一种用于活化CO2的甲酸脱氢酶突变体制造技术

本发明专利技术涉及一种用于活化CO2的甲酸脱氢酶突变体，其氨基酸序列由SEQ ID NO.1所示序列突变而来，在如下的一组或多组氨基酸残基发生突变：158位、235位、270位、274位。本发明专利技术提供了所述甲酸脱氢酶突变体的基因和蛋白序列、构建的表达载体和基因工程菌株以及在CO2活化中的应用。通过构建表达载体和基因工程菌，诱导表达甲酸脱氢酶突变体，以及体外纯酶催化CO2产甲酸。本发明专利技术开发的甲酸脱氢酶突变体具有优良的抗氧化性和催化活性，相对酶活最高为原始酶的743％，有利于CO2高效活化。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物，具体涉及一种用于活化co2的甲酸脱氢酶突变体，包含该甲酸脱氢酶突变体氨基酸序列、核苷酸序列及其构建的表达载体和重组工程菌株，以及所述甲酸脱氢酶突变体、表达载体和重组工程菌株在活化co2中的应用。

技术介绍

1、生物催化将co2转化为甲醇具有实现co2活化和经济性转化的潜力，在这一反应过程中，甲酸脱氢酶fdh发挥了核心作用，这一过程的瓶颈问题是生物酶制剂的催化活性和稳定性。在co2转化为甲醇的多酶级联反应中，利用来源于博伊丁假丝酵母的商品甲酸脱氢酶cbfdh催化甲酸→co2的速率(km＝3.3mm，vmax＝0.02mm/min)远高于co2→甲酸的速率(km＝30-50mm，vmax＝0.002mm/min)。因此，co2定向高效转化为甲酸和其他产物存在挑战性。

2、目前，为改善甲酸脱氢酶fdh活性和稳定性，通过蛋白工程改造挖掘高效甲酸脱氢酶已成为提高co2活化效率的重要途径。kim等通过在thiobacillus sp.knk65ma表达甲酸脱氢酶基因，获得比candida boidinii商品甲酸脱氢酶高5.8倍的甲酸产本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于活化CO2的甲酸脱氢酶突变体，其特征在于，所述甲酸脱氢酶突变体具有(I)或(II)所示的氨基酸序列中的任意一个：

2.根据权利要求1所述的甲酸脱氢酶突变体，其特征在于，所述甲酸脱氢酶突变体的氨基酸序列选自如下的一组或多组位点，突变为以下所示氨基酸残基：在159位为Ile，和/或者在235位为Gly，和/或者在270为Leu，和/或者在274位为Met。

3.一种编码权利要求1或2所述的甲酸脱氢酶突变体的核苷酸序列，优选地，如编码SEQID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4和SEQ ID NO.5所示的甲酸脱氢酶突变体的核苷酸序列...

【技术特征摘要】

1.一种用于活化co2的甲酸脱氢酶突变体，其特征在于，所述甲酸脱氢酶突变体具有(i)或(ii)所示的氨基酸序列中的任意一个：

2.根据权利要求1所述的甲酸脱氢酶突变体，其特征在于，所述甲酸脱氢酶突变体的氨基酸序列选自如下的一组或多组位点，突变为以下所示氨基酸残基：在159位为ile，和/或者在235位为gly，和/或者在270为leu，和/或者在274位为met。

3.一种编码权利要求1或2所述的甲酸脱氢酶突变体的核苷酸序列，优选地，如编码seqid no.2、seq id no.3、seq id no.4和seq id no.5所示的甲酸脱氢酶突变体的核苷酸序列；更优选地，如seq id no.6、seq id no.7、seq id no.8和seq id no.9所示的核苷酸序列。

4.一种用于异源表达甲酸脱氢酶突变体的基因表达载体，其特征在于，所述基因表达载体包括：编码如权利要求1或2所述的甲酸脱氢酶突变体的氨基...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄玉红，薛雅鞠，纪秀玲，张锁江，
申请(专利权)人：中国科学院过程工程研究所，
类型：发明
国别省市：