基于MIRA技术三种检测H9N2亚型禽流感病毒的引物组和试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了基于MIRA技术三种检测H9N2亚型禽流感病毒的引物组，包括引物对和探针；所述探针包括荧光探针和胶体金探针；所述荧光探针序列有四个修饰位点：5′端中间的dSpacer作为核酸外切酶识别位点、上游的荧光基团、下游的淬灭基团和3'端的C3间隔区；所述胶体金探针序列有三个修饰位点：5′端修饰一个抗原标记、在5′端和3′末端的中部位置标记一个dSpacer作为nfo的识别位点、3′末端标记一个修饰基团。通过上述方式，本发明专利技术建立的基础型、实时荧光型和胶体金型MIRA检测方法的最低检出浓度均为1x10<supgt;2</supgt;copies/μl，该方法特性好且不需要热循环仪，胶体金MIRA仅需15min就可完成检测，结果可视较为方便。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物检测，特别是涉及基于mira技术三种检测h9n2亚型禽流感病毒的引物组和试剂盒。

技术介绍

1、禽流感病毒(avianinfluenza virus，aiv)属于正黏病毒科a型流感病毒属，是一种有囊膜、分节段的单股负链rna病毒，包括ha、na、np、pa、pb1、pb2、m、ns这8个基因片段。病毒粒子直径大小为80-120nm。aiv是一种重要的人畜共患病原，自然条件下不仅可以感染家禽、野禽等，还能感染猫、海豹、狗、高原鼠兔、恒河猴等哺乳动物甚至人。目前，aiv检测方法有经典的病毒分离及荧光定量pcr、elisa等，但荧光定量pcr需要昂贵的仪器设备，elisa需要专业的操作人员且耗费时间长。

2、多酶恒温核酸快速扩增技术(multienzyme isothermal rapid amplification，mira)引物仅需2条，无需热循环仪，这使其成为了一种方便快捷的病原体检测工具。其技术原理：在辅助蛋白和单链dna结合蛋白(ssb)的帮助下，重组酶和引物形成d环区域，当靶区与引物互补时，重组酶偏离，与聚合酶结合到引物本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于M I RA技术三种检测H9N2亚型禽流感病毒的引物组，其特征在于：包括引物对和探针；

2.根据权利要求1所述的基于M I RA技术三种检测H9N2亚型禽流感病毒的引物组，其特征在于：

3.含有根据权利要求1所述的基于MIRA技术三种检测H9N2亚型禽流感病毒的引物组的试剂盒，其特征在于：包括引物组和探针。

【技术特征摘要】

1.一种基于m i ra技术三种检测h9n2亚型禽流感病毒的引物组，其特征在于：包括引物对和探针；

2.根据权利要求1所述的基于m i ra技术三种检测h9n2...

【专利技术属性】
技术研发人员：戴银，仲月怡，王洁茹，殷冬冬，尹磊，沈学怀，潘孝成，胡晓苗，
申请(专利权)人：安徽省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：