用于检测禽流感Ｈ５Ｎ１和新城疫病毒的引物及其检测方法和试剂盒技术

本发明专利技术提供了用于检测禽流感Ｈ５Ｎ１和新城疫病毒的引物，该引物包括所述禽流感Ｈ５Ｎ１的ＨＡ基因中的序列或其互补序列以及所述新城疫病毒的Ｆ基因中的序列或其互补序列，如ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１～８所示的寡核苷酸或其互补链。本发明专利技术还提供了检测禽流感Ｈ５Ｎ１和新城疫病毒的方法和试剂盒，利用上述引物，通过多重环介导的等温扩增方法对禽流感Ｈ５Ｎ１和新城疫病毒的核苷酸序列进行扩增。本发明专利技术的引物特异性强、灵敏度高；本发明专利技术的检测ＮＤＶ和Ｈ５Ｎ１的ｍ－ＬＡＭＰ方法及其试剂盒新型有效，可检测多个病毒的混合样品，不需变温扩增仪器，适合在条件简陋的实验室以及发展中国家得到进一步推广。

Primer for detecting avian influenza H5N1 and Newcastle disease virus and detection method and kit thereof

The present invention provides a primer for detection of avian influenza and Newcastle disease virus H5N1, the sequence of primers including HA gene sequence of the avian flu in H5N1 or its complementary sequence and the Newcastle disease virus F gene or its complementary sequence, such as oligonucleotide SEQ ID NO:1 ~ 8 shows or the complementary chain. The invention also provides a method and kit for detection of H5N1 avian influenza and Newcastle disease virus, using these primers, through multiple loop mediated isothermal amplification method of nucleotide sequence of H5N1 avian influenza and Newcastle disease virus were amplified. The invention of the primer with high specificity and sensitivity; m LAMP method of the present invention is the detection of NDV and H5N1 and its kit model, mixed samples can detect multiple virus, without amplification of variable temperature instrument, suitable for further promotion in the poor conditions of the laboratory and the developing countries.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及病毒检测
，特别涉及用于检测禽流感H5N1和新城疫 病毒的引物及其检测方法和试剂盒。
技术介绍
新城疫病毒(Newcastle Disease Virus， NDV)是可S1起禽类的一种以呼吸 道、消化道粘膜出血为典型症状的急性传染病。新城疫病毒属于副粘病毒科、 副粘病毒亚科、腮腺炎病毒属。禽副粘病毒共有9个血清型，即PMV-1至PMV-9， 其中新城疫病毒(NDV)是禽副粘病毒1型(APMV-1 )的主要成员。试验表明， 有250多种鸟类可被NDV感染，其危害和引发的后果极其严重。1999年农业部 发布的动物疫病目录中将其列为I类疫病，世界动物卫生组织(OIE)将其列为 A类疫病。高致病性禽流感甲型流感病毒H5N1亚型(Highly pathogenic avian influenza virus of type A of subtype H5N1 )是由正粘病毒矛牛流感病毒属病毒引起 的急性接触性传染病，被国际兽疫局(OIE)定为一类传染病，可表现出临诊症状、 呼吸道疾病、消化道症状、产蛋率下降、致死率高的急性出血性疾病.在禽类中 传染性极强，发病突然，病症本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于检测禽流感Ｈ５Ｎ１和新城疫病毒的引物，其特征在于，所述的引物包括所述禽流感Ｈ５Ｎ１的ＨＡ基因中的序列或其互补序列以及所述新城疫病毒的Ｆ基因中的序列或其互补序列。

【技术特征摘要】
1.用于检测禽流感H5N1和新城疫病毒的引物，其特征在于，所述的引物包括所述禽流感H5N1的HA基因中的序列或其互补序列以及所述新城疫病毒的F基因中的序列或其互补序列。2.根据权利要求1所述的引物，其特征在于，所述引物为SEQIDNO: 1~8所示的寡核苷酸-CATTCCACAACATACACC-3'; TGACTCCATCTATTGCCT-3'; 5' -CTGAGTCCAGTCGCAAGGACTAATCTGTTTTTCTCACCATCGGGGAA-3'; -GGATGGCAGGGAATGGTAGATGGTTTTGTATCCACTCCCCTGCTCATC-3'; -AGGAGCACAATCCAACTCAC-3'; -TGGATGTCGCCTGAGAGG-3';-GTACCACCTGCCGTGTTGCGAATTCAGTCTCTTGCAGTCCGC-3'; 5' -CAGGAATACCGGGCTTACTGCAGAATTCGGCTGATGTCTTGGTGTTG-3';或者SEQIDNO: 1 8所示的寡核香酸的互补链。3. —种检测禽流感H5N1和新城疫病毒的方法，其特征在于，通过多重环 介导的等温扩增方法对所述禽流感H5N1和新城疫病毒的核苷酸序列进4亍扩增， 其中引物包括所迷禽流感H5N1的HA基因中的序列或其互补序列以及所述新城 疫病毒的F基因中的序列或其互补序列。4. 根据权利要求3所述的检测禽流感H5N1和新城疫病毒的方法，其特征在于，所述引物为SEQIDNO: 1~8所示的寡核苷酸 5' -CATTCCACAACATACACC-3';`5' -TGACTCCATCTATTGCCT-3';-AGGAGCACAATCCAACTCAC-3'; 5' -TGGATGTCGCCTGAGAGG-3';`5' -GTACCACCTGCCGTGTTGCGAATTCAGTCTCTTGCAGTCCGC-3';`5' -CAGGAATACCGGGCTTACTGCAGAATTCGGCTGATGTCTTGGTGTTG-3';或者SEQ ID NO: 1 8所示的寡核苷酸的互补链。5. 根据权利要求3所述的检测禽流...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹永长，薛春宜，张芸，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：81[中国|广州]