调控真核细胞基因转录的I-F2型CRISPR-Cas系统及其应用技术方案

本发明专利技术公开了调控真核细胞基因转录的I‑F2型CRISPR‑Cas系统及其应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术要解决的技术问题是：如何实现精简的CRISPR‑Cas系统在真核细胞中的高效转录调控，为解决该技术问题本发明专利技术提供一种调控真核细胞基因转录的I‑F2型CRISPR‑Cas系统，其包括由Cas7、转录调控因子、Cas6和Cas5形成的融合蛋白和靶向目的基因的crRNA。本发明专利技术筛选出的I‑F2型CRISPR‑Cas系统，通过在Cas蛋白上偶联转录调控因子，可以在真核细胞中实现靶基因的转录调控。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于基因工程，具体涉及调控真核细胞基因转录的i-f2型crispr-cas系统及其应用。

技术介绍

1、crispr-cas系统作为基因编辑和转录调控工具获得了广泛应用。i型crispr-cas系统分布最为广泛，最近多项研究表明，i型系统能够高效地对包括人体细胞在内的真核细胞进行基因编辑和转录调控(nat commun,2020,11(1):3136；nat biotechnol,2019,37(12):1493-1501；nat commun,2019,10(1):5302)。利用i型系统进行转录调控，需要表达效应复合物的组分蛋白，并在组分蛋白上融合转录因子。之前用于真核细胞编辑或转录调控的i型系统效应复合物由4或5种亚基组成，基因编码框大于cas9(约1300aa)，不利于递送。已报道最小的用于真核细胞的i型系统为i-c型，其效应蛋白包括3个组分，大小超过1000aa，并且在真核细胞中需要额外表达隐藏的cas11，共4个组分(mol cell,2022,82(4):852-867e855)。若充分挖掘i型系统的多样性，筛选出精简的系统，将有望本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种调控真核细胞基因转录的复合物，所述复合物包括Cas7、Cas6和Cas5，

2.根据权利要求1所述的复合物，其特征在于：所述复合物还包括转录调控因子，所述转录调控因子通过连接肽与Cas7或Cas6或Cas5连接。

3.根据权利要求1或2所述的复合物，其特征在于：所述转录调控因子通过连接肽与Cas7连接。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的复合物，其特征在于：所述转录调控因子通过连接肽与Cas7的C端连接。

5.调控真核细胞基因转录的组合物(I-F2型CRISPR-Cas系统)，其特征在于：所述组合物包括权利要求1-4中任一项所述的...

【技术特征摘要】

1.一种调控真核细胞基因转录的复合物，所述复合物包括cas7、cas6和cas5，

2.根据权利要求1所述的复合物，其特征在于：所述复合物还包括转录调控因子，所述转录调控因子通过连接肽与cas7或cas6或cas5连接。

3.根据权利要求1或2所述的复合物，其特征在于：所述转录调控因子通过连接肽与cas7连接。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的复合物，其特征在于：所述转录调控因子通过连接肽与cas7的c端连接。

5.调控真核细胞基因转录的组合物(i-f2型crispr-cas系统)，其特征在于：所述组合物包括权利要求1-4中任一项所述的复合物和crrna，所述crrna靶向真核细胞中的目的基因。

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【专利技术属性】
技术研发人员：向华，郭京，龚路遥，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：