一种细胞内阿兹夫定的可视化检测方法及检测试剂盒技术

本发明专利技术属于细胞成像以及药物检测技术领域，具体涉及一种细胞内阿兹夫定的可视化检测方法及检测试剂盒。本发明专利技术提供的细胞内阿兹夫定的可视化检测方法及检测试剂盒，运用5‑羧基荧光素炔烃(5‑FAM‑Alkyne)与阿兹夫定发生点击化学反应，从而构建了一种细胞内阿兹夫定的可视化检测方法以及检测体系。该检测方法是针对细胞内抗病毒核苷药物阿兹夫定的细胞原位荧光成像技术，其反应体系简单，可实现阿兹夫定的快速、准确成像以及定量检测，能够有效解决现有技术中无法特异性检测阿兹夫定在细胞内的蓄积部位及浓度变化情况的技术问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于细胞成像以及药物检测，具体涉及一种细胞内阿兹夫定的可视化检测方法及检测试剂盒。

技术介绍

1、阿兹夫定是一种广谱rna病毒抑制剂，是我国拥有完全自主知识产权并拥有全球专利的抗病毒1.1类创新药物。阿兹夫定作为一种人工合成的病毒rna依赖的rna聚合酶的核苷类似物，能够抑制rna聚合酶活性，阻断rna链的合成和复制，从而抑制病毒复制，具有很强的抗逆转录病毒活性，如艾滋病毒、新冠病毒、肠道病毒、乙肝病毒等活性。2021年阿兹夫定获批上市，用于治疗高病毒载量的成年hiv-1感染者。2022年阿兹夫定又被批准用于治疗普通型covid-19的成年患者，标志着阿兹夫定成为我国首个自主研发的口服小分子新型冠状病毒感染治疗药物。

2、高效联合抗逆转录病毒治疗是目前治疗艾滋病最主要的措施，是改善患者预后、提高患者生存质量的主要途径，但是其毒副作用大，有些患者不得不中途停药，而且长期服用会导致耐药株的出现，使得药物大量浪费。因而，准确、简单易行的监测抗病毒药物的血药浓度具有非常重要的意义。然而，核苷逆转录酶抑制剂的血药浓度与临床效果或毒性之间的相关性本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种细胞内阿兹夫定的可视化检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的细胞内阿兹夫定的可视化检测方法，其特征在于，所述待测细胞样品为来源于人、动物的离体细胞或离体组织。

3.根据权利要求1所述的细胞内阿兹夫定的可视化检测方法，其特征在于，所述洗涤、重悬均采用PBS溶液进行；所述固定液为质量浓度为3-4％的多聚甲醛溶液；所述固定是在室温条件下固定10～20min。

4.根据权利要求1所述的细胞内阿兹夫定的可视化检测方法，其特征在于，细胞悬液与5-羧基荧光素炔烃溶液、三(3-羟丙基三唑甲基)胺溶液、硫酸铜溶液、抗坏血酸钠溶液的体积比为...

【技术特征摘要】

1.一种细胞内阿兹夫定的可视化检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的细胞内阿兹夫定的可视化检测方法，其特征在于，所述待测细胞样品为来源于人、动物的离体细胞或离体组织。

3.根据权利要求1所述的细胞内阿兹夫定的可视化检测方法，其特征在于，所述洗涤、重悬均采用pbs溶液进行；所述固定液为质量浓度为3-4％的多聚甲醛溶液；所述固定是在室温条件下固定10～20min。

4.根据权利要求1所述的细胞内阿兹夫定的可视化检测方法，其特征在于，细胞悬液与5-羧基荧光素炔烃溶液、三(3-羟丙基三唑甲基)胺溶液、硫酸铜溶液、抗坏血酸钠溶液的体积比为5:5:1:1:1；所述避光孵育的时间为20～40min。

5.根据权利要求1～4任一项所述的细胞内阿兹夫定的可视化检测方法，其特征在于，所述细胞悬液中的细胞个数为0.4×106～0.8×106个/ml。<...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭有梅，刘尚坤，谢银峰，潘梦旭，刘阿丹，吴月月，黄津津，付小倩，王娅蓉，
申请(专利权)人：郑州大学，
类型：发明
国别省市：