一种突触囊泡的提取方法技术

本发明专利技术提供一种突触囊泡的提取方法，包括如下步骤：步骤1)：用均质缓冲液匀浆鼠脑；步骤2)：第一离心，收集第一上清液；步骤3)：第二离心，收集第二上清液和沉淀；步骤4)：向沉淀中加入ddH<subgt;2</subgt;O，匀浆；步骤5)：进行第三离心，收集第三上清液，得到上清液；步骤6)：收集第二和第三上清液进行第四离心，收集第四上清液；步骤7)：用Optiprep密度梯度离心法对第四上清液进行纯化；步骤8)：选取囊泡含量最高的一层，过柱洗脱。通过该提取方法，可以高效地从离体哺乳动物脑中提取突触囊泡样品，该突触囊泡在蛋白中的含量高，在25％以上，甚至30％以上，突触囊泡纯度高。本发明专利技术还提供了上述提取方法提取的突触囊泡。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术专利涉及生物提取，尤其是指一种哺乳动物突触囊泡的提取方法。

技术介绍

1、突触囊泡(synaptic vesicles，svs)是神经元突触末梢的小囊泡，用来储存神经递质，是神经递质释放的重要细胞器。通过膜融合和分泌作用，突触囊泡将储存的神经递质释放到突触间隙中，与突触后末梢的受体结合，从而触发神经信号的传递。突触囊泡储存和保护多种神经递质，如乙酰胆碱、谷氨酸和gaba等，并在需要时释放到突触间隙中。通过调控突触囊泡的释放速率和数量，神经元可以调节神经信号的强度和频率。此外，突触囊泡的释放还参与突触可塑性的调节，这是神经系统中神经元连接强度和功能可调节的能力，包括长时程增强和长时程抑制等。

2、突触囊泡在神经系统中扮演着重要的角色，它是神经元末梢的囊状结构，专门负责储存和释放神经递质。突触囊泡对于神经信号的传递至关重要。与突触囊泡相关的疾病有以下几种情况：首先是神经递质失调疾病，突触囊泡负责储存多巴胺、谷氨酸等神经递质，而神经递质的失调与多种相关疾病有关，如帕金森病和阿尔茨海默病等。其次，若突触囊泡的运输受阻或受损，可能会导致神经递质本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种突触囊泡的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的突触囊泡的提取方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述均质缓冲液包括320mM蔗糖、4mM HEPES，所述均质缓冲液pH 7.4，所述均质缓冲液中还包括蛋白酶抑制剂，所述蛋白酶抑制剂包括PMSF和pepstatin A。

3.根据权利要求1所述的突触囊泡的提取方法，其特征在于，所述步骤2)中，第一离心的离心力为900-1100g，离心时间为8-12min。

4.根据权利要求1所述的突触囊泡的提取方法，其特征在于，所述步骤3)中，第二离心的离心力为14000-16000g，离...

【技术特征摘要】

1.一种突触囊泡的提取方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的突触囊泡的提取方法，其特征在于，所述步骤1)中，所述均质缓冲液包括320mm蔗糖、4mm hepes，所述均质缓冲液ph 7.4，所述均质缓冲液中还包括蛋白酶抑制剂，所述蛋白酶抑制剂包括pmsf和pepstatin a。

3.根据权利要求1所述的突触囊泡的提取方法，其特征在于，所述步骤2)中，第一离心的离心力为900-1100g，离心时间为8-12min。

4.根据权利要求1所述的突触囊泡的提取方法，其特征在于，所述步骤3)中，第二离心的离心力为14000-16000g，离心时间为12-18min。

5.根据权利要求1所述的突触囊泡的提取方法，其特征在于，所述步骤5)中，第三离心的离心力为16000-18000g，离心时间为12-18min；所述步骤5)中进一步包括将所述第三上清液与所述第二上清液合并，得到所述上清液。...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴成君，赵璇竹，吴振永，郭鹏，盛子真，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：