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一种生产γ-氨基丁酸的工程菌株及其应用制造技术

技术编号:41768779 阅读:38 留言:0更新日期:2024-06-21 21:46
本发明专利技术公开了一种生产γ‑氨基丁酸的工程菌株及其应用,属于酶工程技术领域。本发明专利技术的工程菌株可在3h内完成2moL·L‑1L‑Glu的转化,产量为197.0g·L‑1,与出发菌株相比产量提升了5.2倍。改造后工程菌株的生物量并未受到明显影响,且以1.5moL·L‑1L‑Glu为底物催化时,可以在4h内完成两批次的转化,具有工业应用的潜力。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种生产γ-氨基丁酸的工程菌株及其应用,属于酶工程。


技术介绍

1、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,gaba),又名4-氨基丁酸,是自然界中普遍存在的一种非蛋白质氨基酸,广泛分布在动植物和微生物中,且都发挥着重要作用。目前gaba的合成方法主要有化学合成法、植物富集法和生物合成法三种。由于化学合成法和植物富集法都具有产量低、操作复杂等缺点,因此生物转化法被广泛用于gaba的合成。生物转化法主要是l-谷氨酸在谷氨酸脱羧酶的作用下,依赖辅酶磷酸吡哆醛,脱去羧基形成一分子co2生成gaba。该方法具有可选择微生物种类多、转化率高、污染小、条件温和、分离提纯较为方便等优点。生物转化法的核心是谷氨酸脱羧酶(ec 2.4.1.13,glutamatedecarboxylase,gad),其活性受gad辅酶—plp以及底物谷氨酸浓度的影响,对温度敏感,在ph>6.0或ph<2.0时容易失去活性。如何利用分子生物学技术实现γ-氨基丁酸的高产受到了越来越多的关注。


技术实现思路</b>

本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种生产γ-氨基丁酸的工程菌株,其特征在于,所述工程菌株以重组大肠杆菌为宿主,将编码谷氨酸脱羧酶酶突变体基因导入宿主,所述重组大肠杆菌进行了以下改造:

2.根据权利要求1所述的一种生产γ-氨基丁酸的工程菌株,其特征在于,所述谷氨酸脱羧酶酶突变体基因序列如SEQ ID NO.2。

3.根据权利要求1所述的一种生产γ-氨基丁酸的工程菌株,其特征在于,所述谷氨酸脱羧酶酶突变体的表达载体为pET28a(+),转运蛋白GadCΔC41的表达载体为p15A。

4.根据权利要求1所述的一种生产γ-氨基丁酸的工程菌株,其特征在于,所述转运蛋白GadCΔC41的氨基...

【技术特征摘要】

1.一种生产γ-氨基丁酸的工程菌株,其特征在于,所述工程菌株以重组大肠杆菌为宿主,将编码谷氨酸脱羧酶酶突变体基因导入宿主,所述重组大肠杆菌进行了以下改造:

2.根据权利要求1所述的一种生产γ-氨基丁酸的工程菌株,其特征在于,所述谷氨酸脱羧酶酶突变体基因序列如seq id no.2。

3.根据权利要求1所述的一种生产γ-氨基丁酸的工程菌株,其特征在于,所述谷氨酸脱羧酶酶突变体的表达载体为pet28a(+),转运蛋白gadcδc41的表达载体为p15a。

4.根据权利要求1所述的一种生产γ-氨基丁酸的工程菌株,其特征在于,所述转运蛋白gadcδc41的氨基酸序列如seq id no.3。

5.根据权利要求1或4所述一种生产γ-氨基丁酸的工程菌株,其特征在于,编码所述转运蛋白gadcδc41的基因序列如seq id no...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘中美周哲敏李佶珊张一维崔文璟郭军玲
申请(专利权)人:江南大学
类型:发明
国别省市:

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