一种３’８”－双芹菜素型双黄酮类化合物的制备方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种３’８”－双芹菜素型双黄酮类化合物及其制备方法与应用，该化合物的制备方法为：用乙醇热回流浸提红豆杉枝叶粗粉得到总浸膏，经反相正相柱层析和凝胶、重结晶分离得到３’８”－双方芹菜素型双黄酮类化合物。本发明专利技术３’８”－双芹菜素型双黄酮类化合物用于制备抑制老年斑的形成或者治疗阿尔茨海默病的药物，可以有效减少β淀粉样蛋白的产生，还可以使聚集状态的β淀粉样蛋白的解聚，对细胞无毒性，浓度高时还可以促进细胞增长；本发明专利技术制备方法工艺简单，收得率高。

Preparation method and application of 3 ', 8' - Double apigenin type flavone compound

The invention discloses a 3 '8 \double type apigenin biflavone compound and preparation method and application thereof, the method for preparing the compound with hot alcohol reflux extraction to obtain the total extract of Taxus crude powder by reversed phase column chromatography, and gel and recrystallization to separate 3' 8 the two sides\ - type double flavonoids apigenin. The 3 '8 \double double apigenin flavone compounds for the preparation of inhibition of plaque formation or the treatment of Alzheimer's disease drugs, can effectively reduce beta amyloid production, but also can make the aggregation of amyloid beta cells of depolymerization, non-toxic, high concentration can also promote cell growth; the preparation method of the invention has the advantages of simple process, high yield.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及双黄酮类化合物的应用领域，尤其涉及一种3'8-双芹菜素型双黄酮 类化合物的制备方法及应用。
技术介绍
老年性痴呆即阿尔茨海默病(Alzheimer disease)，是一种原发性脑退行性疾病， 是老年人的多发病和常见病，临床上以进行性的记忆和认知功能障碍为特征。老年性痴 呆是由多种原因引起，涉及多种病理机制和多种病理表现的神经退行性疾病，其最主要病 理表现是在大脑皮层和海马出现由淀粉样蛋白(13-amyloid protein)聚集形成的老年斑 (senile plague, SP)，以及神经纤维缠结(neurofibrillary tangle, NFT)和神经细胞缺 失。研究普遍认为，老年性痴呆患者脑中13淀粉样蛋白的异常增加与沉积是启动神经元 退行性病变的核心事件。1992年，Hardy等人提出了淀粉样蛋白的级联假说，认为脑内异 常增多的13淀粉样蛋白和其他危险因素共同作用，启动了阿尔茨海默病的发病过程，并在 其发生、发展中起关键作用。P淀粉样蛋白是由膜内淀粉样前体蛋白(amyloidprecursor protein, APP)的异常水解和错误折叠所致。P淀粉样蛋白从可溶状态到不溶状态的转变 是阿尔茨海默病发病机制中的关键环节。P淀粉样蛋白在大脑中的过量生成、聚集和沉积 可引起神经元钙稳态失衡，自由基大量产生，激活炎性因子，引起脑组织局部炎症等一系列 反应，继而出现中枢整合功能异常。进一步研究表明，胆碱能系统的紊乱也源于P淀粉样 蛋白的过度生成和聚集。国际上普遍认同，抑制P淀粉样蛋白分泌是预防及治疗老年性痴 呆的有效治疗手段。 目前已有的被美国FDA批准用于治疗老年痴呆的药物均为乙酰胆碱酶抑制剂，主 要包括他克林、以安理申、艾斯能、石杉碱甲。这些药物均属对症治疗药物，在显著治疗或缓 解老年性痴呆的发展方面也未见突破性进展。越来越多的研究结果表明，老年性痴呆与脑 内13淀粉样蛋白水平密切相关，因此从天然中草药中筛选治疗老年痴呆的中药提取物或 有效成分是近年来国际老年性痴呆研究领域中的热点。 双黄酮是由二分子黄酮衍生物聚合而成的二聚物，常见的是由二分子芹菜素(或其甲醚衍生物)构成。聚合方式有三种类型 (1)3口，8-双芹菜素型，如银杏叶中的银杏素等； (2)8，8〃 -双芹菜素型，如柏黄酮； (3)双苯醚型如扁柏黄酮。 目前，尚未有将3' 8-双芹菜素型双黄酮类化合物在抑制|3淀粉样蛋白中的效 果研究。
技术实现思路
本专利技术目的在于根据现有技术的不足，提供一种来源于红豆杉的3' 8_双芹菜素 型双黄酮类化合物的制备方法。 本专利技术另一个目的在于提供上述3' 8-双芹菜素型双黄酮类化合物的应用。 本专利技术上述目的通过以下技术方案予以实现 本专利技术3' 8_双芹菜素型双黄酮类化合物的结构式如下通式所示 其中，RrR6为氢、羟基、C广Q。烷氧基团、CQ。酰氧基团、异戊烯基或-0(^20，但不 包括R广Re同时为氢或同时为羟基的结构。 本专利技术3'8-双芹菜素型双黄酮类化合物的制备方法为用乙醇热回流浸提红豆 杉枝叶粗粉得到总浸膏，经反相正相柱层析和凝胶、重结晶分离得到3' 8-双芹菜素型双 黄酮类化合物。上述制备方法优选如下步骤 (1)取云南红豆杉枝叶风干，粉碎，过80目筛，用8倍样品量体积95%乙醇加热回 流提取3次，每次1小时，过滤，合并滤液，减压浓縮，回收乙醇得浸膏或浓縮液； (2)浸膏或浓縮液中加入丙酮，按1 : 1的质量比拌硅胶(80 100目)，晾干； (3)以8倍样品质量的硅胶装柱，石油醚作洗脱剂，先用3个柱体积石油醚洗脱，除 去色素等脂溶性物质，然后用5个柱体积石油醚丙酮洗脱； (4)收集洗脱液，减压浓縮得到粗提物。粗提物部分继续过硅胶柱，用体积比分别为7 : 3、6 : 4、5 : 5的石油醚乙酸乙酯洗脱剂依次洗脱，收集洗脱液，减压回收溶剂，薄层层析检测，合并相同流份，共得到5个流份，将流份中含有黄色沉淀的流份5用甲醇加热溶解，反复重结晶得到3' 8-双芹菜素型双黄酮类化合物。 其中，所述步骤(3)中石油醚与丙酮的体积比优选55 : 45。 本专利技术3' 8-双芹菜素型双黄酮类化合物可用于制备抑制淀粉样蛋白的生成或 聚集的药物。该药物除了含有本专利技术3'8-双芹菜素型双黄酮类化合物外，还可含有药学 上可以接受的载体。 本专利技术3' 8-双芹菜素型双黄酮类化合物还可用于制备治疗或预防阿尔茨海默 病的药物。该药物除了含有本专利技术3'8-双芹菜素型双黄酮类化合物外，还可含有药学上 可以接受的载体。 上述药学上可接受的载体是指药学领域常规的药物载体，包括但不限于稀释剂、 赋型剂(如水等)；填充剂(如淀粉、蔗糖等)；黏合剂(如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚 乙烯吡咯烷酮)；湿润剂(如甘油)；崩解剂(如琼脂、碳酸钙或碳酸氢钠)；吸收促进剂(如 季铵化合物)；表面活性剂(如十六烷醇)；吸收载体(如高岭土和皂黏土)；润滑剂(如滑 石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁或聚乙二醇等)外还可以加入其它辅剂如香味剂、甜味剂等。 本专利技术化合物可以制备成各种剂型的药物，制备方法为药学领域的常规方法。例 如，使活性成分与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。本专利技术的化合物可以组 合物的形式通过口服、鼻吸入、直肠或肠胃外给药的方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、粉剂、粒剂、胶囊等，制成液体制剂如水或油悬 浮剂或其它液体制剂如糖浆等。用于肠胃外给药时候，可将其制成注射用的溶液、水或油性 悬浮剂等。优选的形式是片剂、胶囊或注射剂。 本专利技术化合物用于制备药物时，优选含有重量比为0. 1% -99. 5%的化合物活性 成分，最优选含有重量比为0. 5% _95%的化合物活性成分。 本专利技术化合物的施用量可根据用药途径、患者的年龄、体重、所治疗的疾病的类型 和严重程度等变化，其日计量可以是0.01-10mg/kg体重，优选0. l-5mg/kg体重。可以一次 或多次使用。 与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果 本专利技术3' 8_双芹菜素型双黄酮类化合物用于制备抑制老年斑的形成或者治疗 阿尔茨海默病的药物，可以有效减少13淀粉样蛋白的产生，还可以使聚集状态的淀粉样蛋 白的解聚，预防或减少老年斑；本专利技术3'8-双芹菜素型双黄酮类化合物来源于红豆杉，制 备工艺简单易行，收得率高。附图说明 图1为3' 8_双芹菜素型双黄酮类化合物对|3淀粉样蛋白聚集影响示意图； 图2为3' 8-双芹菜素型双黄酮类化合物对13淀粉样蛋白解聚作用示意图； 图3为3'8_双芹菜素型双黄酮类化合物对SH-SY5Y细胞作用示意图，其中，1为 金松双黄酮与P淀粉样蛋白混合组，2为金松双黄酮组。具体实施例方式以下结合实施例来进一步解释本专利技术，但实施例并不对本专利技术做任何形式的限 定。 实施例1 从人工栽培云南红豆杉中制备金松双黄酮的方法 人工栽培云南红豆杉枝叶，风干，粉碎80目，用8倍体积量95%乙醇加热回流提取 3次，每次1小时，过滤，合并滤液，减压浓縮，回收乙醇得浸膏或浓縮液。浸膏以丙酮溶解， 按1 : 1的质量比拌硅胶(80-100目)，晾干。称取8倍样品质量硅胶(200-300目)，以石 油醚作为洗脱剂，湿本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种３’８”－双芹菜素型双黄酮类化合物的制备方法，其特征在于所述３’８”－双芹菜素型双黄酮类化合物是从红豆杉枝叶中提取得到的。

【技术特征摘要】
一种3’8”-双芹菜素型双黄酮类化合物的制备方法，其特征在于所述3’8”-双芹菜素型双黄酮类化合物是从红豆杉枝叶中提取得到的。2. 根据权利要求1所述的3'8-双芹菜素型双黄酮类化合物的制备方法，其特征在于 所述制备方法为用乙醇热回流浸提红豆杉枝叶粗粉得到总浸膏，经反相正相柱层析和凝 胶、重结晶分离得到3' 8-双芹菜素型双黄酮类化合物。3. 根据权利要求2所述的3'8-双芹菜素型双黄酮类化合物的制备方法，其特征在于 所述制备方法为(1) 取红豆杉枝叶风干，粉碎，过80目筛，用8倍样品量体积95%乙醇加热回流提取3 次，每次1小时，过滤，合并滤液，减压浓縮，回收乙醇得浸膏或浓縮液；(2) 浸膏或浓縮液中加入丙酮，按1 : 1的质量比拌硅胶(80 100目)，晾干；(3) 以8倍样品质量的硅胶装柱，石油醚作洗脱剂，先用3个柱体积石油醚洗脱，除去色 素等脂溶性物质，然后用5个柱体积石油醚丙酮洗脱；(4) 收集洗...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾琼，李艳萍，古练权，黄志纾，欧田苗，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]