一种MMLV逆转录酶储存试剂及其应用制造技术

本发明专利技术涉及分子生物学技术领域，具体涉及一种MMLV逆转录酶储存试剂。该储存试剂由二硫苏糖醇、NaCl、EDTA、IGEPAL CA630、甘油和Tris‑HCl制备而成且pH为6～8.5，成分简单，且具有极高的储存稳定性和极高的冻融稳定性，其中在最佳的条件下，可以保证MMLV酶在37℃储存20天，性能依旧稳定，干冰反复冻融50次，酶活力依旧变化不大。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及分子生物学，具体涉及一种mmlv逆转录酶储存试剂及其应用。

技术介绍

1、mmlv是目前体外转录技术应用最为广泛的逆转录酶之一，其中影响逆转录酶效果的一个重要因素是rna能否形成二级结构，当rna分子具有足够的互补性以形成双链rna时，可形成此类二级结构，通常的方法为提高其rna分子溶液温度来减少rna二级结构的生成，这样就会影响cdna的生成。为了降低此类因素的影响，通常是提高转录反应温度，这就对逆转录酶的性能要求很高，因此，需要开发一种方法提高逆转录酶的耐高温性，稳定其酶活。

2、另外，现有的逆转录酶通常以溶液的形式在-20至-80℃的温度下存储且需要避免反复冻融。另外，为了增加其稳定性，通常在储存液中添加硫酸镁、氯化钾、海藻糖、多元醇(如山梨糖醇、木糖醇)等，使得其成分较为复杂且耐高温性能一般，37℃加速稳定性实验下15天时，酶活就会显著下降。

技术实现思路

1、针对现有技术所存在的技术问题，本专利技术提供一种mmlv逆转录酶储存试剂，该试剂成分简单，且具有极高的储存稳定性和冻本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.根据权利要求1所述的MMLV逆转录酶储存试剂，其特征在于，所述储存试剂由二硫苏糖醇、NaCl、EDTA、IGEPAL CA630、甘油和Tris-HCl制备而成，储存液pH值为6～8.5。

2.根据权利要求1所述的MMLV逆转录酶储存试剂，其特征在于，所述储存试剂由0.5mM～20mM二硫苏糖醇、0.1mM～5M NaCl、0.1mM～50mMEDTA 、体积比0.01％～20％的IGEPALCA630、体积比0～50％的甘油和0.1mM～20M的Tris-HCl制备而成，储存液pH值为6～8.5。

3.根据权利要求1所述的MMLV逆转录酶储存试剂，其特征在于...

【技术特征摘要】

1.根据权利要求1所述的mmlv逆转录酶储存试剂，其特征在于，所述储存试剂由二硫苏糖醇、nacl、edta、igepal ca630、甘油和tris-hcl制备而成，储存液ph值为6～8.5。

2.根据权利要求1所述的mmlv逆转录酶储存试剂，其特征在于，所述储存试剂由0.5mm～20mm二硫苏糖醇、0.1mm～5m nacl、0.1mm～50mmedta 、体积比0.01％～20％的igepalca630、体积比0～50％的甘油和0.1mm～20m的tris-hcl制备而成，储存液ph值为6～8.5。

3.根据权利要求1所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯延叶，朱哲，张书祖，赖煦卉，
申请(专利权)人：上海英基生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：