基因工程改造的黑曲霉菌株制造技术

本发明专利技术涉及基因工程改造的黑曲霉菌株。还涉及其生产方法。本发明专利技术还涉及由所述基因工程改造的黑曲霉菌株得到的重组菌株和生物催化剂。另外涉及用本发明专利技术的菌株生产蛋白的方法。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物领域，更具体涉及基因工程改造的黑曲霉菌株及其制备方法，以及用该菌株生产外源蛋白的方法。

技术介绍

1、黑曲霉 ( aspergillus niger ) 属于子囊菌亚门、丛梗孢科、曲霉属真菌的常见种，也是自然界中最为常见的丝状真菌，在植物性产品、粮食和土壤中广泛分布。其分生孢子头为黑褐色放射状，球状顶囊，分生孢子梗长短不一，菌丝发达，多分支。黑曲霉能够通过降解自然界中的有机质并吸收其中的营养物质而快速生长，黑曲霉被美国食品与药品管理局（fda）列为gras( generally regards as safe) 级别并得到了世界卫生组织的认可，是丝状真菌中应用非常普遍的种属。由于黑曲霉能够产生酶制剂和有机酸，因而成为重要的工业生产菌株。

2、黑曲霉具有高效的蛋白分泌表达能力。黑曲霉表达外源蛋白具有表达量大、胞外分泌率高、蛋白质分子折叠和修饰系统接近高等真核细胞等特点，且表达的外源蛋白具有天然活性。另外，黑曲霉还能进行各种翻译后加工，如糖基化修饰蛋白酶切割和二硫键的形成等。因而本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.基因工程改造的黑曲霉菌株，其与天然黑曲霉菌株相比，外源蛋白，例如酶，特别是溶血磷脂酶生产能力提高至1.5倍以上，例如1.9-3.0倍，特别是2.2-2.7倍。

2.权利要求1的基因工程改造的黑曲霉菌株，其与天然黑曲霉菌株相比，Rpn13基因失活，优选的，所述Rpn13基因失活是通过敲除所述Rpn13基因或对所述Rpn13基因进行RNA干扰而实现的。

3.权利要求1或2的基因工程改造的黑曲霉菌株，其中所述天然黑曲霉菌株选自黑曲霉CICC2243、黑曲霉CICC2190 和黑曲霉 CICC2212。

4.生产权利要求1-3的任一项的黑曲霉菌株的方法，包...

【技术特征摘要】

1.基因工程改造的黑曲霉菌株，其与天然黑曲霉菌株相比，外源蛋白，例如酶，特别是溶血磷脂酶生产能力提高至1.5倍以上，例如1.9-3.0倍，特别是2.2-2.7倍。

2.权利要求1的基因工程改造的黑曲霉菌株，其与天然黑曲霉菌株相比，rpn13基因失活，优选的，所述rpn13基因失活是通过敲除所述rpn13基因或对所述rpn13基因进行rna干扰而实现的。

3.权利要求1或2的基因工程改造的黑曲霉菌株，其中所述天然黑曲霉菌株选自黑曲霉cicc2243、黑曲霉cicc2190 和黑曲霉 cicc2212。

4.生产权利要求1-3的任一项的黑曲霉菌株的方法，包括使天然黑曲霉菌株的rpn13基因失活，优选的，所述rpn13基因失活是通过敲除rpn13基因或对rpn13基因进行rna干扰而实现的。

5.权利要求4的方法，其中所述天然黑曲霉菌株选自黑曲霉cicc2243、黑曲霉cicc2190和黑曲霉 cicc...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴伟，孙佳楠，戴小军，牛其文，
申请(专利权)人：丰益上海生物技术研发中心有限公司，
类型：发明
国别省市：