一种新型PCR冻干微球扩增试剂及其制备方法技术

技术编号:41761624 阅读:30 留言:0更新日期:2024-06-21 21:41
本发明专利技术公开了一种新型PCR冻干微球扩增试剂及其制备方法,属于分子生物学技术领域。该试剂包括冻干微球制备和缓冲盐干燥晶体制备两个过程。冻干微球依托大分子高聚物为核心,构建冻干赋形剂骨架分子组合。保证在液氮滴球和程序冻干升华过程中,维持滴球的骨架结构和保护酶活性的作用。将缓冲盐干燥晶体预先分装到八联管中,采用高温干燥制备成化学干粉,再将冻干微球组装到八联管中。该PCR冻干微球在室温下稳定保存1年不影响扩增活性;以解决PCR试剂不能常温保存与运输的问题。同时,通过两种不同干燥工艺,解决目前PCR冻干微球生产过程中普遍存在的,酶和镁离子预先混合而导致的灵敏度和特异性下降等突出问题。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学,具体涉及一种新型pcr冻干微球扩增试剂及其制备方法。


技术介绍

1、聚合酶链式反应((polymerase chain reaction,pcr))是一种用于放大扩增特定的核酸片段的分子生物学技术。1983年,pcr技术原理首先由美国mullis提出设想,1985年由其专利技术了pcr聚合酶链反应。1988年,saiki等发现了taq dna聚合酶,taq dna聚合酶能耐95℃高温而不失活,这使pcr过程中不必反复加入聚合酶,这个工作将pcr真正的推向了实用化阶段。

2、到目前为止,pcr扩增试剂和酶混合液主要还是以液体形态配置和保存为主,需要冷冻保存和冷冻运输,并且冻融次数也会影响pcr扩增试剂和酶混合液的稳定性。这样比较苛刻的保存条件,导致试剂运输和存储的成本较高,同时基层医疗单位往往不具备这样的保存条件,也影响了pcr检测方法学在基层医疗体系中的使用。

3、为解决上述问题,冻干技术就应运而生,冻干技术是预先通过微球滴球仪器将pcr试剂滴落到液氮中成球,或者直接分装到pcr反应管中,在-80℃冰箱中预本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种新型PCR冻干微球扩增试剂,其特征在于,所述新型PCR冻干微球扩增试剂是由1份固态PCR冻干微球加入到1份固态PCR缓冲盐干燥晶体中得到;

2.根据权利要求1所述的一种新型PCR冻干微球扩增试剂,其特征在于,所述PCR冻干微球的制备方法为:

3. 根据权利要求1所述的一种新型PCR冻干微球扩增试剂,其特征在于,所述PCR缓冲盐干燥晶体是由Tris.HCl 10~50mM、KCl 10~50mM、NH4Cl 10~50mM,MgCl2 2~5mM和海藻糖0.05~0.2M混合而成;

4. 根据权利要求3所述的一种新型PCR冻干微球扩增试剂,其特征...

【技术特征摘要】

1.一种新型pcr冻干微球扩增试剂,其特征在于,所述新型pcr冻干微球扩增试剂是由1份固态pcr冻干微球加入到1份固态pcr缓冲盐干燥晶体中得到;

2.根据权利要求1所述的一种新型pcr冻干微球扩增试剂,其特征在于,所述pcr冻干微球的制备方法为:

3. 根据权利要求1所述的一种新型pcr冻干微球扩增试剂,其特征在于,所述pcr缓冲盐干燥晶体是由tris.hcl 10~50mm、kcl 10~50mm、nh4cl 10~50mm,mgcl2 2~5mm和海藻糖...

【专利技术属性】
技术研发人员:李望丰唐云轩郎小亮李珊黄盈赵丽蓉钟剑高思汪珊
申请(专利权)人:成都百思赛弗生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:

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