细胞外囊泡及其制备方法和应用技术

技术编号:41647345 阅读:17 留言:0更新日期:2024-06-13 02:38
本公开提供了一种细胞外囊泡,该细胞外囊泡外表面负载WNT蛋白。本发明专利技术还提供了该细胞外囊泡的制备方法和其应用。本公开通过在细胞外囊泡膜上过表达WNT载体蛋白,有效提高了细胞外囊泡的WNT蛋白负载水平,同时使WNT蛋白负载于细胞外囊泡膜表面,进而提高了WNT蛋白的稳定性和生物活性。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于分子生物学,具体涉及负载wnt蛋白及其载体蛋白的细胞外囊泡,以及该细胞外囊泡的制备方法与应用。


技术介绍

1、wnt蛋白是一种分泌性糖蛋白,广泛参与机体发育过程的调节,例如前后轴的形成、体节发生、血管发生和再生以及肢干、骨骼、牙齿、眼的形成,并与肿瘤、骨骼、肌肉、神经、皮肤、内脏等多种疾病发生相关。因此,wnt蛋白在未来再生医学中具有重要的基础研究和临床应用价值。

2、wnt蛋白的高效表达和纯化获取一直是生物
的一个重大难题。wnt蛋白在转录翻译后会经历脂质化修饰,其中最重要的一种是单不饱和的棕榈酸被连接到一个保守的丝氨酸残基上,而脂质化修饰是wnt蛋白分泌和发挥信号转导所必须的。然而,脂质化修饰后,wnt蛋白变得高度不溶于水,其释放到细胞外空间也相对困难。wnt蛋白脂质化修饰后的胞外转运机制目前尚不清楚,但研究显示细胞外囊泡在wnt蛋白的分泌和转运发挥一定作用。

3、细胞外囊泡是一种囊泡颗粒,通常定义为粒径为30~1000nm的脂质双分子层,由活细胞产生,在细胞间通讯中发挥重要作用。其中,粒径30~200nm的本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.细胞外囊泡,所述细胞外囊泡外表面负载WNT蛋白。

2.根据权利要求1所述的细胞外囊泡,其特征在于,所述细胞外囊泡包括外泌体和/或微囊泡。

3.根据权利要求1所述的细胞外囊泡,其特征在于,所述WNT蛋白选自WNT1、WNT2、WNT2B、WNT3、WNT3A、WNT4、WNT5A、WNT5B、WNT6、WNT7A、WNT7B、WNT8A、WNT8B、WNT9A、WNT9B、WNT10A、WNT10B、WNT11和WNT16中的一种或多种;

4.根据权利要求1所述的细胞外囊泡,其特征在于,所述细胞外囊泡包含载体蛋白,所述载体蛋白用于连接所述细胞外囊泡和...

【技术特征摘要】

1.细胞外囊泡,所述细胞外囊泡外表面负载wnt蛋白。

2.根据权利要求1所述的细胞外囊泡,其特征在于,所述细胞外囊泡包括外泌体和/或微囊泡。

3.根据权利要求1所述的细胞外囊泡,其特征在于,所述wnt蛋白选自wnt1、wnt2、wnt2b、wnt3、wnt3a、wnt4、wnt5a、wnt5b、wnt6、wnt7a、wnt7b、wnt8a、wnt8b、wnt9a、wnt9b、wnt10a、wnt10b、wnt11和wnt16中的一种或多种;

4.根据权利要求1所述的细胞外囊泡,其特征在于,所述细胞外囊泡包含载体蛋白,所述载体蛋白用于连接所述细胞外囊泡和wnt蛋白;

5.根据权利要求1所述的细胞外囊泡,其特征在于,分泌所述细胞外囊泡的细胞选自永生化细胞系或原代细胞,优选地,所述细胞来自hek293细胞、hek293t细胞、cho细胞、vero细胞、cos-7细胞、肿瘤细胞、胚胎干细胞、诱导多能干细胞、诱导全能干细胞或间充质干细胞;和/或

6.根据权利要求1-5任一项所述的细胞外囊泡,其特征在于,所述细胞外囊泡装载有载荷,所述载荷选自核酸、肽、蛋白质或小分子药物。

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【专利技术属性】
技术研发人员:杨令延曾永昇王世祥
申请(专利权)人:广州国家实验室
类型:发明
国别省市:

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