一种基于CRISPR/Cas12a的生物传感器检测大米中重金属砷的方法技术

本发明专利技术公开了一种基于CRISPR/Cas12a的生物传感器检测大米中重金属砷的方法，涉及微生物的测定技术领域，其技术要点为包括以下步骤：S1、使lockerDNA与其相应的目标分子的aptamer结合，形成一个DNA传感器，其中locker DNA和aptamer的序列如表1所示。S2、使用S1中获得的DNA传感器，添加砷标准溶液后，靶点与aptamer结合释放locker DNA。S3、释放locker DNA结合并激活由Cas12a蛋白和crRNA组成的Cas12a核糖核蛋白(RNP)，激活的Cas12a‑RNP切割附近的ssDNA‑FQ，产生荧光信号，最终实现对于砷标准溶液的定量检测。本发明专利技术利用Cas12a的反式切割属性，以及“aptamer‑locker”DNA传感器技术的操作简单、特异性强、灵敏度高、分析速度快等特点，实现对重金属砷的快速检测结果。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物的测定，具体涉及一种基于crispr/cas12a的生物传感器检测大米中重金属砷的方法。

技术介绍

1、传统的重金属检测技术不利于食品中应急事件的快速检测。(检测技术要求高，检测步骤繁琐，成本高，检测极限偏高无法精准测量稻米中低浓度污染的砷)。

技术实现思路

1、本专利技术的目的是为了解决上述问题，提供一种基于crispr/cas12a的生物传感器检测大米中重金属砷的方法。

2、为了达到上述目的，本专利技术的技术方案如下：一种基于crispr/cas12a的生物传感器检测大米中重金属砷的方法，其特征在于，包括以下步骤：

3、s1、使locker dna与其相应的目标分子的aptamer结合，形成一个dna传感器，其中locker dna和aptamer的序列如表1所示。

4、s2、使用s1中获得的dna传感器，添加砷标准溶液后，靶点与aptamer结合释放lockerdna。

5、s3、释放locker dna结合并激活由cas12a蛋白和c本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于CRISPR/Cas12a的生物传感器检测大米中重金属砷的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于CRISPR/Cas12a的生物传感器检测大米中重金属砷的方法，其特征在于：在S3中，所述单链DNA序列如表1所示，所述的单链DNA探针在5’端被标记荧光基团FAM，在3’端被标记荧光淬灭基团BHQ1。

3.根据权利要求1-2任一所述的一种基于CRISPR/Cas12a的生物传感器检测大米中重金属砷的方法，其特征在于：在S1中，所述使locker DNA与其相应的目标分子的aptamer结合，形成一个DNA传感器为了获得稳定的“a...

【技术特征摘要】

1.一种基于crispr/cas12a的生物传感器检测大米中重金属砷的方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种基于crispr/cas12a的生物传感器检测大米中重金属砷的方法，其特征在于：在s3中，所述单链dna序列如表1所示，所述的单链dna探针在5’端被标记荧光基团fam，在3’端被标记荧光淬灭基团bhq1。

3.根据权利要求1-2任一所述的一种基于crispr/cas12a的生物传感器检测大米中重金属砷的方法，其特征在于：在s1中，所述使locker dna与其相应的目标分子的aptamer结合，形成一个dna传感器为了获得稳定的“aptamer-locker”复合物，将aptamer和lockerdna混合物95℃加热10min，随后以0.1℃每秒的速度缓慢冷却至25℃。

4.根据权利要求3所述的一种基于crispr/cas12a的生物传感器检测大...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜佳琳，何逸昕，陈俊，杨之帆，杨婉婷，吕杨，韦元慧，时健杰，杨辉，王金琪，刘舒馨，程祎梦，陈卫洁，石宇，王依林，李家乘，
申请(专利权)人：湖北大学，
类型：发明
国别省市：