一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法技术

本发明专利技术提出了一种霉菌高效转化坎利酮生产11α‑羟基坎利酮的方法，包括如下步骤：S1，生产斜面制备：生产菌株为曲霉(Aspergillus nakazawae,CBS 640.78)，将菌株置于PDA斜面培养基上培养得到生产斜面；S2，发酵种子制备：将氯化钠溶液加入生产斜面得到孢子悬浮液，然后将孢子悬浮液加入种子培养基中培养得到发酵种子；S3，底物转化：将发酵种子接入到发酵培养基中培养，残糖降至18～20g/L时添加坎利酮继续发酵，当培养基中的葡萄糖浓度低于5g/L时添加葡萄糖溶液继续发酵，当坎利酮转化率大于90％时，结束发酵；发酵培养基的组分包括葡萄糖，酵母浸粉，玉米浆干粉，吐温80，乙酰胆碱和β‑葡萄糖苷酶。本发明专利技术通过监测葡萄糖浓度并及时补加，可以维持发酵液中充足的营养物质；同时乙酰胆碱和β‑葡萄糖苷酶，可以刺激曲霉的生长和代谢，有效增加发酵液中的菌丝密度及坎利酮的转化速率和利用率，产生良好的经济效益。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物转化坎利酮领域，尤其涉及一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法。

技术介绍

1、坎利酮(canrenone)是一种激素类甾体药物，在临床中用于心衰、高血压等心血管疾病时效果非常显著。其羟基化产物11α-羟基坎利酮可以作为重要的医药中间体合成依普利酮(eplerenone)，这是一种新型甾体药物，它在临床上对于心血管疾病如治疗心力衰竭、心肌梗死和高血压有确切疗效，与其他心血管药物螺内酯等相比几乎无不良反应，同时耐受性更优。

2、在坎利酮的衍生物中，11α-羟基坎利酮可以被用来制备一系列有用的坎利酮衍生物，因此受到了极大地关注。11α-羟基坎利酮是由坎利酮通过微生物转化在11位上羟基化得到。由于其市场潜力巨大，很早就有坎利酮微生物转化生产11α-羟基坎利酮的应用。1980年，deshayes在坎利酮投料浓度为1.5g/l时，转化率为95％，但其投料量不大。不适用于大规模工业生产。1996年，john等采用间歇补料，虽增加了投料量，但转化时间加长，转化率不高，成本大大提高。现有的坎利酮微生物转化技术仍然存在生产周期长，本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法，其特征在于：所述坎利酮的添加量为18～20g/L。

3.如权利要求1所述的一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法，其特征在于：发酵种子的接种量为3v/v％～5v/v％。

4.如权利要求1所述的一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法，其特征在于：发酵初始转速200～250rpm，通气量1～2VVM，罐压0.05～0.08Mpa。

5.如权利要求1所述的一种霉菌高效...

【技术特征摘要】

1.一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法，其特征在于：包括如下步骤：

2.如权利要求1所述的一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法，其特征在于：所述坎利酮的添加量为18～20g/l。

3.如权利要求1所述的一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法，其特征在于：发酵种子的接种量为3v/v％～5v/v％。

4.如权利要求1所述的一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法，其特征在于：发酵初始转速200～250rpm，通气量1～2vvm，罐压0.05～0.08mpa。

5.如权利要求1所述的一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法，其特征在于：葡萄糖添加时流速为70～100ml/h，流加9～12l浓度为140～160g/l的葡萄糖水溶液。

6.如权利要求1所述的一种霉菌高效转化坎利酮生产11α-羟基坎利酮的方法，其特征在于：种子培养基的组分为：葡萄糖10～...

【专利技术属性】
技术研发人员：姚立成，易红磊，邹振东，房鸣，汪晗，系祖斌，李明磊，
申请(专利权)人：湖北共同甾体药物研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：