冷冻法处理带毒灰飞虱制造技术

本发明专利技术公开了一种处理携带病毒的灰飞虱的新方法。本发明专利技术的实质是通过冷冻方法使灰飞虱的移动能力暂时下降，以开展定量取虫操作，随着体温的回升，灰飞虱重新恢复移动、取食和传毒能力，进而达到快速定量地移动灰飞虱的目的。本发明专利技术较原有的方法具有更方便、快捷的特点，可应用于水稻条纹叶枯病等灰飞虱传病毒病的接种鉴定。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术是处理携带病毒的灰飞虱一种新方法，属于植物病害抗性鉴定

技术介绍
水稻条纹病毒(RSV)引起的水稻条纹叶枯病最早于1897年在日本关东发现，后在朝鲜、乌克兰和中国均有发生。我国自1962年在江浙发现该病毒以来，已经在全国16个省、市、自治区发生，目前以江苏省为主的长江下游稻区仍处于流行期。据不完全统计，仅2004年江苏省水稻条纹叶枯病发生面积就达2700万亩，占江苏省水稻面积的79％，专家预计2006后的五年内水稻条纹叶枯病仍将呈偏重发生趋势，预防工作刻不容缓。 水稻条纹叶枯病是一种由灰飞虱传播的植物病毒病，一旦发病为害后便基本无药可治，目前生产上多采用治虫防病、调整播栽期等措施，但是在虫量大，灰飞虱带毒率高，若、成虫峰期长的病害大发生年份，两者的控害效果都不理想。国外的防治经验表明，针对这一病害最为经济有效的方法是选育抗病品种应用于生产。研究表明苗期室内接种鉴定的鉴定结果稳定可靠，是抗性鉴定的首选方法，但由于传毒介体灰飞虱的移动性较强，定量接种灰飞虱一直是一件操作复杂而繁琐的工作。因而，专利技术一种方便、快速的灰飞虱处理方法，可以大大加快灰飞虱传病毒病接种鉴定的速度，进而加快抗病品种的鉴出速度和选育进程。
技术实现思路
本专利技术的目的是为水稻条纹叶枯病等灰飞虱传病毒病的接种鉴定提供一种处理携带病毒的灰飞虱的新方法。 本专利技术所提供的方法是通过冷冻方法使灰飞虱的移动能力暂时下降，以开展定量取虫操作，随着体温的回升，灰飞虱重新恢复移动、取食和传毒能力，进而达到快速定量地移动灰飞虱的目的。 在上述方法中，选取的是2～5龄可用于接种病毒的灰飞虱，冷冻的温度是-20℃，冷冻时间是20分钟。 所述用于处理的灰飞虱冷冻前应在相对封闭的容器中，其可以是以尼龙纱布封口玻璃杯或圆形开口塑料容器，要求有较好的空气流动性确保灰飞虱存活，同时又可防止灰飞虱逃出容器。 将冷冻后暂时丧失活动性的灰飞虱，即可进行类似数水稻种子的定量计数操作，准备好足量的灰飞虱后将其放入预先备好的栽有需鉴定水稻苗的接种容器中，待灰飞虱体温回升，活动能力恢复，即可进行传毒接种。 本专利技术提供了一种处理携带病毒的灰飞虱的新方法，取名为“冷冻法处理带毒灰飞虱”。该方法较传统的灰飞虱取虫方法等具有以下优点①更方便的开展预定数量的接种病毒用灰飞虱的处理；②更快速的开展接种病毒用灰飞虱的处理；③便于选取适宜龄期的接种病毒用灰飞虱。因而可以大大加快灰飞虱传病毒病接种鉴定的速度和准确度，进而加快抗病品种的鉴出速度和选育进程。 具体实施例方式 下面实施例中所用方法如无特别说明均为常规方法。 实施例1、带毒灰飞虱的冷冻时间梯度实验 取6个干燥玻璃杯，编号，选取按一定比例携带水稻条纹病毒的灰飞虱置于其中，每杯100虫左右。同时放于冰箱中于-20℃条件下开始冷冻并计时 每10分钟取出1杯，取出后迅速将飞虱倒于白纸上，用毛笔数数，观察并记录灰飞虱活跃状态，苏醒时间及死虫数。将冷冻的灰飞虱用武育粳3号单独饲养，于第二天统计死亡虫数。 结果表明冷冻10分钟，灰飞虱不昏迷，仍然可以跳动，不利于在纸上数虫；但是，随着冷冻时间超过30分种，灰飞虱的生命力会受影响，死亡率随冷冻时间的增大而增大(表1)。综合苏醒时间与死亡率可知带毒灰飞虱的冷冻处理以-20℃下冷冻20分钟左右比较合适。 表1 不同冷冻时间灰飞虱的状态 实施例2、冷冻处理对带毒灰飞虱传毒能力的影响试验 将武育粳3号浸种，催芽，至0.5叶时播于玻璃杯中；每杯播苗12株，播6杯。从按一定比例携带水稻条纹病毒灰飞虱群体中取120头左右，按上述方法-20℃下将灰飞虱冷冻20分钟，数取120虫，接于1.5叶龄的武育粳3号上，重复3次。同时用吸管准确吸取120虫接于1.5叶龄的武育粳3号上，重复3次。玻璃杯用纱布封口，48小时后，将灰飞虱移走。移栽于大田，注意田间管理。7天后开始调查植株发病情况(病级划分标准参照
技术实现思路
)，随后每隔3～6天调查一次，以发病高峰期且最能反映抗(感)病性差异的调查记载数据为依据作出抗病性评价，要求显症期间平均气温不低于20℃，最低气温不低于15℃。 表2 冷冻灰飞虱对传毒能力的影响 结果表明冷冻处理的灰飞虱接种后武育粳3号的发病率低于不冷冻的处理，可是显著性分析发现二者间无显著性差异，可见冷冻处理对带毒灰飞虱传播水稻条纹病毒的能力没有影响。 本专利技术主要服务于针对水稻条纹叶枯病开展抗病品种选育工作，为水稻条纹叶枯病等灰飞虱传病毒病的接种鉴定提供一种处理携带病毒的灰飞虱的新方法。该方法的应用可以大大加快灰飞虱传病毒病接种鉴定的速度和准确度，进而加快抗病品种的鉴出速度和选育进程。 上述实施不以任何形式限定本专利技术。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种处理携带病毒的灰飞虱的新方法，其特征在于：通过冷冻方法使灰飞虱的移动能力暂时下降，以开展定量取虫操作，随着体温的回升，灰飞虱重新恢复移动、取食和传毒能力，进而达到快速定量地移动灰飞虱的目的。其关键在于：（一）选取的是２～５龄可用于接种病毒的灰飞虱；（二）冷冻的温度是－２０℃；（三）冷冻时间是２０分钟。

【技术特征摘要】
1、一种处理携带病毒的灰飞虱的新方法，其特征在于通过冷冻方法使灰飞虱的移动能力暂时下降，以开展定量取虫操作，随着体温的回升，灰飞虱重新恢复移动、取食和传...

【专利技术属性】
技术研发人员：周彤，周益军，陈洁，程兆榜，季英华，熊如意，
申请(专利权)人：江苏省农业科学院，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]