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一种含黄酮甲基转移酶的融合蛋白、制备方法及其在高效合成鼠李素中的应用技术

技术编号:41972692 阅读:28 留言:0更新日期:2024-07-10 16:52
本发明专利技术涉及一种含黄酮甲基转移酶的融合蛋白制备方法及其在高效生产鼠李素中的应用,属于酶工程技术领域。所述融合蛋白由促溶标签SUMO和黄酮甲基转移酶SVMT无缝组合而成。本发明专利技术通过将黄酮甲基转移酶SVMT与SUMO基因融合,实现了该酶的可溶性表达。利用该融合蛋白,可以对槲皮素进行甲基化生物转化,转化产物经HPLC和UPLC‑TOF‑MS/MS鉴定为鼠李素,转化效率达84.8%,可实现鼠李素的高效合成。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及酶工程,特别是涉及一种含黄酮甲基转移酶的融合蛋白、制备方法及其在高效合成鼠李素中的应用


技术介绍

1、鼠李素,即3,5,3',4'-四羟基-7-甲氧基黄酮,是槲皮素的7-o-甲氧基化形式,也是异鼠李素的同分异构体,存在于多种植物性资源如水果、蔬菜、中草药中。已有较多文献报道鼠李素具有广泛的生物活性,如抗氧化、抗炎、抗病毒、降血糖、降血脂等。然而,相对于槲皮素、芦丁等天然资源中含量较高、较易获得的化合物来说,鼠李素含量较低,提取分离获得大量产物较为困难。而常规的化学合成方法具有反应条件苛刻、易造成环境污染等缺点。酶法定向生物转化合成鼠李素则是更为绿色、经济、高效的方式。

2、黄酮o-甲基转移酶(fomt)是一种类黄酮代谢途径中的关键修饰酶,以s-腺苷-l-蛋氨酸为甲基供体,通过sn2亲核取代反应将甲基转移至黄酮化合物的羟基上,即甲氧基化。研究表明,不同来源的fomt具有各自的底物特异性和位点特异性,因此可对黄酮类化合物进行定向结构转化。由于槲皮素是自然界含量丰富、容易获取、价格低廉的原料,利用槲皮素作为转化底物进行7-o-甲氧基化本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种含黄酮甲基转移酶的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白由促溶标签SUMO和黄酮甲基转移酶SVMT组合而成。

2.根据权利要求1所述的一种含黄酮甲基转移酶的融合蛋白,其特征在于,黄酮甲基转移酶SVMT是基于NCBI数据库检索的具有柚皮素7-O-甲基转移酶活性的预测酶。

3.一种如权利要求1或2所述的含黄酮甲基转移酶的融合蛋白制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

4.一种如权利要求1-3任一项所述的含黄酮甲基转移酶的融合蛋白SUMO-SVMT的应用,其特征在于,使用融合蛋白SUMO-SVMT催化槲皮素生物转化为鼠李素。

>5.一种鼠李素的制...

【技术特征摘要】

1.一种含黄酮甲基转移酶的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白由促溶标签sumo和黄酮甲基转移酶svmt组合而成。

2.根据权利要求1所述的一种含黄酮甲基转移酶的融合蛋白,其特征在于,黄酮甲基转移酶svmt是基于ncbi数据库检索的具有柚皮素7-o-甲基转移酶活性的预测酶。

3.一种如权利要求1或2所述的含黄酮甲基转移酶的融合蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员:何志勇昂贝君陈洁曾茂茂王召君陈秋铭秦昉
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

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