【技术实现步骤摘要】
本申请涉及合成生物学，尤其涉及一种基于crispr-cas12a系统的噬藻体基因组编辑载体及其构建方法与应用。
技术介绍
1、蓝藻水华的爆发对水生环境和人类与动物健康都造成威胁，噬藻体是可以高效侵染裂解蓝细菌(蓝藻)的病毒，在自然环境中拥有很高的丰度。目前纯培养的噬藻体都是从天然环境中分离纯化得到的，可用于研究病毒-宿主之间的进化关系，也可以利用噬藻体治理蓝藻水华，具有独特的优越性和发展潜力。但野生型噬藻体具有宿主专一性，野生型噬藻体应用于蓝藻水华治理中有很多限制因素，通常只侵染特定藻株，且产毒蓝藻的噬藻体的分离纯化是非常困难和耗时的。为解决上述问题，可以通过合成生物学的方法，对天然噬藻体进行改造。
2、目前，噬菌体基因编辑已成为研究重点之一，crispr-cas系统作为一种高效的基因编辑工具，在蓝藻研究中也广泛应用。wendt及其同事研究发现cas9的高表达水平对蓝藻有毒，导致蓝藻的细胞活力降低；ungerer等人应用cas12a应用于蓝藻基因组编辑，成功在聚球藻utex 2973、集胞藻pcc 6803和鱼腥藻pcc 7...
【技术保护点】
1.一种基于CRISPR-Cas12a系统的噬藻体基因组编辑载体，其特征在于，包括gRNA区的一个直接重复片段的核酸序列、目标gRNA的核酸序列、上游同源臂的核酸序列、下游同源臂的核酸序列，复制元件的核酸序列和Cas12a蛋白的核酸序列；
2.根据权利要求1所述的基于CRISPR-Cas12a系统的噬藻体基因组编辑载体，其特征在于，所述上游同源臂的长度为50bp，所述下游同源臂的长度为50bp。
3.一种权利要求1或2所述的基于CRISPR-Cas12a系统的噬藻体基因组编辑载体的构建方法，其特征在于，包括步骤：
4.根据权利要求3...
【技术特征摘要】
1.一种基于crispr-cas12a系统的噬藻体基因组编辑载体，其特征在于，包括grna区的一个直接重复片段的核酸序列、目标grna的核酸序列、上游同源臂的核酸序列、下游同源臂的核酸序列，复制元件的核酸序列和cas12a蛋白的核酸序列；
2.根据权利要求1所述的基于crispr-cas12a系统的噬藻体基因组编辑载体，其特征在于，所述上游同源臂的长度为50bp，所述下游同源臂的长度为50bp。
3.一种权利要求1或2所述的基于crispr-cas12a系统的噬藻体基因组编辑载体的构建方法，其特征在于，包括步骤：
4.根据权利要求3所述的构建方法，其特征在于，所述目标grna的序列获取方法包括：
5.根据权利要求3所述的构建方法，...
【专利技术属性】
技术研发人员：马迎飞，寇春华，黎晏辰，袁盛建，
申请(专利权)人：中国科学院深圳先进技术研究院，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。