一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法技术

本申请公开了一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法，属于基因工程技术领域，用于在毕赤酵母GS115中实现制备半乳糖激酶、半乳糖‑1‑磷酸尿苷酰转移酶和尿苷二磷酸‑4'‑变位酶。包括：利用SacI线性化重组质粒电转化构建3种带有油茶地蜂mRNA片段的毕赤酵母GS115，并表达生成包括GALK、GALT和GALE在内的3种水溶性酶类。本申请将为半乳糖激酶、半乳糖‑1‑磷酸尿苷酰转移酶和尿苷二磷酸‑4'‑变位酶的制备开创一种新的方法，为破解蜜蜂为油茶授粉后中毒的难题提供技术手段。

【技术实现步骤摘要】

本申请属于基因工程，具体地说，尤其涉及一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法。

技术介绍

1、由于油茶的自交不亲和特性及野生授粉昆虫的锐减导致油茶的授粉效率较低，这在一定程度上会限制油茶产业的发展。而当利用蜜蜂（包括东方蜜蜂、西方蜜蜂）为油茶授粉时，油茶花蜜（花粉）中所含有的甘露三糖、棉籽糖、水苏糖3种寡糖，以及与3种寡糖结合的半乳糖会导致蜜蜂消化障碍，造成蜜蜂死亡或蜂群的崩溃。

2、而现在随着油茶种植面积的增加，如何提高蜜蜂对油茶授粉的效率，成为亟待解决的难题。

技术实现思路

1、本申请的目的在于提供一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法，其能够在毕赤酵母gs115中实现制备半乳糖激酶(galactokinase,galk)、半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶(galactose-1-phosphateuridyltransferase,galt)和尿苷二磷酸-4'-变位酶(uridinediphosphategalactose-4’-epimerase,gale)，为破解蜜蜂为油茶授粉后中毒的难题提供技本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法，其特征在于，步骤一中所述基因序列为SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示的mRNA片段分别作为半乳糖激酶、半乳糖-1-磷酸尿苷转移酶、尿苷二磷酸-4'-变位酶的表达基因，先利用PCR分别扩增，通过胶回收的目的片段，将胶回收的目的片段通过SacI线性化与pPIC9K载体连接。

3.根据权利要求2所述的一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法，其特征在于，步骤二中所述电转化毕赤酵母GS115的方法包括3种重组质粒与...

【技术特征摘要】

1.一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法，其特征在于，步骤一中所述基因序列为seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3所示的mrna片段分别作为半乳糖激酶、半乳糖-1-磷酸尿苷转移酶、尿苷二磷酸-4'-变位酶的表达基因，先利用pcr分别扩增，通过胶回收的目的片段，将胶回收的目的片段通过saci线性化与ppic9k载体连接。

3.根据权利要求2所述的一种蜜蜂采集油茶花蜜解毒酶的制备方法，其特征在于，步骤二中所述电转化毕赤酵母gs115的方法包括3种重组质粒与处于感受态的毕赤酵母gs115先在ep管内混合均匀后转移至电转化杯...

【专利技术属性】
技术研发人员：曾志将，李震，徐天羽，黄强，
申请(专利权)人：江西农业大学，
类型：发明
国别省市：