【技术实现步骤摘要】
本申请属于疾病的诊断，更具体地说，是涉及一种糖类抗原ca125的表达方法和纯化方法。
技术介绍
1、糖类抗原ca125由黏蛋白16(mucin 16，muc16)基因编码，是一种大型跨膜糖蛋白，包含约14000个氨基酸，分子量约3～5mda，结构复杂，存在跨膜区和大量o-连接糖基化和n-连接的糖基化位点。糖类抗原ca125作为卵巢癌的特异性诊断标志物，应用于卵巢癌的早期筛查、病情检测和疗效评估。
2、目前，糖类抗原ca125主要通过体外重组表达和经人体组织/体液提取获得。重组糖类抗原ca125仅表达部分结构，且糖基化修饰存在较大差别，并不能完全代表完整的糖类抗原ca125，而天然提取的糖类抗原ca125来源受限，纯化过程中蛋白易发生并行和降解，导致蛋白结构不均一、批间差大的问题。有文献报道通过培养肿瘤细胞，如ovcar-3细胞，可获得具有天然构象的糖类抗原ca125的细胞培养上清，但肿瘤细胞培养上清中抗原浓度低，需经特异性抗体亲和纯化获得抗原，操作过程复杂、成本高，不适于大量制备。
技术实现思路<
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【技术保护点】
1.一种糖类抗原CA125的表达方法，其特征在于，所述表达方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的糖类抗原CA125的表达方法，其特征在于，所述CA125补料中含有如下成分：CA125培养基，1.5～2.5g/L胰蛋白胨，1.5～2.5g/L酵母提取物，0.3～0.6g/L碳酸钠，0.8～1.2g/L碳酸氢钠，3～5g/L半乳糖，3～6g/L果糖，1.5～3.0g/L葡萄糖，2wt％MEM NEAA。
3.根据权利要求2所述的糖类抗原CA125的表达方法，其特征在于，所述CA125补料中含有如下成分：CA125培养基，2g/L胰蛋白胨，2g...
【技术特征摘要】
1.一种糖类抗原ca125的表达方法，其特征在于，所述表达方法包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的糖类抗原ca125的表达方法，其特征在于，所述ca125补料中含有如下成分：ca125培养基，1.5～2.5g/l胰蛋白胨，1.5～2.5g/l酵母提取物，0.3～0.6g/l碳酸钠，0.8～1.2g/l碳酸氢钠，3～5g/l半乳糖，3～6g/l果糖，1.5～3.0g/l葡萄糖，2wt％mem neaa。
3.根据权利要求2所述的糖类抗原ca125的表达方法，其特征在于，所述ca125补料中含有如下成分：ca125培养基，2g/l胰蛋白胨，2g/l酵母提取物，0.5g/l碳酸钠，1.0g/l碳酸氢钠，2g/l半乳糖，4g/l果糖，2g/l葡萄糖，2wt％mem neaa。
4.根据权利要求1所述的糖类抗原ca125的表达方法，其特征在于，所述ca125培养基包括以下组分：rpmi-1640培养基，5wt％～10wt％fbs，1wt％青霉素-链霉素(100×)，10μg/ml胰岛素，0.2～0.6g/l葡萄糖。
...【专利技术属性】
技术研发人员：刘欢欢，柳乐，王健，周献军，黄敬双，鲜静，张伟，曾红，
申请(专利权)人：四川携光生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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