一种表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂、培养基、应用制造技术

本发明专利技术涉及重组蛋白表达及细胞培养技术领域，具体涉及一种表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂、培养基、应用。本发明专利技术添加剂，其有效成分抑制细胞系表达LSD1和HDAC，具体选用LSD1/HDAC双靶点小分子抑制剂作为添加剂，添加应用在重组蛋白表达细胞系悬浮培养，最大单抗滴度特异性单抗产量成倍增加，最优使用浓度添加下单抗滴度增加2.64±0.28倍，特异性单抗产量增加2.97±0.15倍。本发明专利技术添加剂通过显著增加LSD1相关底物H3K4me2以及HDAC相关底物Ac‑H3K9、Ac‑H3K27的蛋白表达水平，从而增加重组单抗的产量，为应用表观调控策略提高重组蛋白的表达提供了一种有效的途径。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及重组蛋白表达及细胞培养，具体涉及一种表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂、培养基、应用。

技术介绍

1、近年来，中国仓鼠卵巢(cho)细胞一直是生物制药行业大规模生产重组蛋白的首选哺乳动物宿主被用于治疗性蛋白的生产。与其他哺乳动物表达系统相比，它们具有明显的优势，包括安全性、高比产率(qp)、有效的翻译后修饰、易于在大型生物反应器和无血清培养基中培养，以及基因修饰的灵活性。但目前提高重组cho(rcho)细胞培养的产量仍然是存在的突出问题。表观遗传调控在许多细胞过程中起着至关重要的作用，包括增殖、分化、周期、凋亡等，修饰细胞内表观遗传状态的小分子表观遗传调节剂是调节基因表达的有用工具。小分子表观遗传调节剂是通过靶向特定的蛋白质和信号通路，对细胞功能产生影响，从而在药物研发和疾病治疗方面具有重要意义，目前已被用于治疗多种人类疾病。近年来有研究发现通过表观遗传修饰的转录抑制是rcho细胞培养中重组蛋白高稳定生产的潜在瓶颈，因此小分子表观遗传调节剂从药物研发和疾病治疗领域拓展应用至重组蛋白表达领域。

2、组蛋白去乙酰化酶(hdac)可调节核本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂，其特征在于，其有效成分抑制细胞系表达组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1LSD1和组蛋白去乙酰化酶HDAC。

2.如权利要求1所述的表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂，其特征在于，其有效成分为LSD1/HDAC双靶点抑制剂。

3.如权利要求2所述的表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂，其特征在于，所述LSD1/HDAC双靶点抑制剂的化学结构通式如式(Ⅰ)所示：

4.如权利要求3所述的表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂，其特征在于，所述添加剂在细胞培养过程中添加至培养基体系中的终浓度为0.5～4μM。>

5.如权利要...

【技术特征摘要】

1.一种表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂，其特征在于，其有效成分抑制细胞系表达组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1lsd1和组蛋白去乙酰化酶hdac。

2.如权利要求1所述的表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂，其特征在于，其有效成分为lsd1/hdac双靶点抑制剂。

3.如权利要求2所述的表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂，其特征在于，所述lsd1/hdac双靶点抑制剂的化学结构通式如式(ⅰ)所示：

4.如权利要求3所述的表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂，其特征在于，所述添加剂在细胞培养过程中添加至培养基体系中的终浓度为0.5～4μm。

5.如权利要求4所述的表达重组蛋白的细胞系培养用添加剂，其特征在于，所述添加剂在细胞培养过程中添加至培养...

【专利技术属性】
技术研发人员：贾岩龙，王天云，韩明明，王冲，张玺，王小引，张慧婕，王海童，郭家良，邱乐乐，高利洁，崔柳苏，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：