一种链霉亲和素预包被酶标板的制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种链霉亲和素预包被酶标板及其制备方法与应用。本发明专利技术用碳酸盐缓冲液或柠檬酸磷酸盐缓冲液溶解链霉亲和素，得到包被缓冲液；将包被缓冲液加入酶标板中后烘干，得到链霉亲和素预包被酶标板。该制备方法简单，链霉亲和素利用率高，从而降低了链霉亲和素的用量。该制备方法对空白酶标板的质量要求不高，而且得到的链霉亲和素预包被酶标板批次稳定，链霉亲和素预包被酶标板的孔间差、批间差及稳定性均高于湿法包被，更适合长期保存。本发明专利技术所述的链霉亲和素预包被酶标板成本低，效果好，可应用于体外免疫检测技术领域或者是分子生物学中核酸检测领域。

Preparation method and application of streptavidin pre coated enzyme labeled plate

The present invention discloses a streptavidin pre labeled enzyme marker plate, a preparation method and an application thereof. The invention uses a carbonate buffer or citric acid phosphate buffer to dissolve streptavidin to obtain a buffer solution, and then, the buffer is added to the enzyme label plate to be dried, and the streptavidin labeled enzyme plate is obtained. The preparation method is simple and the utilization rate of streptavidin is high, thereby reducing the dosage of streptavidin. The quality of the preparation method of blank microtiter plate requirements is not high, and the streptavidin coated microtiter plate batch, streptavidin coated microtiter plate hole difference, difference between batches and stability were higher than the wet blanket, more suitable for long-term preservation. The streptavidin pre coated enzyme labeling plate has the advantages of low cost and good effect, and can be applied to the field of in vitro immunological detection or nucleic acid detection in molecular biology.

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于体外免疫检测
，特别涉及一种链霉亲和素预包被酶标板及其制备方法与应用。
技术介绍
链霉亲和素(streptavidin)是由链霉菌streptomyces分泌的 一 种碱性糖蛋白，易于与聚苯乙烯塑料微孔板结合。 一个链霉亲和素分子能结合4个生物素分子，二者亲和常数(K)为1015L/mol。由于生物素与亲和素有极高的结合力，生物素-亲合素系统(biotin-avidin system, BAS)已被广泛应用于酶联免疫检测中。 将链霉亲和素固定到固相载体上，利用BAS固定难包被的小分子抗原抗体或核酸的方法已得到广泛应用。链霉亲和素预包被酶标板在酶联免疫、PCR-ELISA等领域均有应用。BAS固定作用的广泛应用取决于链霉亲和素固相包被的良好效果。 目前报道的链霉亲和素包被为通过常规的湿法包被方法实现。湿法包被方法通过调节链霉亲和素的浓度和包被缓冲液优化包被效果，其过程繁琐，所需时间长，孔间差、批间差较大，稳定性差，生物素结合力低，包被的链霉亲和素固定不稳定，洗板过程易洗去。而且，湿法包被方法对酶标板的吸附力要求高，包被结束后要甩掉大部分包被液，链霉亲和素的利用率低本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种链霉亲和素预包被酶标板的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：用ｐＨ９．０～９．８、０．０１～０．０７ｍｏｌ／Ｌ的碳酸盐缓冲液或ｐＨ４．５～５．５、０．１～０．２ｍｏｌ／Ｌ的柠檬酸磷酸盐缓冲液溶解链霉亲和素，链霉亲和素的浓度为１．０～６．０μｇ／ｍｌ，得到包被缓冲液；将包被缓冲液加入空白酶标板中，每孔１００～２５０μｌ；之后置于３２～４０℃烘干，得到链霉亲和素预包被酶标板。

【技术特征摘要】
一种链霉亲和素预包被酶标板的制备方法，其特征在于包括以下步骤用pH9.0～9.8、0.01～0.07mol/L的碳酸盐缓冲液或pH4.5～5.5、0.1～0.2mol/L的柠檬酸磷酸盐缓冲液溶解链霉亲和素，链霉亲和素的浓度为1.0～6.0μg/ml，得到包被缓冲液；将包被缓冲液加入空白酶标板中，每孔100～250μl；之后置于32～40℃烘干，得到链霉亲和素预包被酶标板。2. 根据权利要求1所述链霉亲和素预包被酶标板的制备方法，其特征在于所述的 碳酸盐缓冲液为碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液。3. 根据权利要求1所述链霉亲和素预包被酶标板的制备方法，其特征在于所述的柠檬酸盐缓冲液为柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液。4. 根据权利要求1所述链霉亲和素预包被酶标板的制备方法，其特征在于所述链霉亲和素预包...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴希阳，刘宾，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：81[]