【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫诊断,特别涉及一种猫感染sars-cov-2病毒的检测方法及检测试剂盒。
技术介绍
1、sars-cov-2病毒自发现以来,已经对全球医疗、经济以及社会造成重大负担。sars-cov-2病毒是一种人畜共患病原体,其除了在人类当中传播,也会传播至多种哺乳动物当中。比如家猫在感染sars-cov-2病毒后不仅可能会表现出临床症状,威胁家猫的健康,而且sars-cov-2病毒可以在家猫体内持续存在,且存在传染给其他猫甚至是传染给人的风险。
2、目前,针对快速检测人类感染sars-cov-2病毒的产品有好多,但是市面上针对家猫感染sars-cov-2病毒的检测产品却鲜有报道。可见,现有技术还有待改进和提高。
技术实现思路
1、鉴于上述现有技术的不足之处,本专利技术的目的在于提供一种猫感染sars-cov-2病毒的检测方法及检测试剂盒,旨在解决现有技术针对猫感染sars-cov-2病毒的检测方法种类少,以及相关检测产品种类不足的技术问题。
2、为了达到上述目的,本专利技术采取了以下技术方案:
3、本专利技术第一方面提供了一种猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,包括以下步骤:
4、包被:将0.4~0.8μg/ml的sars-cov-2 s蛋白稀释液包被于酶标板上;
5、封闭:采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行封闭,孵育,洗涤多次,拍干;
6、加入一抗:向酶标板加入稀释后的待测血清样品、阴性血清以
7、加入二抗:向酶标板加入稀释后的兔抗猫igg-hrp抗体溶液,孵育,洗涤多次,拍干;
8、显色:向酶标板加入tmb底物显色液,避光显色,然后加入终止液,测定od450nm值;若样本血清的od450nm值大于阴性血清的2倍,则该样本血清判为阳性,否则为阴性。
9、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清的稀释度为1:100。
10、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,当sars-cov-2 s蛋白稀释液为0.4μg/ml时,所述兔抗猫igg-hrp抗体溶液的稀释度为1:5000;当sars-cov-2 s蛋白稀释液为0.8μg/ml时,所述兔抗猫igg-hrp抗体溶液的稀释度为1:10000。
11、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行稀释。
12、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述兔抗猫igg-hrp抗体溶液采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行稀释。
13、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述包被的步骤包括:
14、采用碳酸盐缓冲液配制0.4μg/ml的sars-cov-2 s蛋白稀释液,然后将sars-cov-2s蛋白稀释液包被至酶标板上,4℃条件下包被过夜;
15、弃去包被液,用pbst洗涤四次,每孔加入300μl,每次洗涤时静置1min,洗涤完成后拍干。
16、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述封闭中,在37℃的条件下孵育2h。
17、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述加入一抗中,在37℃的条件下孵育45min。
18、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述加入二抗中,在37℃的条件下孵育45min。
19、本专利技术第二方面提供一种猫感染sars-cov-2病毒检测试剂盒,包括:包被有sars-cov-2 s蛋白的酶标板、兔抗猫igg-hrp抗体溶液、阴性血清、阳性血清、显色液和终止液。
20、有益效果:本专利技术第一方面提供了一种猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,所述猫感染sars-cov-2病毒的检测方法为间接elisa检测方法,通过采用sars-cov-2 s蛋白作为包被蛋白,并以兔抗猫igg-hrp抗体作为二抗,可以准确测定猫是否感染sars-cov-2病毒。
21、本专利技术第二方面提供了一种猫感染sars-cov-2病毒检测试剂盒,所述检测试剂盒使用时按照以上的检测方法进行,能对猫是否感染sars-cov-2病毒进行检测。本专利技术提供的猫感染sars-cov-2病毒检测试剂盒使用操作简单,检测时间短,适用于市面推广。
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1.一种猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清的稀释度为1:100。
3.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,当SARS-CoV-2 S蛋白稀释液为0.4μg/mL时,所述兔抗猫IgG-HRP抗体溶液的稀释度为1:5000;当SARS-CoV-2 S蛋白稀释液为0.8μg/mL时,所述兔抗猫IgG-HRP抗体溶液的稀释度为1:10000。
4.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行稀释。
5.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述兔抗猫IgG-HRP抗体溶液采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行稀释。
6.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述包被的
7.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述封闭中,在37℃的条件下孵育2h。
8.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述加入一抗中,在37℃的条件下孵育45min。
9.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述加入二抗中,在37℃的条件下孵育45min。
10.一种猫感染SARS-CoV-2病毒检测试剂盒,其特征在于,包括:包被有SARS-CoV-2 S蛋白的酶标板、兔抗猫IgG-HRP抗体溶液、阴性血清、阳性血清、显色液和终止液。
...【技术特征摘要】
1.一种猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其特征在于,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清的稀释度为1:100。
3.根据权利要求1所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其特征在于,当sars-cov-2 s蛋白稀释液为0.4μg/ml时,所述兔抗猫igg-hrp抗体溶液的稀释度为1:5000;当sars-cov-2 s蛋白稀释液为0.8μg/ml时,所述兔抗猫igg-hrp抗体溶液的稀释度为1:10000。
4.根据权利要求1所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其特征在于,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行稀释。
5.根据权利要求1所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,...
【专利技术属性】
技术研发人员:罗霖霜,吕宗吉,陈燕君,杨国强,杜艺彤,
申请(专利权)人:佛山科学技术学院,
类型:发明
国别省市:
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