包含抗EGF受体抗体的药物制剂制造技术

本发明专利技术涉及包含对抗内皮生长因子受体（ＥＧＦ受体）的抗体的水性药物制剂。该制剂具有提高的贮存稳定性，即使在高温下仍如此，并可用于治疗肿瘤。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】包含抗EGF受体抗体的药物制剂本专利技术涉及包含对抗表皮生长因子受体(EGFR)的抗体的稳定药物制剂及其制备和应用。多种体外和体内研究已经证明：用抗体封闭EGFR能在不同水平对抗肿瘤，例如抑制癌细胞增殖、减少肿瘤介导的血管生成、诱导癌细胞凋亡和增强放射疗法和常规化疗法的毒性作用。MAB c225(INN：西妥昔单抗)是临床证实可与EGF受体结合的抗体。西妥昔单抗是一种可变区是鼠源而恒定区是人源的嵌合抗体。西妥昔单抗由Naramura等人在Cancer Immunol.Immunotherapy，1993，37：343-349和WO 96/40210A1中首次描述。MAB 425是一种对抗在肿瘤细胞、特别是在A431癌细胞中过表达的EGFR的鼠源抗体。其人源化和嵌合形式已经公开，例如在EP 0531 472 A1；Kettleborough等人，Protein Engineering 1991，4：773-783；Bier等人，Cancer Chemother.Pharmacol.2001，47：519-524；Bier等人，CancerImmunol.Immunother.1998，46：167-173中。EMD 72000(h425)是MAB425的一种形式，其处于I/II期临床阶段，其恒定区由κ链和人γ-1链组成。人抗-EGFR抗体可由XenoMouse技术提供，如WO 91/10741 A1、WO 94/02602 A1和WO 96/33735 A1中所述。由这项技术生产且目前正在进行临床试验的一种具体抗体是ABX-EGF(Abgenix，Crit.Rev.Oncol.Hematol.2001，38：17-23；Cancer Research 1999，59：1236-43)。其它对抗-EGFR的抗体例如在EP 0 586 002 B1和J.Natl.Cancer Inst.1993，85：27-33中有描述(MAB 528)。与其它抗体类似，抗-EGFR抗体也可以作为溶液经胃肠道外应用于治疗用途。含有这些抗体的溶液的一个具体问题是它们倾向于聚合和形成蛋白质多聚体。关于可复原的多聚体，其可归因于通过接近的两部分之间的相互作用而随机形成的分子间二硫桥。疏水作用和随之形成的非复原性多-->聚体也有可能出现。此外，将随后导致蛋白质降解反应的脱酰胺反应也会出现。会发生所述的变性反应，特别是在高温下贮存或在切应力期间(例如在运输过程中)发生。作为所述聚集倾向的后果，在抗体溶液的贮存期间发生了产品的沉淀，这意味着从装有该溶液的容器中是否可重现性地取药值得怀疑。此外，含有微粒的溶液在经胃肠道外给药时可能发生栓塞。这使得不能总是保证以可重复的方式使用抗体溶液以必须剂量对患者施用抗-EGFR抗体，而且不能在具备必需可靠性的情况下给药。尽管在注射前过滤可以去除聚集物，但是这种方法包含了一个额外的步骤而因此变得复杂，并且不是非常适于临床实施。此外，剂量可重现性的问题仍悬而未决，因为在每种情况下从溶液中分离出未知部分的抗体，而且过滤后的颗粒形成仍然代表了安全风险。用以稳定单克隆抗体的常用方法是把含有抗体和辅料的溶液冻干。但是，冻干法非常消耗时间和能源并因此很昂贵。此外，冻干粉在给药前必须首先重构。EP 0 073 371描述了用于静脉内给药的含有免疫球蛋白的制剂，为保持稳定其具有3.5至5.0的pH值。但是，如此低的pH值导致在注射处出现不期望的不相容反应。US 6,171,586 B1公开了在抗体水性制剂中使用pH4.48至5.5的乙酸盐缓冲剂、表面活性剂和多元醇，排除了用于等渗调节的NaCl。由于缺少等渗调节，在注射处同样可能发生不相容反应。作为含有特定抗体的其它实例，关于这一点可以参考EP 0 280 358、EP 0 170 983和US 5,945,098。其中，EP 0 280 358描述了向抗体溶液中添加葡聚糖来稳定对抗某些激素，其稳定性超过9个月。EP 0 170 983描述了通过与水解卵清蛋白共同加热来稳定不耐热的单克隆抗体，结果该抗体在45℃贮存7天后仍然稳定。但是，向用于胃肠道外施用的制剂中加入其它种类的蛋白质由于与之相关的问题、特别是其可能的抗原性而是不期望的。-->US 5,945,098公开了使用甘氨酸、聚山梨醇酯80和聚乙二醇来稳定免疫球蛋白G的水性溶液。DE 10133394 A1公开了使用pH6至pH8的磷酸盐缓冲剂和聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯来稳定西妥昔单抗的水性溶液。尽管这样可以显著减少肉眼可见的聚集体的形成，但是其化学稳定性、特别是在应激条件下的化学稳定性显著削弱。此外，该制剂在(极端)热应激条件下(例如在40℃下长期贮存)未显示出稳定性。本专利技术的目的是找到适于经胃肠道外给药的特别用于抗-EGFR抗体的水性剂型，其具有良好的耐受性并在室温下贮存时稳定至少24个月以上。在运输过程中切应力作用下和改变的气候条件下，特别是在升高的温度和大气湿度下也应当保持贮存稳定。此外，该制剂应当具有简单的结构，并不应包含任何毒理学观点认为可疑的辅料。令人吃惊的是，已经发现满足这些要求的溶液形式的制剂，它除了对抗表皮生长因子的抗体(抗-EGFR抗体)外，还包含缓冲剂、氨基酸和表面活性剂。因此，本专利技术涉及这样的水性药物制剂，它除了抗-EGFR抗体外，还包含缓冲剂、氨基酸和表面活性剂。为了本专利技术的目的，水性制剂是其中至少一些存在的溶剂由水组成的制剂。可能存在的其它溶剂组成全都是适于胃肠道外使用的溶剂，特别是醇类，例如乙醇、丙醇、丙二醇或甘油。水性制剂优选包含水或乙醇/水混合物作为溶剂；溶剂特别优选由水组成。所存在的抗体可以是任何抗-EGFR抗体，特别是开篇提到的鼠源、人源或嵌合抗体和已经并能够通过所述的XenoMouse技术制备的人抗-EGFR抗体。优选抗-EGFR抗体西妥昔单抗或EMD 72000或其相应的鼠源、人源或嵌合抗体类似物之一。特别优选包含西妥昔单抗或EMD 72000作为抗体的水性制剂。抗-EGFR抗体可以以0.1mg/ml至50mg/ml、优选2mg/ml至10mg/ml、特别优选约5mg/ml的浓度存在于本专利技术的制剂中。可采用的缓冲剂基本上都是生理学可接受的物质，它们适于设定预期pH，例如柠檬酸盐、乙酸盐、组氨酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、磷酸盐或-->乳酸盐，和/或其各自的游离酸或碱，以及不同盐和/或其酸或碱的混合物。缓冲剂优选由一种或多种柠檬酸盐、乙酸盐、组氨酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、磷酸盐或乳酸盐和/或其各自的游离酸或碱或者一种或多种不同盐和/或其酸或碱的混合物组成。术语“混合物”在此处涵盖了同一种酸的不同盐的混合物(例如不同柠檬酸盐的混合物)和不同酸的盐的混合物(例如柠檬酸盐和乙酸盐的混合物)。缓冲剂优选由一种或多种柠檬酸盐和/或其游离酸(例如柠檬酸、一水合柠檬酸、二水合柠檬酸三钠、一水合柠檬酸三钾)、乙酸盐和/或其游离酸(例如乙酸、乙酸钠、三水合乙酸钠)或者L-组氨酸和/或其酸加成盐(例如一水合L-组氨酸单盐酸盐)组成。本专利技术的制剂有利地包含浓度为10至100mmol/l、优选2至20mmol/l、特别优选约10mmol/l的本文档来自技高网...

【技术保护点】
水性制剂，包含抗－ＥＧＦＲ抗体、缓冲剂、氨基酸和表面活性剂。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】DE 2003-11-26 103 55 251.01.水性制剂，包含抗-EGFR抗体、缓冲剂、氨基酸和表面活性剂。2.权利要求1的制剂，其特征在于抗体是西妥昔单抗或EMD 72000或其相应的鼠源、人源或嵌合抗体类似物之一。3.权利要求2的制剂，其特征在于抗体是西妥昔单抗或EMD 72000。4.权利要求1至3中一项或多项所述的制剂，其特征在于缓冲剂由一种或多种柠檬酸盐、乙酸盐、组氨酸盐、琥珀酸盐、苹果酸盐、磷酸盐或乳酸盐和/或各自的游离酸或碱或者一种或多种不同盐和/或其酸或碱的混合物组成。5.权利要求4的制剂，其特征在于缓冲剂由一种或多种柠檬酸盐和/或其游离酸、乙酸盐和/或其游离酸或L-组氨酸和/或其酸加成盐组成。6.权利要求1至5中一项或多项所述的制剂，其特征在于氨基酸是L-精氨酸、甘氨酸或L-蛋氨酸。7.权利要求1至6中一项或多项所述的制剂，其特征在于表面活性剂是聚乙烯失水山梨醇脂肪酸酯或聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物。8.权利要求7的制剂，其特征在于聚乙烯失水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：HC马勒，R米勒，
申请(专利权)人：默克专利有限公司，
类型：发明
国别省市：DE[德国]