一种柔嫩艾美耳球虫蛋白激酶基因的克隆、表达及应用制造技术

技术编号:4173884 阅读:302 留言:0更新日期:2012-04-11 18:40
本发明专利技术公开了柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)的一种新蛋白激酶(EtPK)基因,克隆号:ZB1-A02,全长1684bp,含有一个1527bp的ORF,编码508个氨基酸(Genbank登录号EF552216)。本发明专利技术将该基因连接到原核表达载体pGEX-4T-2,构建了原核表达重组质粒pGEX-4T-EtPK,并在大肠杆菌系统中进行了表达,表达的重组蛋白以包涵体形式存在。通过纯化重组蛋白4T-EtPK进行SDS-PAGE,再转移至PVDF膜上,用E.tenella卵囊口服免疫鸡的抗血清作为-抗,羊抗鸡IgG作为二抗进行Western-blot分析,表明它有一定的抗原性,能用于研制抗鸡球虫病药物和制备抗鸡球虫病疫苗。

Cloning, expression and application of a protein kinase gene of Eimeria tenella

The present invention discloses Eimeria tenella (Eimeria tenella) is a new protein kinase (EtPK) gene, clone: ZB1 - A02, the length of 1684bp, contains a 1527bp ORF encoding 508 amino acids (Genbank accession No. EF552216). In the invention, the gene was cloned into the prokaryotic expression vector pGEX - 4T - 2, prokaryotic expression plasmid pGEX - 4T - EtPK, and expressed in Escherichia coli, the recombinant protein existed in the form of inclusion body. The purified recombinant protein 4T - EtPK SDS - PAGE, and then transferred to PVDF membrane, using antiserum E.tenella oocysts as anti - oral immunization of chicken, Goat anti chicken IgG as the two antibody in Western blot analysis show that it has certain antigenicity and can be used for the development of anti coccidiosis medicine and preparation of chicken coccidiosis vaccine.

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种柔嫩艾美耳球虫蛋白激酶基因,其特征在于所述该柔嫩艾美耳球虫蛋白激酶基因具有下列序列: AGAACGAGTTGTTGCCAATGGAGAGTCCACCAGTAAGCTTTCCCGAGGCAGTGCCTGGTGCGTACTCCGAAA GTGCTAAG GCCCCTATAGAGAAGCCAAAGAACAAAGTAACAAACGAAGCAGAGGGAGATGACAGCAATGCTTTCTTCCTAAACGCGCG GCCTGGCCGACGGCAGCAGCGGCA AGTTGGCTCGCGCGTTGCTCTGGGTTTTGGCCTGATGTTTTCCGGCCTTGTTGCAG CTATCCTATCTAGCCTGCTGTTGCGGCAGCTCCAAGAACCTCCCCGAGTCAACCTGTCCA ACGCATGGCAGCAGCTGGAG TCGCAGGAGGCGACGTGGCTGCTTCCTACTGTAGACCAGCAAGAAGTAGCGGCTCACCCTCGCTTGGCCATGGGTAAATG GTTGCTTGCAGA TGCAGTTAACTTTAGGCAAGCAGCTGACATGCAGTGGCGGGGCCCGCTAGGCCGGGAGTTAATGCTCG TTCTTGCTGAGCACCTCACAAAGGGAAGGTCAAGCAGTGTGATAGGCG CCACGATCAACTTGGTAAACACGCAGCAGTTA GGTTATCCTGAAGTCGACCCAACCCCACACCCTTTTACCATAAAGCGCTATCTATATGAAGACAATGAGTCTGTTACCTT  GGAGATAGTAGATCAAGCAACGAATTTGCCTTATGCCATGCGGCTGCGCACCGTGCGACCTCGCGTCCACGGTGAGGACG TGCTGCCAGAGACAGCGGAGGAACTGAATCAGCGGT CCTTGGTGGGGACCACTAGCTCTATGCTTCAgGCAATTGGGGAG TCGGATCTGCGAGACGCAGCAGAGGAGAGGGGCTTGGCTGTTGCATCTGCCGTTGCTACGATCCAAGGCGTG CCCACGGT CATGCGCGGCAGTACTGTTTACCTGGTGGCTGACGTTGAGCTGGGTGAGGTTTA...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:韩红玉黄兵林矫矫赵其平董辉姜连连颜彦姚倩樊玉娟李玉剑
申请(专利权)人:中国农业科学院上海兽医研究所
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]

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