猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法及检测试剂盒技术

技术编号:41820522 阅读:23 留言:0更新日期:2024-06-24 20:35
本发明专利技术涉及免疫诊断技术领域,特别涉及一种猫感染SARS‑CoV‑2病毒的检测方法及检测试剂盒。所述检测方法属于间接ELISA检测方法,先将0.4~0.8μg/mL的SARS‑CoV‑2 S蛋白稀释液包被于酶标板上;然后采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行封闭,孵育,洗涤多次,拍干后加入一抗;加入一抗后再次孵育,洗涤多次,拍干后再加入二抗。二抗采用稀释后的兔抗猫IgG‑HRP抗体溶液。二抗孵育,洗涤多次,拍干后加入显色液,避光显色,最后加入终止液,测定OD450nm值;若样本血清的OD450nm值大于阴性血清的2倍,则该样本血清判为阳性,否则为阴性。所述检测方法的准确性好,操作简单。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及免疫诊断,特别涉及一种猫感染sars-cov-2病毒的检测方法及检测试剂盒。


技术介绍

1、sars-cov-2病毒自发现以来,已经对全球医疗、经济以及社会造成重大负担。sars-cov-2病毒是一种人畜共患病原体,其除了在人类当中传播,也会传播至多种哺乳动物当中。比如家猫在感染sars-cov-2病毒后不仅可能会表现出临床症状,威胁家猫的健康,而且sars-cov-2病毒可以在家猫体内持续存在,且存在传染给其他猫甚至是传染给人的风险。

2、目前,针对快速检测人类感染sars-cov-2病毒的产品有好多,但是市面上针对家猫感染sars-cov-2病毒的检测产品却鲜有报道。可见,现有技术还有待改进和提高。


技术实现思路

1、鉴于上述现有技术的不足之处,本专利技术的目的在于提供一种猫感染sars-cov-2病毒的检测方法及检测试剂盒,旨在解决现有技术针对猫感染sars-cov-2病毒的检测方法种类少,以及相关检测产品种类不足的技术问题。

2、为了达到上述目的,本专利技术采取了以下技术方案:

3、本专利技术第一方面提供了一种猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,包括以下步骤:

4、包被:将0.4~0.8μg/ml的sars-cov-2 s蛋白稀释液包被于酶标板上;

5、封闭:采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行封闭,孵育,洗涤多次,拍干;

6、加入一抗:向酶标板加入稀释后的待测血清样品、阴性血清以及阳性血清,孵育,洗涤多次,拍干;

7、加入二抗:向酶标板加入稀释后的兔抗猫igg-hrp抗体溶液,孵育,洗涤多次,拍干;

8、显色:向酶标板加入tmb底物显色液,避光显色,然后加入终止液,测定od450nm值;若样本血清的od450nm值大于阴性血清的2倍,则该样本血清判为阳性,否则为阴性。

9、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清的稀释度为1:100。

10、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,当sars-cov-2 s蛋白稀释液为0.4μg/ml时,所述兔抗猫igg-hrp抗体溶液的稀释度为1:5000;当sars-cov-2 s蛋白稀释液为0.8μg/ml时,所述兔抗猫igg-hrp抗体溶液的稀释度为1:10000。

11、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行稀释。

12、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述兔抗猫igg-hrp抗体溶液采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行稀释。

13、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述包被的步骤包括:

14、采用碳酸盐缓冲液配制0.4μg/ml的sars-cov-2 s蛋白稀释液,然后将sars-cov-2s蛋白稀释液包被至酶标板上,4℃条件下包被过夜;

15、弃去包被液,用pbst洗涤四次,每孔加入300μl,每次洗涤时静置1min,洗涤完成后拍干。

16、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述封闭中,在37℃的条件下孵育2h。

17、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述加入一抗中,在37℃的条件下孵育45min。

18、所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其中,所述加入二抗中,在37℃的条件下孵育45min。

19、本专利技术第二方面提供一种猫感染sars-cov-2病毒检测试剂盒,包括:包被有sars-cov-2 s蛋白的酶标板、兔抗猫igg-hrp抗体溶液、阴性血清、阳性血清、显色液和终止液。

20、有益效果:本专利技术第一方面提供了一种猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,所述猫感染sars-cov-2病毒的检测方法为间接elisa检测方法,通过采用sars-cov-2 s蛋白作为包被蛋白,并以兔抗猫igg-hrp抗体作为二抗,可以准确测定猫是否感染sars-cov-2病毒。

21、本专利技术第二方面提供了一种猫感染sars-cov-2病毒检测试剂盒,所述检测试剂盒使用时按照以上的检测方法进行,能对猫是否感染sars-cov-2病毒进行检测。本专利技术提供的猫感染sars-cov-2病毒检测试剂盒使用操作简单,检测时间短,适用于市面推广。

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清的稀释度为1:100。

3.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,当SARS-CoV-2 S蛋白稀释液为0.4μg/mL时,所述兔抗猫IgG-HRP抗体溶液的稀释度为1:5000;当SARS-CoV-2 S蛋白稀释液为0.8μg/mL时,所述兔抗猫IgG-HRP抗体溶液的稀释度为1:10000。

4.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行稀释。

5.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述兔抗猫IgG-HRP抗体溶液采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行稀释。

6.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述包被的步骤包括:

7.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述封闭中,在37℃的条件下孵育2h。

8.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述加入一抗中,在37℃的条件下孵育45min。

9.根据权利要求1所述的猫感染SARS-CoV-2病毒的检测方法,其特征在于,所述加入二抗中,在37℃的条件下孵育45min。

10.一种猫感染SARS-CoV-2病毒检测试剂盒,其特征在于,包括:包被有SARS-CoV-2 S蛋白的酶标板、兔抗猫IgG-HRP抗体溶液、阴性血清、阳性血清、显色液和终止液。

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【技术特征摘要】

1.一种猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其特征在于,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清的稀释度为1:100。

3.根据权利要求1所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其特征在于,当sars-cov-2 s蛋白稀释液为0.4μg/ml时,所述兔抗猫igg-hrp抗体溶液的稀释度为1:5000;当sars-cov-2 s蛋白稀释液为0.8μg/ml时,所述兔抗猫igg-hrp抗体溶液的稀释度为1:10000。

4.根据权利要求1所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,其特征在于,所述待测血清样品、阴性血清以及阳性血清采用质量分数为10%的脱脂奶粉溶液进行稀释。

5.根据权利要求1所述的猫感染sars-cov-2病毒的检测方法,...

【专利技术属性】
技术研发人员:罗霖霜吕宗吉陈燕君杨国强杜艺彤
申请(专利权)人:佛山科学技术学院
类型:发明
国别省市:

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