一种抗菌肽Cecropin P1的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了一种抗菌肽CecropinP1的制备方法及其应用。涉及生物工程技术领域。包括：样本RNA提取，目的基因Cecropin P1克隆；重组克隆载体的构建：得重组克隆载体菌液；重组表达载体pET‑32a‑CP1的构建；重组表达载体pET‑32a‑CP1的诱导表达，还提供了应用。本发明专利技术使用原核表达系统进行重组蛋白的表达。极大提升了重组蛋白的表达量。还摸索了以包涵体形式表达的重组蛋白的变性、复性的条件。最终对重组蛋白成功进行复性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物工程，更具体的说是涉及一种抗菌肽cecropinp1的制备方法及其应用。

技术介绍

1、抗菌肽(antibacterialpeptidecs)，又称抗微生物肽(antimicrobialpeptides,amps)或肽类抗生素(peptide antibiotics)，是一种广泛分布于生物界的小分子抑菌活性多肽，是动物先天性防御系统的重要组成部分，在自然界分布广泛，有相对分子质量小、热稳定性好、水溶性好、无免疫原性以及不易产生耐药性等特点。抗菌肽不易产生耐药性且能够很快杀灭微生物来保护人和动物免受局部和系统的感染，由于天然抗菌肽在生物体内的含量极微，虽然某些抗菌肽已经得到了分离纯化，但制备成本高，难以获得大量的产物。

2、因此，如何提供一种抗菌肽cecropinp1的制备方法及其应用是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

1、有鉴于此，本专利技术提供了一种抗菌肽cecropinp1的制备方法及其应用。通过基因工程手段，在生物体内重组表达具有活性的抗菌肽cecropinp1本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种抗菌肽Cecropin P1的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)使用CP1-F和CP1-R引物进行目的基因Cecropin P1克隆；所述CP1-F核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；所述CP1-R核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)将CecropinP1与pMD-19T载体连接，连接产物转化感受态细胞，得重组克隆载体pMD-19T-CP1菌液。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述双酶切：EcoRⅠ、...

【技术特征摘要】

1.一种抗菌肽cecropin p1的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)使用cp1-f和cp1-r引物进行目的基因cecropin p1克隆；所述cp1-f核苷酸序列如seq id no.1所示；所述cp1-r核苷酸序列如seq id no.2所示。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)将cecropinp1与pmd-19t载体连接，连接产物转化感受态细胞，得重组克隆载体pmd-19t-cp1菌液。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述双酶切：ecorⅰ、hindⅲ双酶切；所述感受态细胞：bl21感受态细胞。

5.权利要求1～4任一所述方法在工...

【专利技术属性】
技术研发人员：林青，马丽，李璐瑶，缑静敏，杨帆，要慧中，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：