光敏剂和噬菌体的轭合物制造技术

本发明专利技术提供含有光敏剂和噬菌体的轭合物的组合物，该轭合物可用于在光动力学治疗的靶向方法中杀菌，特别是ＭＲＳＡ、ＥＭＲＡＳ、ＶＲＳＡ、异－ＶＲＳＡ或ＣＡ－ＭＲＳＡ菌株。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】光敏剂和噬菌体的轭合物
本专利技术涉及含有光敏剂和噬菌体(bacteriophage)的轭合物的组合物，特别是被认为是葡萄球菌噬菌体(staphylophage)的葡萄球菌的噬菌体。本专利技术还涉及所述轭合物在感染性疾病的光动力学治疗的方法中的用途。
技术介绍
由于许多种病原细菌的抗生素耐药性的快速显现，对抗细菌感染的抗菌剂的作用日益变得无效。这种病原体之一是金黄色葡萄球菌(S.aureus)，它的特性是引起诸如疖、痈、脓疱病的皮肤感染，以及痤疮、烧伤和伤口的感染。如果感染有机体是毒性菌株，那么例如感染或集落化的棉塞可以产生被认为是中毒性休克综合征的有生命威胁的毒血症。有机体也可以从这些感染或者从诸如静脉导管的外来物中进入血流，并引起诸如心内膜炎、骨髓炎、脑膜炎和肺炎的这些其它位置的感染。许多细菌能够导致皮肤和伤口的感染，例如，凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative staphylococci)、金黄色葡萄球菌(staphylococcusaureus)、链球菌(streptococci)、棒状杆菌属(corynebacterium spp.)、大肠杆菌(E.coli)、产气克雷伯杆菌(Klebsiella aerogenes)、肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)、产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)、痤疮丙酸杆菌(Propionibacterium acnes)、拟杆菌属(Bacteroides spp.)、绿浓假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)和消化链球菌属(Peptostreptococcusspp.)。这些细菌日益显示出对抗生素治疗的耐药性。特别地，金黄色葡萄球菌的耐药菌株已经出现。在1961年第一次报告了甲氧苯青霉素(Methicillin)耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)(Jevons，M.(1961)British Medical Journal，1，124-5)，现在这-->些菌株成为全世界医院获得性感染的主要原因，并在很多护理和居住地中流行。其引起了明显的感染，并且每年在英国有数百病人的发病率，这对卫生保健是一种令人担忧的挑战(Ayliffe等，J Hosp Infect(1988)，39，253-90)。自从第一次报告了MRSA，已经证明这些有机体已经对很多种抗菌剂产生耐药性，这些抗菌剂包括红霉素、氨基糖苷类、四环素类、三甲氧苄二氨嘧啶、磺胺类和氯霉素。MRSA菌株已经发展为仅仅对单种临床提供的抗生素敏感了：诸如万古霉素(vancomycin)和替考拉宁(teicoplanin)的糖肽类。但是，抗药性发展至此，现在已经报告有对万古霉素有耐药性的菌株(Hiramatsu，K.(1998)，American Journal ofMedicine，104，7S-10S)。这些菌株被称为VRSA(耐万古霉素的金黄色葡萄球菌)和异-VRSA(暴露在高水平的万古霉素后而产生的耐药性菌株)。目前，对MRSA感染的病人的处理通常包括抗菌剂的给药，但情况仍然是，有发展为对许多所使用的药剂的耐药性的证据。由于对所有现有的抗菌素基本耐药的菌株的出现，MRSA现在已成为健康的严重威胁。目前，术语MRSA本身更精确地用在甲氧苯青霉素和多种抗菌素耐药的金黄色葡萄球菌。已经发现某些MRSA菌株不仅在医院内部而且在医院之间迅速传播。这些菌株已经被称为流行性MRSA(EMRSA)。自从1981年报告了第一株EMRSA菌株(EMRSA-1)以来，已经鉴别出17种不同的EMRSA，它们全部都对多种抗菌素具有耐药性。最近，两种最流行的菌株是EMRSA-15和EMRSA-16，它们占已报告的30000种MRSA分离菌的60-70％(Livermore，D(2000)Int.J.Antimicrobial Agents，16，S3-S10)。重要的是，MRSA菌株(被称为社区获得的MRSA(CA-MRSA))已经开始在社区中传播，即，在非就医的个体之间。从以上所述，很显然，迫切需要对抗细菌感染，特别是MRSA感染的替代方法。一种方法是使用光活性剂获得使有机体致死的光敏作用。这涉及用可光活化的化学药品(光敏剂)处理有机体，在适合波长的光的照射下，该化学药品会产生引起溶菌作用的细胞毒性物质。在体外使用甲-->苯胺蓝O(TBO)和二磺酸铝酞菁(AlPcS2)作为光敏剂，这种技术已经用于达到杀灭广谱的包括金黄色葡萄球菌和MRSA的细菌。光敏剂和激光都不能单独起到杀菌的作用(Wilson等，(1994)J AntimicrobChemother 33，619-24)。在随后的研究中，已经发现16株EMRSA菌株在AlPcS2的存在下容易被低剂量的红光(674nm)杀灭(Griffiths等，(1997)J Antimicrob Chemother，40，873-6)。在更高的光照剂量下，可达到100％杀灭。光动力学治疗(PDT)是这种方法在疾病治疗中的应用。它是治疗肿瘤中确立的程序并成为消毒血液产品手段的基础。现在，已经评价了PDT对治疗感染的应用。例如，与氩激光器联合的血卟啉已经用于治疗多种神经外科手术后感染和脑脓肿(Lombard等，(1985)，肿瘤与其它疾病的光动力治疗(Photodynamic Therapy of Tumours and otherDiseases)，Jori & Perria出版)。一个有关于感染性疾病的PDT的潜在的问题是它缺乏特异性。因此，如果宿主细胞以及目标有机体同时结合或摄取光敏剂，接下来的照射也可以导致宿主细胞的死亡。克服这种问题的一种方法是通过使用靶向化合物：即任何一种能特异结合到病原体表面的化合物。已表明，几种靶向化合物当轭合到光敏剂时，它们能够成功地去除细菌的特异菌株。例如，免疫球蛋白G(IgG)已经用于靶向金黄色葡萄球菌蛋白A(Gross等(1997)，Photochemistry and Photobiology，66，872-8)。抗牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)脂多糖的单克隆抗体(Bhatti等(2000)，Antimicrobial Agents and Chemotherapy，44，2615-8)和抗牙龈卟啉单胞菌与粘放线菌(Actinomyces viscosus)的多聚-L-赖氨酸肽(Soukos等(1998)，Antimicrobial Agents and Chemotherapy，42，2595-2601)。通过右旋糖苷链轭合到光敏剂锡(IV)绿素e6(SnCe6)的单克隆抗体选择性地杀灭在630nm波长照射的绿浓假单胞菌(P.aeruginosa)，而金黄色葡萄球菌未受影响(Friedberg等(1991)，AnnN Y Acad Sci，618，383-393)。本专利技术的专利技术人已经使用轭合到SnCe6的IgG来靶向EMRSA菌株1、EMRSA菌株3、EMRSA菌株15和EMRSA菌株16(Embleton等-->(2002)，J Antimicrob Chemother，50，857-864)。与单独使用光敏剂比较，达到了更高本文档来自技高网...

【技术保护点】
组合物，其含有光敏剂和噬菌体的轭合物。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】GB 2003-10-9 0323699.91.组合物，其含有光敏剂和噬菌体的轭合物。2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述噬菌体是葡萄球菌噬菌体。3.根据权利要求1或2所述的组合物，其中所述光敏剂共价地连接到所述噬菌体。4.根据权利要求1-3任一项所述的组合物，其中所述光敏剂选自卟啉类、酞菁类、绿素类、菌绿素类、吩噻嗪类、吩嗪类、吖啶类、德卟啉、菁族、蒽环类、脱镁叶绿甲脂酸类、sapphyrins类、富勒烯、卤化咕吨类、苝醌颜料、gilvocarcins类、叔噻吩类、苯并菲啶类、补骨脂素类和核黄素类。5.根据权利要求4所述的组合物，其中所述光敏剂是锡(IV)绿素e6(SnCe6)。6.根据前述权利要求任一项所述的组合物，其中所述噬菌体选自噬菌体53、75、79、80、83、φ11、φ12、φ13、φ147、φMR11、48、71、φ812、SK311、φ131、SB-I、U16、C1、SF370.1、SP24、SFL、A1、ATCC 12202-B1、f304L、φ304S、φ15、φ16、782、P1c1r100KM、P1、T1、T3、T4、T7MS2、P1、M13、UNL-1、ACQ、UT1、tbalD3、E79、F8、pf20B3、F116、G101、B86、T7M、ACq、UT1、BLB、PP7、ATCC 29399-B1和B40-8。7.根据权利要求6所述的组合物，其中所述噬菌体是噬菌体75或噬菌体φ11。-->8.根据前述权利要求任一项所述的组合物，其中所述光敏剂的浓度为0.01-200μg/ml。9.根据前述权利要求任一项所述的组合物，其中所述噬菌体的浓度为1×105-1×1010pfu/ml。10.根据前述权利要求任一项所述的组合物，其中还包含Ca2+离子源，优选氯化钙。11.根据权利要求1-10中任一项所述的组合物，其在药物可接受的载体中呈溶液的形式。12.根据权利要求1-11中任一项所述的组合物，其中所述组合物还包含缓冲剂、盐、抗氧化...

【专利技术属性】
技术研发人员：迈克尔威尔逊，肖恩奈尔，
申请(专利权)人：UCL生物医学公共有限公司，
类型：发明
国别省市：GB[英国]