：王锦堂，郭邦贤，卓宗显，曾琪铃，
申请(专利权)人：FBD生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：
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