一种小规模提高质粒产量的摇床培养方法、发酵培养基及应用技术

本发明专利技术公开了一种小规模提高质粒产量的摇床培养方法、发酵培养基及应用，属于微生物发酵领域。该方法包括以下步骤：将含有目的质粒的重组工程菌接种添加磁力搅拌子的凹槽摇瓶中的发酵培养基，置于磁力搅拌器上恒温发酵培养；所述发酵培养基的组分为：10g/L胰蛋白胨、30g/L酵母粉、5g/L氯化钠和0.2mL/L消泡剂。本发明专利技术通过培养基、培养条件和培养设备等条件的优化，可以显著提高小规模摇瓶生产质粒的产量。本发明专利技术能显著提高质粒的产能，降低生产时间成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物发酵领域，特别是涉及一种小规模提高质粒产量的摇床培养方法、发酵培养基及应用。

技术介绍

1、近些年来，随着生物制品的不断发展，dna质粒技术不断地应用于新的基因疗法，包括dna疫苗、病毒载体生产等。大肠杆菌发酵获取dna质粒是常用技术。因此大规模发酵生产高纯度、高质量dna质粒的技术变的愈发重要。然而，培养过程中会出现质粒突变或丢失现象，影响质粒产量，增加生产成本。质粒突变是指在培养重组菌过程dna质粒发生突变，失去原有表型特征。质粒丢失主要原因是细胞在分裂时，由于微生物生长快，质粒在子代细胞中得不到均匀分配，部分子细胞不含质粒。质粒突变与丢失常出现于以下情况，一、数次传代质粒出现突变与丢失；二、长时间发酵培养过程中。由于重组基因工程菌大规模发酵dna质粒受培养温度、ph、转速、do、补料速度及培养基组成等影响，现有发酵工艺针对慢病毒vsvg/rd114/rev/pmdlg用质粒进行多参数的工艺开发，结果质粒产量很高，比如专利cn116751731b 一种大规模质粒生产的发酵工艺，但是此种发酵工艺是采用发酵罐进行大规模生产，存在发酵周期本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种小规模提高质粒产量的摇床培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的小规模质粒生产的摇床培养方法，其特征在于，所述消泡剂为Antifoam204。

3.如权利要求1所述的小规模提高质粒产量的摇床培养方法，其特征在于，所述含有目的质粒的重组工程菌在接种所述发酵培养基之前，还包括活化的步骤，采用LB培养基对所述含有目的质粒的重组工程菌进行活化。

4.一种小规模提高质粒产量的发酵培养基，其特征在于，所述发酵培养基的组分为：10g/L胰蛋白胨、30g/L酵母粉、5g/L氯化钠和0.2mL/L消泡剂。

5.如权利要求4所述的小...

【技术特征摘要】

1.一种小规模提高质粒产量的摇床培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的小规模质粒生产的摇床培养方法，其特征在于，所述消泡剂为antifoam204。

3.如权利要求1所述的小规模提高质粒产量的摇床培养方法，其特征在于，所述含有目的质粒的重组工程菌在接种所述发酵培养基之前，还包括活化的步骤，采用lb培养基对所述含有目的质粒的重组工程...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘红，侯国栋，刘国庆，
申请(专利权)人：赛奥斯博生物科技北京有限公司，
类型：发明
国别省市：