一种新型启动子及使用该启动子高效生产重组蛋白质的方法技术

本发明专利技术提供一种新型启动子及使用该启动子高效生产重组蛋白质的方法，属于生物工程技术领域，该启动子P<subgt;0589</subgt;包括序列NO.1，其中，包括序列NO.2。方法包括将启动子和重组蛋白质基因序列转化进法夫驹形式酵母，得到重组法夫驹形式酵母用于表达重组蛋白质。本发明专利技术公开P<subgt;0589</subgt;及其不同长度核酸序列的启动子在甲酸及其盐诱导下表达木聚糖酶活力与甲醇诱导P<subgt;AOX1</subgt;表达木聚糖酶活力相当(高3.2％)。甲醇诱导下P<subgt;0589</subgt;及其不同长度核酸序列的启动子的表达量是P<subgt;AOX1</subgt;的2.6倍。以胞内表达绿色荧光蛋白为例，在甲醇诱导的条件下为传统P<subgt;AOX1</subgt;的表达水平高2.2倍，在甲酸及其盐诱导下表达水平是甲醇诱导传统P<subgt;AOX1</subgt;的表达水平的1.78倍。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物工程，尤其涉及一种新型启动子及使用该启动子高效生产重组蛋白质的方法。

技术介绍

1、法夫驹形氏酵母(komagataellaphaffii)一种典型的甲基营养型微生物。其具有生长快、可高密度发酵、遗传操作简单的优点，已经成为常用的表达重组蛋白质的宿主。而且，法夫驹形氏酵母表达重组蛋白质过程能进行翻译后修饰(折叠、二硫键形成和糖基化)。因此，法夫驹形氏酵母已经成为新一代细胞工厂，用于合成生物学或代谢工程的研究。启动子作为合成生物学和代谢工程工具包中的重要原件之一，在调控基因表达时起到关键作用。强启动子也有利于重组蛋白质的生产。

2、使用甲醇作为碳源是法夫驹形氏酵母的特性之一。甲醇诱导的强启动子在重组蛋白质生产方面也更有优势。除了醇氧化酶1启动子(paox1)，还有谷胱甘肽依赖型甲醛脱氢酶启动子pfld1、二羟基丙酮合成酶启动子pdas等甲醇诱导的启动子。但是使用甲醇存在以下不足之处：(1)甲醇具有毒性且易燃易爆，在工业中大量的储存和运输存在潜在隐患，并且不利于生产医药类和食品类产品。(2)大量表达的醇氧化酶消耗能量较多，影响菌体本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种新型启动子，其特征在于，使用该启动子后连接重组蛋白质基因序列用于重组蛋白质的表达，所述启动子包括序列NO.1，所述序列NO.1含有序列No.2。

2.一种高效生产重组蛋白质的方法，其特征在于，将所述启动子和重组蛋白质基因序列转化进法夫驹形式酵母，得到重组法夫驹形式酵母用于表达重组蛋白质。

3.根据权利要求2所述的高效生产重组蛋白质的方法，其特征在于，将所述启动子和重组蛋白质基因序列转化进法夫驹形式酵母，得到重组法夫驹形式酵母用于表达重组蛋白质具体包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的高效生产重组蛋白质的方法，其特征在于，所述S1中，将启动子的...

【技术特征摘要】

1.一种新型启动子，其特征在于，使用该启动子后连接重组蛋白质基因序列用于重组蛋白质的表达，所述启动子包括序列no.1，所述序列no.1含有序列no.2。

2.一种高效生产重组蛋白质的方法，其特征在于，将所述启动子和重组蛋白质基因序列转化进法夫驹形式酵母，得到重组法夫驹形式酵母用于表达重组蛋白质。

3.根据权利要求2所述的高效生产重组蛋白质的方法，其特征在于，将所述启动子和重组蛋白质基因序列转化进法夫驹形式酵母，得到重组法夫驹形式酵母用于表达重组蛋白质具体包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的高效生产重组蛋白质的方法，其特征在于，所述s1中，将启动子的核苷酸序列no.1与胞外蛋白木聚糖酶核...

【专利技术属性】
技术研发人员：张建国，杨婵，丛文杰，王明轩，周化岚，
申请(专利权)人：上海理工大学，
类型：发明
国别省市：