一种重组人促卵泡激素电荷异质性的检测方法技术

本发明专利技术一种重组人促卵泡激素电荷异质性的检测方法，包括如下步骤：采用HPLC对重组人促卵泡激素进行组分分离；色谱条件如下：色谱柱：Proteomix SAX‑NP5；流动相：以Tris缓冲液为流动相A，以含NaCl的Tris缓冲液为流动相B；梯度洗脱程序为：在0min到36～45min期间，流动相A从100％降低到0％～20％，再上升到100％；流动相B从0％升高到75％～100％，再下降到0％。本发明专利技术方法能够实现重组人促卵泡激素这类复杂的蛋白的电荷异质体的有效分离，且操作简单，馏分收集方便，成本低，非常便于重组人促卵泡激素电荷异质性的分离鉴定与后续的活性研究分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物制品分析，具体涉及一种重组人促卵泡激素电荷异质性的检测方法。

技术介绍

1、重组蛋白类药物在生产过程中如细胞培养、纯化以及制剂制备，存储和使用过程等多环节，其电荷属性发生异质性改变，会导致在同一蛋白制品中产生不同的电荷异构体。

2、电荷异质体的存在会影响到产品稳定性、溶解性，导致产品功效和药代动力学改变，产品完全失活，产品免疫原性增强等，电荷异质性的控制程度反应了药物生产工艺的一致性，同时也是重组蛋白类药物的关键质量属性。《药品注册管理办法》第三章“药品上市注册”中第二节“药品上市许可”第35条规定：仿制药应当与参比制剂质量和疗效一致；药品相关规定中也指出要稳步提升药品的安全性有效性可及性，继续推进仿制药质量和疗效一致性评价，完善与仿制药相关的技术指导原则体系、一致性评价政策和技术标准体系，进一步推动仿制药质量提升。因此研究开发重组蛋白类药物电荷异质性分析在其生物类似药的研发及原研药的一致性评价研究，以及工艺质量控制中也是非常价值的。

3、重组人促卵泡激素是一种异源二聚体(α亚基&β亚基)糖蛋白，糖型复杂，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种重组人促卵泡激素电荷异质性的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：采用HPLC对重组人促卵泡激素进行组分分离；色谱条件如下：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述色谱柱为Proteomix SAX-NP5，2.1*250mm*5μm或Proteomix SAX-NP5，

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述色谱柱为Proteomix SAX-NP5，2.1*250mm*5μm时，梯度洗脱程序为：

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述梯度洗脱程序为：

5.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于...

【技术特征摘要】

1.一种重组人促卵泡激素电荷异质性的检测方法，其特征在于：包括如下步骤：采用hplc对重组人促卵泡激素进行组分分离；色谱条件如下：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述色谱柱为proteomix sax-np5，2.1*250mm*5μm或proteomix sax-np5，

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述色谱柱为proteomix sax-np5，2.1*250mm*5μm时，梯度洗脱程序为：

4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述梯度洗脱程序为：

5.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述色谱柱为proteomix sax-np5，4.6*250mm*5μm时，梯度洗脱程序为：

6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于：所述梯度洗脱程序为：

7.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述tris缓冲液的浓度为10～30mmol/...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘金涛，俞峻红，唐德芳，张强，
申请(专利权)人：成都景泽生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：