一种基于荧光PCR-HRM的非结核分枝杆菌分型检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种基于荧光PCR‑HRM的非结核分枝杆菌分型检测试剂盒。本发明专利技术设计获得了一组用于分型检测脓肿分枝杆菌、偶发分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、蟾蜍分枝杆菌、鸟分枝杆菌、胞内分枝杆菌、戈登分枝杆菌和龟分枝杆菌的PCR‑HRM引物和分子信标探针。在此基础上，本发明专利技术提供了一种检测特异性好、灵敏度高、重复性好的基于荧光PCR‑HRM的非结核分枝杆菌分型检测试剂盒，通过3管反应体系即可一次性对上述分枝杆菌进行分型检测，且检测步骤简单，耗费时间短，检测结果准确，可用于常见非结核分枝杆菌的分型检测，有助于区别诊断非结核分枝杆菌肺病和结核病，针对所感染的病原体进行及时、正确的治疗。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于病原菌的分型检测。更具体地，涉及一种基于荧光pcr-hrm的非结核分枝杆菌分型检测试剂盒。

技术介绍

1、非结核分枝杆菌(nontuberculous mycobacteria，ntm)是指分枝杆菌属内除结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis，mtb)复合群和麻风分枝杆菌(mycobacteriumleprae)以外的其他分枝杆菌。迄今为止，共发现190种ntm和14个亚种，其中大部分为腐物寄生菌，仅少部分对人体致病，引发非结核分枝杆菌病。

2、在我国的ntm流行病学调查中，ntm的分离率逐年上升，反映出我国非结核分枝杆菌病呈明显的上升态势。其中，非结核分枝杆菌病中的大多数为非结核分枝杆菌肺病(ntm-pd)，而非结核分枝杆菌肺病多是因感染鸟分枝杆菌(mycobacterium avium)、脓肿分枝杆菌(mycobacterium abscessus)、偶发分枝杆菌(mycobacterium fortuitum)、堪萨斯分枝杆菌(mycobacterium kansasii)、龟分枝杆菌(mycob本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种基于荧光PCR-HRM的非结核分枝杆菌分型检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有反应液A1、反应液A2和反应液A3；其中，所述反应液A1中含有用于检测脓肿分枝杆菌、偶发分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针；所述反应液A2中含有用于检测蟾蜍分枝杆菌、鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针；所述反应液A3中含有用于检测戈登分枝杆菌和龟分枝杆菌的PCR-HRM引物和分子信标探针；

2.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述检测脓肿分枝杆菌的探针的5’端标记有荧光基团FAM，3’端标记有猝灭基团BHQ1；检测偶发分枝杆菌的探针的...

【技术特征摘要】

1.一种基于荧光pcr-hrm的非结核分枝杆菌分型检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有反应液a1、反应液a2和反应液a3；其中，所述反应液a1中含有用于检测脓肿分枝杆菌、偶发分枝杆菌和堪萨斯分枝杆菌的pcr-hrm引物和分子信标探针；所述反应液a2中含有用于检测蟾蜍分枝杆菌、鸟分枝杆菌和胞内分枝杆菌的pcr-hrm引物和分子信标探针；所述反应液a3中含有用于检测戈登分枝杆菌和龟分枝杆菌的pcr-hrm引物和分子信标探针；

2.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述检测脓肿分枝杆菌的探针的5’端标记有荧光基团fam，3’端标记有猝灭基团bhq1；检测偶发分枝杆菌的探针的5’端标记有荧光基团texas red，3’端标记有猝灭基团bhq2；检测堪萨斯分枝杆菌的探针的5’端标记有荧光基团cy5，3’端标记有猝灭基团bhq2；检测蟾蜍分枝杆菌的探针的5’端标记有荧光基团fam，3’端标记有猝灭基团3'eclipse+3zip；检测鸟分枝杆菌的探针的5’端标记有荧光基团texasred，3’端标记有猝灭基团bhq2；检测胞内分枝杆菌的探针的5’端标记有荧光基团cy5，3’端标记有猝灭基团bhq2；检测戈登分枝杆菌的探针的5’端标记有荧光基团fam，3’端标记有猝灭基团3'eclipse+3zip；检测龟分枝杆菌的探针的5’端标记有荧光基团cy5，3’端标记有猝灭基团bhq2。

3.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述用于检测脓肿分枝杆菌和戈登分枝杆菌的分子信标探针中含有锁核酸修饰。

4.根据权利要求1所述试剂盒，其特征在于，所述反应液a1、反应液a2和反应液a3中还分别含有用于检测人源内标基因的pcr-hrm引物和...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒋析文，郭文丽，朱小亚，胡飞驰，陈媛，林泽桐，杨哲，陈晓峰，李婷，
申请(专利权)人：广州达安基因股份有限公司，
类型：发明
国别省市：