一种基于磁珠法的男性精浆piRNA提取方法技术

本发明专利技术公开了一种基于磁珠法的男性精浆piRNA提取方法，目的在于解决目前可实现小分子piRNA提取目的的酚氯抽提法及吸附柱提取法等方法中的一些不足，如操作用时长、核酸得率低、纯度差或操作繁琐和成本高，且无法实现样本的高通量处理效果等问题；而常见的高通量提取方法——磁珠提取法，用于对精浆中小分子核酸的抽提，其核酸得率也不尽如人意。本发明专利技术公开的一种基于磁珠法的男性精浆piRNA提取方法具有提取过程操作简单、操作时间短、成本低和可高通量处理等特点。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及非特异性小分子pirna提取的一种基于磁珠法的男性精浆rna提取方法。

技术介绍

1、rna提取是当前分子扩增和检测领域中基本的实验操作之一，男性精浆中存在部分非特异性编码小分子rna与男性生殖功能存在一定程度的关联性，提取精浆中的小分子rna就成为该类研究的基础操作流程之一。

2、但由于精浆与以往研究的人类体液有所不同，精浆中存在大量蛋白杂质及其他体液内容物，如前列腺液等，导致经过预处理操作的精浆溶液仍存在杂质多、溶液粘稠等情况。使用目前常见的人类体液rna提取处理试剂，可实现小分子pirna提取目的的仅有酚氯抽提法及吸附柱提取法等少数方法。现有提取流程中，均存在一些不足，如操作用时长、核酸得率低和纯度差或操作繁琐和成本高等，且无法实现样本的高通量处理效果；而常见的高通量提取方法——磁珠提取法，用于对精浆中小分子核酸的抽提，其核酸得率也不尽如人意。

技术实现思路

1、本专利技术的目的在于提供一种基于磁珠法的男性精浆pirna提取方法，以解决目前传统方法中采用酚氯仿、chelex-1本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于磁珠法的男性精浆piRNA提取方法，其特征在于：所述提取方法是基于磁珠法提取人类体液中非特异性小分子piRNA，去除抑制性物质残留，获取高纯度的小分子核酸物质。

2.一种基于磁珠法的男性精浆piRNA提取方法，其特征在于使用以下试剂：去除蛋白时使用DTT、核酸抽提时使用trizol、磁珠纯化时使用异丙醇、洗涤使用乙醇、洗脱使用DEPC水/Nuclease free water/低盐缓冲液中的其中一种。

3.根据权利要求2所述，所用试剂的浓度为0.5％-0.7％DTT、0.5％-1.5％trizol、98％异丙醇、60％和75％乙醇。

4.根...

【技术特征摘要】

1.一种基于磁珠法的男性精浆pirna提取方法，其特征在于：所述提取方法是基于磁珠法提取人类体液中非特异性小分子pirna，去除抑制性物质残留，获取高纯度的小分子核酸物质。

2.一种基于磁珠法的男性精浆pirna提取方法，其特征在于使用以下试剂：去除蛋白时使用dtt、核酸抽提时使用trizol、磁珠纯化时使用异丙醇、洗涤使用乙...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭晓璐，盛子宁，张万红，
申请(专利权)人：南京启天营生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：