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一种测定含溴阻燃剂类污染物的甲状腺干扰活性的方法技术

技术编号:4177329 阅读:243 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术涉及一种测定含溴阻燃剂类污染物的甲状腺干扰活性的方法,包括:在反应管中依次加入Tris-HCl缓冲液、TTR、125I-T4以及竞争剂;同时另取一组反应管替换竞争剂为相应溶剂作为对照组;在4℃下孵育12~24h;孵育结束后,除去未与转运蛋白TTR结合的游离125I-T4;用γ计数仪测量收集到的离心液体放射性,由每管每分钟放射性计数cpm,求出125I-T4和待测化合物与转运蛋白TTR孵育竞争结合的能力。该方法步骤简单,快速,高效率且灵敏性高,该方法在很低浓度的条件下也能测试化合物的TTR结合活性,并得到了各化学品较理想的抑制曲线。

Method for determining thyroid interference activity of bromine containing flame retardant pollutant

Including the method, the invention relates to a thyroid disrupting activity determination of brominated flame retardant pollutants: in the reaction tube followed by adding Tris - HCl, 125I - TTR buffer, T4 and competition at the same time agent; another group reaction tube to replace the competition agent for the corresponding solvent as the control group; at 4 DEG C for for 12 ~ 24h; after incubation, remove unbound and transporter TTR free 125I - T4; by centrifugal liquid radioactive measurements collected by gamma counter, each radioactive counts per minute for CPM, 125I and T4 tested compounds and transporters TTR incubated with competitive binding ability. The method is simple, fast, efficient and sensitive. The method can also test the TTR binding activity of compounds under very low concentration conditions and obtain an ideal inhibition curve for each chemical.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于对甲状腺激素1\干扰活性的检测领域,特别涉及一种测定含溴阻燃剂 类污染物的甲状腺干扰活性的方法。
技术介绍
溴系阻燃剂目前被认为是普遍存在的持久性有机污染物,在它的生产、使用和废 物处置阶段都会不同程度地释放到环境中。溴系阻燃剂主要可分为多溴联苯醚(PBDEs),多 溴联苯(PBBs),四溴双酚A(TBBPA)和六溴环十二烷(HBCD)等四大类。溴系阻燃剂的阻燃 效率高,热稳定性好,添加量少,对材料性能影响小,价格便宜,因而作为一种添加型阻燃剂 被广泛地应用于家用电器、室内装璜中的泡沫塑料、地毯和布料之中;同时,含溴系阻燃剂 的塑料也大量用于与电源、电路、发热体等密切相关的电子电器设备,轿车、公共汽车、火车 和飞机等,与人们的生活息息相关。 溴系阻燃剂及其代谢产物与甲状腺激素转运蛋白有很高的结合活性,表明溴系阻 燃剂可能会与体内的L甲状腺激素竞争结合转运蛋白,通过干扰甲状腺激素的转运过程, 干扰体内甲状腺激素的动态平衡。它对甲状腺激素的干扰体现在多个方面,比如直接损伤 甲状腺,造成甲状腺肥大;改变甲状腺激素水平,加速甲状腺激素清除;或者与甲状腺激素竞争结合转运蛋白等等本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定含溴阻燃剂类污染物的甲状腺干扰活性的方法,包括:(1)加样样品组:在反应管中依次加入0.1MTris-HCl缓冲液140~145uL、30nM转运蛋白TTR2~5uL、55nM[125]↑I-T↓[4]45~50uL、1~5uL浓度为8×10↑[-5]mol/L~8×10↑[-6]mol/L的竞争剂,以及0~9uL的二甲亚砜或二氯甲烷使竞争结合反应液最终体积为200uL;对照组:在反应管中依次加入0.1MTris-HCl缓冲液140~145uL、30nM转运蛋白TTR2~5uL、55nM[125]↑I-T↓[4]45~50uL以及5~10uL的二甲亚砜或二氯甲烷,使反应液最终体积为20...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:冀秀玲刘洋
申请(专利权)人:东华大学
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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