本发明专利技术提供一种T细胞制备方法，包括：用含有NAD<supgt;+</supgt;或其前体的培养基处理T细胞的步骤，培养基还可以含有PQQ和DHQ，其中，所述T细胞还含有嵌合抗原受体的编码序列和/或能够表达嵌合抗原受体。培养基中加入上述小分子，可以提高T细胞增殖、CAR阳性率和抑制T细胞衰老。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及免疫细胞治疗，更具体地涉及一种car-t细胞的制备方法。
技术介绍
1、随着对肿瘤认识的不断深入，肿瘤治疗技术取得了很大的进步，显著改善了整体肿瘤治疗效果，但多或少存在副作用大、易产生耐药性等问题。目前，肿瘤生物免疫治疗已成为一种新的治疗手段。
2、免疫细胞治疗包括car-t免疫疗法、nk免疫疗法、dc免疫疗法、til免疫疗法等。免疫细胞治疗需要进行细胞增殖，细胞增殖一般包括细胞复苏、细胞活化、基因编辑、传代培养等。然而肿瘤患者免疫细胞状态较差，而且一般会经过冻存，进一步降低细胞活性，影响免疫细胞的扩增倍数。
3、nad+(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，简称为辅酶ⅰ)是体内很多脱氢酶的辅酶，连接三羧酸循环和呼吸链，其功能是将代谢过程中脱下来的氢传递给黄素蛋白。nad+能够报证细胞能量供给，促进细胞再生。cn112472710a公开了补充nad+前体物质能增强多种肿瘤对免疫检查点抑制剂的敏感性。
4、nad+对免疫细胞培养的影响，特别是肿瘤患者免疫细胞培养的影响，目前还未有文献报道。
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【技术保护点】
1.一种嵌合抗原受体T细胞的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对象为健康人或肿瘤患者。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对象为肿瘤患者。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，激活剂选自以下的一种或多种：CD3抗体、CD28抗体、4-1BB抗体、4-1BBL抗原；
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述步骤(3)中，所述核酸构建体为pC23S-1444质粒，pC23S-1444质粒的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。
【技术特征摘要】
1.一种嵌合抗原受体t细胞的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对象为健康人或肿瘤患者。
3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述对象为肿瘤患者。
4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，...
【专利技术属性】
技术研发人员：张欣蕊，孙艳，钱其军，
申请(专利权)人：北京细胞治疗集团有限公司，
类型：发明
国别省市：
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